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葉綠素?zé)晒獾墓庾V特證
葉綠素?zé)晒膺b感的探測對象是夫瑯禾費暗線中的穩(wěn)態(tài)葉綠素?zé)晒廨椓炼?，其熒光特征來自于植物葉片的光下熒光發(fā)射現(xiàn)象，屬于穩(wěn)態(tài)熒光發(fā)射光譜的譜線強度,。在穩(wěn)態(tài)熒光光譜上,，存在3個明顯的發(fā)射峰，其一是位于藍綠光波段的發(fā)射峰,。其二是位于紅光波段的發(fā)射峰,，其三是位于遠紅波段的發(fā)射峰。紅光波段的發(fā)射峰與光系統(tǒng)II反應(yīng)中心電子傳遞效率有關(guān),，遠紅光波段的發(fā)射峰與光系統(tǒng)I,、光系統(tǒng)II天線色素分子的電子傳遞效率有關(guān)。
葉綠素?zé)晒鈨x發(fā)生熒光的過程
處于基態(tài)zui低振動能級的熒光物質(zhì)分子受到紫外線照射后,，吸收了和它所具有的特征頻率相*的光線,，從而躍遷到*電子激發(fā)態(tài)的各個振動能級。
被激發(fā)到*電子激發(fā)態(tài)的各個振動能級的分子,，通過無輻射躍遷,，降落到*電子激發(fā)態(tài)的zui低振動能級。
降落到*電子激發(fā)態(tài)的zui低振動能級的分子,，繼續(xù)降落到基態(tài)的各個不同振動能級,，同時發(fā)射出相應(yīng)的光量子，即熒光,。
到達基態(tài)的各個不同真振動能級的分子,，在通過無輻射躍遷zui后回到基態(tài)的zui低振動能級。
葉綠素?zé)晒鈨x熒光動力學(xué)
葉綠素?zé)晒鈩恿W(xué)包含著光合作用過程的重要信息,，如光能的吸收和轉(zhuǎn)化,。能量的傳遞與分配,、反應(yīng)中心的狀態(tài)，過剩能量的耗散以及反映光合作用的光抑制和光破壞,。應(yīng)用葉綠素?zé)晒饪梢詫χ参锊牧线M行原位,、無損傷的檢測，且操作步驟簡單,。所以葉綠素?zé)晒庠絹碓绞艿饺藗兊那嗖A,，在光合生理和逆境生理等研究領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用。
葉綠素?zé)晒鈨x原理說明
葉片是進行光合作用的主要器官,，葉綠體是進行光合作用的主要細胞器,。葉綠體是由葉綠體膜包裹起來的組織，膜內(nèi)主要含有基質(zhì),、基粒,、類囊體。葉綠體的光合色素主要集中在基粒之中,，光能轉(zhuǎn)換為化學(xué)能的主要過程是在基粒中進行的,。
在高等植物體內(nèi)含有光合色素包括葉綠素和類胡蘿卜素兩種，一般情況下以3:1的比例存在于類囊體的膜中,。葉綠素分為葉綠素a和葉綠素b,類胡蘿卜素分為胡蘿卜素和葉黃素,。 葉綠素不溶于水，而溶于有機溶劑,。從化學(xué)性質(zhì)講,，葉綠素是葉綠酸的產(chǎn)物，葉綠酸的兩個羥基分別被甲醇和葉綠醇酯化而得到的,，對光,、熱、酸敏感,，能發(fā)生皂化反應(yīng),，性質(zhì)不穩(wěn)定。
光合作用是高等植物從外界環(huán)境獲取能量的重要途徑,，是高等植物進行生命活動的基礎(chǔ),。由綠色植物發(fā)射的葉綠素?zé)晒庖砸环N復(fù)雜的方式表達光合作用活性和行為。當(dāng)光子照射綠色植物的葉片時,，光能在葉片的分配有反射,、透射和吸收等三種主要的去激途徑。葉綠素分子吸收的光能除了大部分進行光化學(xué)反應(yīng)外,，少部分會以熱耗散和熒光的方式釋放出來,。
熒光產(chǎn)生的物理機制是斯托克斯位移，當(dāng)一定波長的光子碰撞到葉綠素分子時，光子可能被分子吸收,，使分子的能量升高,，處于較高能態(tài)的分子是不穩(wěn)定的，一般要通過釋放吸收的能量而回到穩(wěn)定的基態(tài)即zui低能級,，其中一部分將以輻射的形式回到基態(tài),。分子必須在吸收一定頻率范圍的激發(fā)光后，通過振動馳豫回到*激發(fā)電子態(tài)的zui低能級,，由此向下的輻射躍遷才可能產(chǎn)生熒光,，因此熒光的波長一般要比激發(fā)光的波長要長,。
在植物光合作用過程中,，葉綠素色素分子對光能的吸收及能量的轉(zhuǎn)變途徑中包括著極復(fù)雜的生物物理及生物化學(xué)過程。在葉綠體內(nèi)激發(fā)能從葉綠素b向葉綠素a的傳遞效率幾乎達到100%,所以檢測不到葉綠素b的熒光,，因此,，在對葉綠素?zé)晒膺M行分析時，通常是指葉綠素a發(fā)出的熒光,，光合作用過程中有兩種不同的光化學(xué)反應(yīng),，他們發(fā)生在相關(guān)聯(lián)的不同色素基團中，這些基團被稱為PSI和PSII,。在常溫下,，PSI色素系統(tǒng)基本不發(fā)熒光，接近95%的被檢測到的,，葉綠素?zé)晒庑盘杹碓从赑SII相關(guān)的葉綠素分子,，因此，我們研究的葉綠素?zé)晒夤庾V主要由PSII相關(guān)葉綠素分子產(chǎn)生的,。
Shutter葉綠素?zé)晒鈨x產(chǎn)品特點
全自動開合葉室,，程序控制葉室閉合進行暗適應(yīng)測量，測量ΦII, FV/FM, PAR和溫度,，快門實現(xiàn)葉綠素?zé)晒庹T導(dǎo)曲線,、NPQ弛豫和RLC（快速光曲線），無人值守自動監(jiān)測,，自動增益和自動歸零功能：自動在野外進行正確設(shè)置,，數(shù)據(jù)采集器可同時操作多個傳感器，簡單開關(guān)啟動水下或陸地測量程序,，全防水可達50m,，潛水堅固不銹鋼或工程塑料設(shè)計，擴展大型外殼與電池包,，利用易用軟件選擇所供程序或設(shè)定程序,，根據(jù)程序，可自動運行達72h,，開合型傳感器可通過電腦控制,，用于預(yù)田間實驗,，增加數(shù)采可以擴展到多個傳感器（同時測量可達15個）。
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