利什曼原蟲是一種細(xì)胞內(nèi)寄生的鞭毛蟲,，其生活史分為前鞭毛體和無(wú)鞭毛體兩個(gè)時(shí)期，并需要兩個(gè)宿主才能完成其復(fù)雜的生命周期,。前鞭毛體期在無(wú)脊椎動(dòng)物（如白蛉）的消化道內(nèi)寄生,，而無(wú)鞭毛體期則在人或脊椎動(dòng)物的網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)（如巨噬細(xì)胞）內(nèi)寄生。這種寄生蟲的多樣性令人驚嘆,，寄生人體內(nèi)的利什曼原蟲主要有四種：杜氏利什曼原蟲,、熱帶利什曼原蟲、巴西利什曼原蟲及墨西哥利什曼原蟲,。它們通過白蛉叮咬傳播,，悄無(wú)聲息地侵入人體，引發(fā)一系列健康問題,。

【產(chǎn)品名稱】通用名稱：黑熱病快速檢測(cè)卡

【產(chǎn)品規(guī)格】25T

【預(yù)期用途】
利士曼（黑熱?。z測(cè)試劑盒檢測(cè)卡可用于犬內(nèi)臟利什曼原蟲（VL）抗體的定性檢測(cè)。

【檢測(cè)原理】
該檢測(cè)條的硝化纖維膜在檢測(cè)區(qū)包被了重組的VL抗原,，在質(zhì)控區(qū)包被了雞抗蛋白A,。在實(shí)驗(yàn)中，血清樣本與膠體金結(jié)合物（膠體金標(biāo)記的蛋白A）反應(yīng),，而膠體金結(jié)合物預(yù)先包被在檢測(cè)條上,。混合物在毛細(xì)管作用下沿著硝化纖維膜移動(dòng),，然后與重組的VL抗原反應(yīng),，并生成一條紅色帶。如果存在該紅色帶表明陽(yáng)性結(jié)果,，反之則為陰性結(jié)果,。

【試劑盒組成成分】

• 檢測(cè)條        25份

• 緩沖液一瓶

【儲(chǔ)存條件】
檢測(cè)條應(yīng)保存在20~30℃（室溫）直至有效期。Chase緩沖液也應(yīng)保存在20~30℃,。暴露在超過30℃溫度下（多5天）會(huì)影響檢測(cè)性能,，所以應(yīng)盡量避免。檢測(cè)條不應(yīng)冷凍保存,，并且從密封袋中取出后應(yīng)在0.5小時(shí)內(nèi)使用,，避免受濕度影響。

【樣本要求】

• 該實(shí)驗(yàn)中應(yīng)使用犬血清,，不能使用全血樣本,。不能對(duì)樣本進(jìn)行稀釋，

• 凝血后盡快離心分離血清,，以避免溶血現(xiàn)象的產(chǎn)生,。

• 應(yīng)在采集血清后盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。血清不能長(zhǎng)時(shí)間存放在室溫下,。血清于2~8℃可保存3天,，更長(zhǎng)時(shí)間則應(yīng)保存在-20℃以下,。

• 實(shí)驗(yàn)前血清平衡至室溫。冷凍的血清必須充分融解,。避免反復(fù)凍融,。

• 如果血清需要運(yùn)輸，其包裝應(yīng)該符合聯(lián)邦的傳染源運(yùn)輸法規(guī),。

【檢測(cè)步驟】

• 實(shí)驗(yàn)前讓血清平衡至室溫

• 從密封袋或瓶中取出檢測(cè)條

• 在檢測(cè)條箭頭下方加樣區(qū)加入20ul的血清

• 在小試管中,，或者96孔的組織培養(yǎng)板的微孔中加入2-3滴（150ul）的Chase緩沖液

將檢測(cè)條插入小試管或者微孔中，根據(jù)檢測(cè)條上的箭頭,，其末端應(yīng)該朝下

• 在10分鐘內(nèi)讀取結(jié)果,。在讀取結(jié)果前，背景的清晰度是十分重要的,。尤其是當(dāng)樣本含低滴度的抗利什曼原蟲抗體時(shí),，就只有一條很弱的色帶出現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)區(qū)（T）。10分鐘后讀取可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)果

注意：不要只是加入Chase緩沖液進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。必須首先加入20ul的血清,。

如果在加入捕獲緩沖液后的10-15秒并沒有觀察到膠體金的移動(dòng)，可輕輕壓檢測(cè)條上的樣本加入?yún)^(qū),，直到觀察到膠體金的移動(dòng),。

【結(jié)果解釋】

陽(yáng)性結(jié)果

實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性則質(zhì)控帶（C）和實(shí)驗(yàn)帶（T）均出現(xiàn)。一條微弱的色帶也為陽(yáng)性結(jié)果,。作為解釋指南,，實(shí)驗(yàn)區(qū)的紅色帶的顏色強(qiáng)度與抗利什曼原蟲抗體濃度相關(guān)。實(shí)驗(yàn)帶為“弱陽(yáng)性"血清樣本,，實(shí)驗(yàn)結(jié)果可能為弱陽(yáng)性但可分辨的紅色帶,，（“弱陽(yáng)性"樣本則含有對(duì)重組抗原低親和力或者低滴度抗體）。

編輯搜圖

陰性結(jié)果

實(shí)驗(yàn)為陰性,，則只有質(zhì)控帶出現(xiàn)。沒有出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)帶

無(wú)效結(jié)果

質(zhì)控帶和檢測(cè)帶都沒有出現(xiàn)結(jié)果,，若只有檢測(cè)帶出現(xiàn)紅色線,，而質(zhì)控帶沒有出現(xiàn)，則也為無(wú)效結(jié)果

建議使用新的檢測(cè)條和新血清再次進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。

注意：實(shí)驗(yàn)區(qū)的紅色帶的變化是依賴于抗利什曼原蟲抗體濃度,。然而，該實(shí)驗(yàn)不能檢測(cè)抗體的定量值和增加的百分比,。