詳細介紹
大鼠腫瘤壞死因子受體1(TNFR1)ELISA試劑盒
產(chǎn)品簡介:
樣本類型:血清,、血漿、組織,、細胞上清或其他生物樣本
檢測方法:雙抗夾心法
儲藏及保存:2-8度,,6個月
檢測原理:
將目標抗體包被于96孔微孔板中,制成固相載體,,向微孔中分別加入標準品或標本,,其中的目標連接于固相載體上的抗體結(jié)合,然后加入辣根過氧化物酶標記的抗體,,將未結(jié)合的抗體洗凈后再次洗滌后加入TMB底物顯色,。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的目標呈正相關(guān),。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(O.D.值),計算樣品濃度,。
產(chǎn)品內(nèi)容:
實驗所需儀器及設(shè)備:
實驗操作流程:
第一步:試劑盒室溫平衡 30min ,,然后從鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
第二步:設(shè)置標準品孔和樣本孔,,標準品孔各加不同濃度的標準品 50μL。
第三步:樣本孔中加入待測樣本 50μL,;空白孔不加,。
第四步:除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體 100μL,,用封板膜封住反應(yīng)孔,,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。
第五步:棄去液體,,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),,靜置 1min,,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,,如此重復(fù)洗板 5 次(也可用洗板機洗板),。
第六步:每孔加入底物 A、B 各 50μL,,37℃避光孵育 15min,。
第七步:每孔加入終止液 50μL,,15min 內(nèi),在 450nm 波長處測定各孔的 O.D 值,。
注:
大鼠腫瘤壞死因子受體1(TNFR1)ELISA試劑盒
僅供體外研究使用,,不用于臨床診斷!