植物活體轉(zhuǎn)化系統(tǒng)在中草藥代謝研究方向的應(yīng)用案例
中草藥是指以植物的種子、根,、葉,、花,、果實(shí)、樹皮等部位為原料,,經(jīng)過采摘,、曬干、加工等工序制成的藥材,。中草藥是我國傳統(tǒng)中醫(yī)藥文化的重要組成部分,,被廣泛應(yīng)用于疾病的預(yù)防和治療。中草藥不同于西藥,,它的作用是綜合的,、溫和的、緩慢的,,通常需要長期的使用,。中草藥的功效因藥材部位、采摘季節(jié),、制作方法等因素而有所不同,。例如,人參具有補(bǔ)氣養(yǎng)血,、增強(qiáng)免疫力等功效;枸杞能夠明目,、補(bǔ)腎益精、延緩衰老;黃芪具有益氣固表,、提高機(jī)體免疫力等作用,。中草藥中具有豐富的藥物資源,如何充分的從中挖掘出有效的藥用成分,,通過現(xiàn)代化的生物工程手段解析代謝途徑,、研究基因功能,提高有效成分含量是一個(gè)大家都非常關(guān)注的研究熱點(diǎn)方向,。
植物活體轉(zhuǎn)化系統(tǒng)利用高功率的真空泵,,將真空箱中的空氣迅速抽掉,在極短的時(shí)間內(nèi),,達(dá)到極低壓力/高真空度,,從而讓受試植物或者組織能夠快速的形成孔洞,讓農(nóng)桿菌通過孔洞進(jìn)入到組織中,,侵染,,達(dá)到轉(zhuǎn)化植物的目的。
植物活體產(chǎn)品特點(diǎn)
重復(fù)性好:采用芯片控制,,壓力,、時(shí)間控制準(zhǔn)確,盡可能的避免人為操作失誤,,保證不同批次實(shí)驗(yàn)間的準(zhǔn)確性,、重復(fù)性,。
成功率高:植物瞬轉(zhuǎn),可以整片葉子全部轉(zhuǎn)化;轉(zhuǎn)基因,,農(nóng)桿菌難侵染的外植體,,可以提高侵染效率。
操作性好:采用液晶觸摸屏操作,,簡單的設(shè)置幾個(gè)參數(shù),,一鍵啟動,輕松完成整個(gè)實(shí)驗(yàn),。
轉(zhuǎn)化效率高:大量瞬轉(zhuǎn),,多棵植株、同一株植物上的所有葉片,,可以在1分鐘全部轉(zhuǎn)化成功,。
智能化控制:定制的控制系統(tǒng),對所用硬件實(shí)現(xiàn)全自動控制,。
不銹鋼內(nèi)腔:采用一次成型304鏡面不銹鋼,,方便后續(xù)清理、不容易滋生細(xì)菌等有害微生物,。
應(yīng)用領(lǐng)域:植物瞬時(shí)表達(dá),,植物轉(zhuǎn)基因,植物育種,,植物代謝工程,生物反應(yīng)器,。
植物活體在中草藥代謝研究中的應(yīng)用:
各種中草藥葉片瞬時(shí)轉(zhuǎn)化體系的建立
葉片的形狀,、表面有蠟質(zhì)、絨毛等,,常規(guī)的手動注射難以成功,,可以借助PTS實(shí)現(xiàn)葉片注射,建立瞬時(shí)表達(dá)體系
中草藥VIGS平臺的建立
在建立瞬時(shí)表達(dá)體系的基礎(chǔ)上,,構(gòu)建VIGS載體,,可以用于通過基因敲除的方式,驗(yàn)證基因的功能
轉(zhuǎn)基因體系的建立
對于再生體系已經(jīng)建立的中草藥物種,,但是外植體/愈傷組織,,因?yàn)榧?xì)胞壁等原因,農(nóng)桿菌難以侵染成功的,,可以嘗試使用PTS增加農(nóng)桿菌侵染的效率,,提高轉(zhuǎn)化的成功率;已經(jīng)建立轉(zhuǎn)化體系的,借助PTS,,提高轉(zhuǎn)化率
中草藥代謝產(chǎn)物基因功能驗(yàn)證
在轉(zhuǎn)基因體系無法建立的情況下,,可以通過將功能基因在自身葉片,,或者煙草葉片中瞬時(shí)表達(dá),通過觀察表型,、分析葉片的表達(dá)產(chǎn)物來驗(yàn)證功能,,通過VIGS也是一種手段
應(yīng)用案例:
1、丹參,,幼芽轉(zhuǎn)化
2,、火麻(大MA),幼苗瞬時(shí)表達(dá),;
3,、煙草
4、鐵皮石斛,,莖瞬時(shí)表達(dá),;
5、青蒿,、黃芩(侵染水漬化)
在2024年植物活體即將上市
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