詳細(xì)介紹
一,、小鼠卵清蛋白IgG2a抗體一步法ELISA試劑盒
1.1 用途
該試劑盒采用“一步"間接法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)體外定量檢測血清、血漿,、組織,、細(xì)胞或其他相關(guān)生物液體中
IgG2a濃度。
1.2 原理
將目標(biāo)抗原包被于96孔微孔板中,,制成固相載體,,向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本,其中的目標(biāo)連接于固相載體上的抗體結(jié)合,,然后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗體,,將未結(jié)合的抗體洗凈后再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(O.D.值),計(jì)算樣品濃度,。
二,、小鼠卵清蛋白IgG2a抗體一步法ELISA試劑盒組成
2.1 產(chǎn)品保存
▲未開封試劑盒,4℃保存,;已開封,,標(biāo)準(zhǔn)品-20℃保存,酶標(biāo)板加干燥劑后密封-20℃保存,,其他4℃保存,。
2.2 產(chǎn)品組成表
三、常見問題
3.1 影響ELISA試劑盒曲線的因素
標(biāo)準(zhǔn)曲線做的好與壞會(huì)直接影響到實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,,甚至是關(guān)系到實(shí)驗(yàn)的成敗,。我公司技術(shù)人員在處理售后的問題中,有不少科研朋友咨詢曲線的問題,。
下面小編將影響ELISA試劑盒曲線問題的原因做了總結(jié):
一 OD值不正常的可能原因是:
1,、試劑盒未回溫,試劑盒回溫到25℃,;
2,、溫度控制不好,控制正確溫度,;
3,、孵育時(shí)間不準(zhǔn)確,控制孵育時(shí)間,;
4、洗滌時(shí)沖擊力太大,、浸泡時(shí)間過長,、洗滌次數(shù)增 加,洗滌4-5次,,每孔250ul,,然后拍干;
5,、陽光直射,,對(duì)著風(fēng)直接吹,避風(fēng)避光,;
6,、酶標(biāo)儀的波長錯(cuò)誤,酶標(biāo)儀的波長450nm,;
7,、抗體的稀釋錯(cuò)誤,正確的稀釋抗體,;
8,、水質(zhì)問題,,用娃哈哈礦泉水代替。
二 白板的可能原因是:
1,、洗滌液配制錯(cuò)誤,,正確的配制洗滌液;
2,、少加液體(錯(cuò)加液體),,正確的步驟加液體。
三 無梯度可能原因是:
1,、標(biāo)準(zhǔn)品也污染,,換標(biāo)準(zhǔn)品點(diǎn)板;
2,、OD值不正常,,控制溫度時(shí)間在做一次;
3,、人為點(diǎn)板,,不要點(diǎn)板。
四 線性不好可能原因是:
OD值不正常,,控制溫度時(shí)間在做一次,。
?四、溫馨提示
試劑盒使用完畢后,,請妥善處理相關(guān)耗材,,避免環(huán)境污染!