原理
分子生物學(xué)是當(dāng)前生命科學(xué)領(lǐng)域的前沿學(xué)科,其理論與技術(shù)已滲透到各學(xué)科領(lǐng)域,而分子生物學(xué)實驗在生命科學(xué)研究中顯得相當(dāng)重要。在實際工作中,許多實驗材料比如動物身上的肌肉組織,、結(jié)締組織,、骨組織、毛發(fā)組織等,植物的根,、莖,、葉、種子等均需磨碎,隨后才能對其成分,、基因與蛋白質(zhì)及結(jié)構(gòu)和功能進行研究,。
液氮研磨在分子生物學(xué)實驗中應(yīng)用廣泛,特別是有關(guān)核糖核酸(RNA)、脫氧核糖核酸(DNA)的分離,。液氮的溫度為一196℃,它既能使各種組織成分不易被破壞或降解,又能使組織變硬,脆性增加易于磨碎,。正是由于液氮的溫度極低,操作時要特別小心。液氮研磨,,一是為了終止細(xì)胞內(nèi)外一切生物反應(yīng),,比如提取RNA時,防止RNA酶的降解反應(yīng)等,;還有一個原因,就是在液氮中的細(xì)胞*凍硬了,,研磨可以達到很好的破胞效果,,將細(xì)胞磨成粉,使里邊的物質(zhì)釋放出來,。
液氮研磨注意事項:
1,、把樣品放入研缽中,倒入少量液氮,,液氮就會像沸騰了一樣,,這時候迅速研磨。動作一定不要太大,,最好是用手心的力量往下旋轉(zhuǎn)著碾碎,,動作太大會把樣品濺飛,如果樣品量很少直接就可能磨沒了,。大約幾秒沸騰就結(jié)束,,再磨幾下就可以再加入點液氮,重復(fù)以上過程,直到認(rèn)為磨得比較細(xì)了為止,。
2,、液態(tài)氮在常壓時的溫度相當(dāng)?shù)牡停坏┡c物體表面接觸將迅速地沸騰,,同時也會帶走相當(dāng)大量的熱能,。因此,使用液態(tài)氮時須額外注意,,避免與皮膚的直接接觸,。
3、裝填時應(yīng)穿戴護具,,如:防凍手套,。切忌使用棉質(zhì)手套,棉質(zhì)手套會借由毛細(xì)現(xiàn)象吸著大量的液態(tài)氮而提高凍傷的可能性(甚至比不穿戴還要危險),。
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