詳細介紹
染色步驟:1,、石蠟切片脫蠟至水,。2、重鉻酸鉀溶液浸泡過夜(需用重鉻酸鉀溶液浸泡過夜否則細胞核極易著黑色影響觀察),。3,、水洗2min4、1%的高碘酸氧化15~20min(此時配制工作液,,并將工作液放置56℃烤箱預(yù)熱)5,、流水沖洗5min,再用蒸餾水洗2次6,、切片用阻水筆畫圈,,滴加預(yù)熱的工作液,放入濕盒中加蓋(濕盒中要加入少量水,,防止染液在長時間加熱時蒸發(fā)變干)7,、40分鐘后要將切片拿出在鏡下觀察(觀察時工作液不用洗去)腎臟則以腎小球毛細血管基膜出現(xiàn)黑色為準,如果著色不夠深,,則繼續(xù)放入烤箱孵育,;肺則以真菌變?yōu)楹谏珵闇剩ㄓ械姆谓M織無真菌,則以同組有真菌的肺做參考,,如果都沒有真菌則以支氣管變黑為標準),。以后每隔10分鐘取出切片在鏡下觀察,直至染色結(jié)果滿意為止,。8,、蒸餾水稍洗9、5%的硫代硫酸鈉處理5min10,、伊紅復(fù)染(在HE染色中的伊紅后面脫水的*缸中染伊紅為佳,,伊紅復(fù)染不用染太深)直接在伊紅后面的酒精脫水,,透明,封片,。染色結(jié)果:腎小球囊基膜,、腎毛細血管球基膜和腎小管上皮基膜呈黑色。真菌,、彈性纖維和網(wǎng)狀纖維也呈灰黑色或棕黑色,。 注意事項1、六銨銀儲備液配妥后應(yīng)置于4℃的冰箱內(nèi),,一般可以保存6個月,,如果室溫僅可保存2周。六銨銀工作液僅能使用一次,;2,、腎基膜比真菌等較難顯色,因而在60℃溫箱中作用的時間也較長,;腎小管基膜一般比腎毛細血管球基膜顯色早,,但應(yīng)以后者作為標準,腎毛細血管球基膜呈黑色而背景呈淡棕黃色為宜,;3,、在低倍鏡檢時,菌體不宜著色太黑,,否則在高倍鏡下觀察則不夠清皙透亮,,在菌體密集成堆的地方顯色更要適當;4,、切片入六胺銀染色之前必須用蒸餾水浸泡洗滌,,不能用自來水,否則易出現(xiàn)沉淀,。染色用滴染法好控制染色并且要求較低,,如果用浸染法所有與試劑接觸的玻璃缸必須用蒸餾水清洗干凈。另外浸染法需要的試劑較多而且玻片在顯影液中及易出現(xiàn)銀鏡反應(yīng)使整個玻片變黑很臟影響美觀并且不易控制顯色,。
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