菌株名稱:產(chǎn)氣莢膜梭菌(Clostridium perfringens),。
菌株編號(hào):FSCC(T)137002,F(xiàn)SCC 代表食品安全菌種保藏中心,。
質(zhì)量控制:用于食品,、藥品、環(huán)境等領(lǐng)域中與產(chǎn)氣莢膜梭菌相關(guān)檢測(cè)的質(zhì)量控制,??蓪?duì)檢測(cè)方法、培養(yǎng)基,、試劑等進(jìn)行質(zhì)量評(píng)估和驗(yàn)證,,如驗(yàn)證培養(yǎng)基對(duì)產(chǎn)氣莢膜梭菌的生長(zhǎng)支持能力、選擇性和特異性等,。
方法驗(yàn)證:在相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)方法的驗(yàn)證中,,作為標(biāo)準(zhǔn)菌株確認(rèn)檢測(cè)方法的準(zhǔn)確性和可靠性,包括增菌,、分離,、鑒定等環(huán)節(jié)能否有效檢出產(chǎn)氣莢膜梭菌。
實(shí)驗(yàn)室能力評(píng)估:幫助實(shí)驗(yàn)室評(píng)估自身的檢測(cè)能力和操作水平,,定期使用該菌株進(jìn)行實(shí)驗(yàn),,可及時(shí)發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)過程中存在的問題,,以保證微生物檢測(cè)結(jié)果的質(zhì)量。
形態(tài)特征:革蘭氏陽(yáng)性粗大桿菌,,兩端鈍圓,,單個(gè)或成雙排列,偶見鏈狀,。無(wú)鞭毛,,不能運(yùn)動(dòng)。在機(jī)體內(nèi)可產(chǎn)生明顯的莢膜,,芽孢橢圓形,,位于菌體中央或次極duan,芽孢直徑不大于菌體,,在一般培養(yǎng)時(shí)不易形成芽孢,,在無(wú)糖培養(yǎng)基中有利于形成芽孢。
培養(yǎng)特性:為厭氧菌,,對(duì)厭氧程度的要求并不太嚴(yán),。在血平板上,多數(shù)菌株有雙層溶血環(huán),,內(nèi)環(huán)完quan溶血,,是由于 θ 毒素的作用,外環(huán)不完quan溶血?jiǎng)t是由 α 毒素所致,。在庖肉培養(yǎng)基中培養(yǎng)數(shù)小時(shí)即可見到生長(zhǎng),,產(chǎn)生大量氣體,肉渣或肉塊變?yōu)槁詭Х凵?,但不被消化,。生長(zhǎng)適宜溫度為 37 - 47℃,多認(rèn)為 43 - 47℃為最宜,,在適宜條件下增代時(shí)間僅 8min,。
通常采用西林瓶包裝,內(nèi)裝凍干粉,。常見規(guī)格可能為 1 支 / 盒等,,具體會(huì)因產(chǎn)品批次和銷售形式有所不同。
安瓿凍干和培養(yǎng)物菌種應(yīng)在 2 - 8℃保存,。西林瓶請(qǐng)置于 - 20℃保存,,避免反復(fù)凍融,以保持菌株的活性7,。
復(fù)蘇:復(fù)蘇前應(yīng)準(zhǔn)備適于該菌種生長(zhǎng)的培養(yǎng)基和培養(yǎng)設(shè)備,,所有操作均應(yīng)在符合生物安全保護(hù)及無(wú)菌條件下進(jìn)行。啟開前,用 75% 酒精棉消毒西林瓶表面,。在無(wú)菌條件下,,打開西林瓶膠塞,加入復(fù)蘇液,,將凍干菌種制成懸浮液,然后用無(wú)菌滴管或移液器吸取適量,,移至非選擇性固體培養(yǎng)基平板或液體培養(yǎng)基上,,按推薦的培養(yǎng)條件進(jìn)行培養(yǎng)和傳代保存。
培養(yǎng)和傳代:產(chǎn)氣莢膜梭菌質(zhì)控菌種購(gòu)買后應(yīng)在保質(zhì)期內(nèi)使用,,復(fù)蘇后的菌種一般宜傳代 2 - 3 次后使用,,菌種傳代 5 次后建議棄置。培養(yǎng)時(shí)需按照推薦的培養(yǎng)條件進(jìn)行,,一般為 36℃±1℃,,48 - 72 小時(shí)厭氧培養(yǎng)。