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上海茁彩生物科技有限公司 |
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產(chǎn)品名稱： 大鼠微管相關(guān)蛋白輕鏈3（LC3）ELISA試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格：48T/96T
品牌：zcibio
實驗樣本：血清、血漿,、細胞上清液,、組織等。
適應(yīng)物種：人,、大鼠,、小鼠、兔子等,。
應(yīng)用領(lǐng)域：僅供科研實驗,，不得用于臨床診斷。
保存條件：2~8℃,，有效期6個月,。
產(chǎn)品簡介：
預(yù)期應(yīng)用： 大鼠微管相關(guān)蛋白輕鏈3（LC3）ELISA試劑盒是一個夾心酶免疫分析法體外定量檢測血清、血漿,、組織,、細胞上清及相關(guān)生物液體樣本中的濃度。
需自備的設(shè)備及試劑：
1.450±10nm濾光片酶標儀（建議儀器使用前預(yù)熱）
2.高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL,、2-20uL,、20-200uL、200-1000uL.
3.Eppendorf 移液器.
4.蒸餾水或去離子水.
5.脫脂棉吸水紙.
6.37℃恒溫箱.
7.100ml和1000ml量筒.
標本的采集與保存：
1.血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,，取上清即可檢測,，或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑,，標本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,，或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
3.組織勻漿：用預(yù)冷的 PBS (0.01mol/L, pH=7.2-7.4)沖洗組織,，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果），稱重后將組織剪碎,。將剪碎的組織不對應(yīng)體積的 PBS（一般按 1:9 的重量體積比,，比如 1g 的組織樣品對應(yīng) 9mL 的 PBS，具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整,，并做好記彔,。推薦在 PBS 中加入蛋白酶抑制劑）加入玱璃勻漿器中,，于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,，可以對勻漿液進行超聲破碎,，或反復(fù)凍融。zui后將勻漿液于 5000×g 離心 5~10 分鐘,，取上清檢測,。
4.細胞培養(yǎng)上清或其他生物標本：
請 1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測,，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注意:
1.以上標本均需密封保存,，4℃保存應(yīng)小于一周,，-20℃ 不應(yīng)超過1個月，-80℃保存可放置更久,。
2.標本使用前應(yīng)緩慢均衡至室溫,，不應(yīng)加熱使之溶解。
3.標本溶血會影響zui后檢測結(jié)果,，因此溶血標本不宜進行此項檢測,。
標本說明：
1.本公司只對試劑盒本身負責(zé)，不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負責(zé),，請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量,，預(yù)留充足的樣本。
2.實驗前應(yīng)預(yù)測標本含量,，如果標本濃度過高,，應(yīng)對標本進行稀釋，使稀釋后的標本符合試劑盒的檢測范圍,，計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù),。
3.若所檢樣本不包含在說明書所列樣本之中，建議進行預(yù)實驗驗證其有效性,，并注意留存樣本,。
4.使用化學(xué)裂解液制備的組織勻漿或細胞提取液可能會由于某些化學(xué)物質(zhì)的引入導(dǎo)致ELISA實驗結(jié)果偏差。
5.若樣本為細胞培養(yǎng)上清,，因該類樣本干擾因素較多,，如：細胞狀態(tài)、細胞數(shù)量,、采樣時間等,，所以可能存在檢測不出的情況。
6.某些天然蛋白或重組蛋白,，包括原核及真核重組蛋白,，可能因為產(chǎn)品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配，而不被檢測出,。
7.不能檢測含NaN3的樣品,，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
實驗原理：
將目標抗體包被于96孔微孔板中,，制成固相載體,，向微孔中分別加入標準品或標本，其中的目標連接于固相載體上的抗體結(jié)合,，然后加入微生物化的目標抗體,，將未結(jié)合的生物素抗體洗凈后，加入HRP標記和親和素,，再次*洗滌后加入TMB底物顯色,。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的目標呈正相關(guān),。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（O.D.值），計算樣品濃度,。
精密度：
精密度用樣品測定值的變異系數(shù)CV表示,。CV（%）=SD/mean×100
批內(nèi)差：取同批次試劑盒對低、中,、高值定值樣本進行定量檢測,，每份樣本連續(xù)測定20次，分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值,。
批間差：選取3個不同批次的試劑盒分別對低,、中、高值定值樣本定量測定,，每個樣本使用同一試劑盒重復(fù)測定8次,，分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批內(nèi)差: CV<10% Inter-批間差: CV<13%
警告：
本試劑盒中使用了稀硫酸作為終止液,，其具有輕微腐蝕性,，使用時應(yīng)避免接觸衣物或眼、手等皮膚暴露部位,。
優(yōu)勢:
采用全進口原料和抗體：高效,、靈敏、特異,，嚴格引進技術(shù)標準進行批量生產(chǎn),。
先進的優(yōu)化方案：穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性。
提供免費代測服務(wù)（為客戶提供來樣檢測服務(wù),，zui大限度實驗結(jié)果的有效性）
產(chǎn)品質(zhì)量保證,，提供全程技術(shù)指導(dǎo),。
友情提醒：試劑盒使用完畢后，請妥善處理相關(guān)耗材,，避免環(huán)境污染,！
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