菌株名稱:產(chǎn)腸毒素大腸埃希氏菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,,ETEC)。
菌株編號(hào):GDMCC1.2970,,GDMCC 是廣東省微生物菌種保藏中心的縮寫,,該編號(hào)是菌株在該保藏中心的特定標(biāo)識(shí)。
質(zhì)量控制:用于食品,、藥品,、環(huán)境等領(lǐng)域中與 ETEC 相關(guān)檢測(cè)的質(zhì)量控制,可對(duì)檢測(cè)方法,、培養(yǎng)基,、試劑等進(jìn)行質(zhì)量評(píng)估和驗(yàn)證。比如驗(yàn)證培養(yǎng)基對(duì) ETEC 的生長(zhǎng)支持能力,、選擇性和特異性,,確保檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠8。
方法驗(yàn)證:在相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)方法的驗(yàn)證中,,作為標(biāo)準(zhǔn)菌株確認(rèn)檢測(cè)方法的準(zhǔn)確性和可靠性,,包括增菌、分離,、鑒定等環(huán)節(jié)能否有效檢出 ETEC,。
實(shí)驗(yàn)室能力評(píng)估:幫助實(shí)驗(yàn)室評(píng)估自身的檢測(cè)能力和操作水平。定期使用該菌株進(jìn)行實(shí)驗(yàn),,可及時(shí)發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)過程中存在的問題,,保證微生物檢測(cè)結(jié)果的質(zhì)量,滿足相關(guān)法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)的要求,。
形態(tài)特征:革蘭氏陰性桿菌,,大小約為 (0.4 - 0.7)μm×(1 - 3)μm,無芽孢,,多數(shù)菌株有周身鞭毛,,能運(yùn)動(dòng),有菌毛,。
培養(yǎng)特性:兼性厭氧,,在普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好。最適生長(zhǎng)溫度為 37℃,,最適 pH 為 7.2 - 7.4,。在麥康凱培養(yǎng)基上生長(zhǎng)成紅色菌落,,菌落圓而突起,能發(fā)酵乳糖4,。
生化特性:能分解多種糖(醇,、苷)類,使其產(chǎn)酸或產(chǎn)氣,;吲哚試驗(yàn)和 M.R. 試驗(yàn)均為陽性,;V.P. 試驗(yàn)和檸檬酸鹽利用試驗(yàn)均為陰性。含熱不穩(wěn)定性腸毒基因(lt 或 elt)和人源熱穩(wěn)定性腸毒素基因(stib 或 estib),,可產(chǎn)生腸毒素,,刺激腸道上皮細(xì)胞分泌大量液體和電解質(zhì),導(dǎo)致腹瀉和脫水等癥狀1,。
通常采用西林瓶包裝,,內(nèi)裝凍干粉。常見規(guī)格可能為 1 支 / 盒等,,具體會(huì)因產(chǎn)品批次和銷售形式有所不同,。
應(yīng)置于 - 20℃保存,避免反復(fù)凍融,,以保持菌株的活性,。若為短期保存,也可在 2 - 8℃下存放4,。
復(fù)蘇:?jiǎn)㈤_前,,用 75% 酒精棉消毒西林瓶表面。在無菌條件下,,打開西林瓶膠塞,,加入復(fù)蘇液,將凍干菌種制成懸浮液,,然后用無菌滴管或移液器吸取適量,,移至非選擇性固體培養(yǎng)基平板或液體培養(yǎng)基上,按推薦的培養(yǎng)條件進(jìn)行培養(yǎng)和傳代保存,。推薦的復(fù)蘇培養(yǎng)基為腦心浸液培養(yǎng)基,,培養(yǎng)條件為 36℃±1℃,培養(yǎng) 24 - 48 小時(shí),。
培養(yǎng)和傳代:購買后應(yīng)在保質(zhì)期內(nèi)使用,,復(fù)蘇后的菌種一般宜傳代 2 - 3 次后使用,菌種傳代 5 次后建議棄置,。培養(yǎng)時(shí)需按照推薦的培養(yǎng)條件進(jìn)行,,保存溫度為 2 - 8℃,轉(zhuǎn)接頻率為一個(gè)月,。