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諾如病毒GⅠ型核酸PCR檢測(cè)試劑盒
廣州健侖生物科技有限公司
產(chǎn)品規(guī)格:50T/盒,;
保存條件:避光 -20度 保存。
我司提供各種流感病毒,、副流感病毒,、呼吸道合胞病毒、冠狀病毒,、輪狀病毒,、桿菌、鏈球菌,、熱帶病毒等等核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法),還有各種原料和質(zhì)控品,,隨時(shí)歡迎您的來電: 楊
諾如病毒GⅠ型核酸PCR檢測(cè)試劑盒
以下是我司提供的部分PCR產(chǎn)品
輪狀病毒A組核酸檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法) |
諾如病毒GⅠ型核酸檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法) |
諾如病毒GⅡ型核酸檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法) |
諾如病毒( GⅠ/GⅡ型)雙重核酸檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法) |
札如病毒核酸檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法) |
星狀病毒核酸檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法) |
札如病毒/星狀病毒雙重核酸檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法) |
腸道腺病毒核酸檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法) |
登革熱病毒通用型核酸檢測(cè)試劑盒(熒光PCR) |
盒
我司還提供其它進(jìn)口或國(guó)產(chǎn)試劑盒:登革熱,、瘧疾、流感,、A鏈球菌,、合胞病毒、腮病毒,、乙腦,、寨卡,、黃熱病、基孔肯雅熱,、克錐蟲病,、違禁品濫用、肺炎球菌,、軍團(tuán)菌,、化妝品檢測(cè)、食品安全檢測(cè)等試劑盒以及日本生研細(xì)菌分型診斷血清,、德國(guó)SiFin診斷血清,、丹麥SSI診斷血清等產(chǎn)品。
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將條扮喺一個(gè)干凈嘅1.5ml離心理上,,加15~30μl(具體決于預(yù)期嘅終產(chǎn)物濃度)嘅Elution Buffer(或者TE緩沖液)到柱基質(zhì)上,,室溫放置1min,13000xg離心1min以打DNA,。*次打可以洗出70-80%嘅結(jié)合DNA,。如果再打一次嘅話,可以將殘余嘅DNA打出嚟,,不過噉嘅濃度就會(huì)較低,。
2.鏈接反應(yīng)(以Takara公司pMDTM18-T Simple Vector Kit為例)
1)喺微量離心理中配制下列DNA溶液全量為5μl。
pMDTM18-T Simple Vector 1μl
Insert DNA 0.1 pmol~0.3 pmol
dH2Oup to 5μl
2)加5μl(等量)嘅Solution I,。
3)16℃反應(yīng)半個(gè)鐘,。(2 kbp以上長(zhǎng)片段PCR產(chǎn)物進(jìn)行DNA克隆時(shí),鏈接反應(yīng)時(shí)間請(qǐng)心命到數(shù)鐘),。
4)全量(10μl)加到100μl感受態(tài)細(xì)胞中,,雪中放置半個(gè)鐘。
5)42℃加熱9個(gè)秒鐘之后,,再喺雪中放置一分鐘,。
6)加890μl LB培養(yǎng)基,37℃振蕩培養(yǎng)60分鐘,。
7)喺含有X-Gal,、IPTG、Amp嘅LB瓊脂平板培養(yǎng)基上培養(yǎng),,形成單菌落,。計(jì)數(shù)白色、藍(lán)菌落,。
8)揀白色菌落,,鑒定載體中插入片段嘅長(zhǎng)度大小。
注意事項(xiàng)
1.使用新鮮嘅電泳緩沖液TAE Buffer。唔好重復(fù)使用,,其PH嘅升高會(huì)少產(chǎn)量,。
2.唔論采取何種方法回收DNA,喺回收過程中,,要盡量少打體積嚟提高收得率同濃度,,以方便后續(xù)用。
3.由膠上回收DNA時(shí),,應(yīng)盡量縮短光照時(shí)間并采用長(zhǎng)波長(zhǎng)紫之外,,燈(300-360nm),以少紫外光對(duì)DNA嘅切割,。DNA曝露喺紫之外,,燈下唔超過30秒。
4.鏈接反應(yīng)時(shí)間系與溫度密切有關(guān),,因?yàn)榉磻?yīng)速度隨溫度嘅提高而加快,。通常可采用16℃鏈接4個(gè)鐘為宜,,如系平四鏈接需要適當(dāng)心命反應(yīng)時(shí)間以提高鏈接效率,;喺選擇反應(yīng)嘅溫度與時(shí)間關(guān)系嘅時(shí)候,都要諗喺反應(yīng)系統(tǒng)中其他因素嘅影響,。
5.鏈接反應(yīng)嘅成過程應(yīng)注意槍頭嘅潔凈以逃過造成對(duì)酵素嘅污染,,為防止酵素活性降低,攞酵素時(shí)應(yīng)喺雪上用且動(dòng)作快手,。
6.鏈接反應(yīng)應(yīng)系25℃以下進(jìn)行,,溫度升高較難形成環(huán)狀DNA,影響鏈接效率,。長(zhǎng)片段PCR產(chǎn)物(2kb以上)進(jìn)行鏈接嘅時(shí)候,,鏈接反應(yīng)時(shí)間應(yīng)心命到數(shù)鐘。
7.進(jìn)行克隆嘅時(shí)候,,Vector DNA同Insert DNA嘅摩爾數(shù)過一般為1:2~10,。根據(jù)實(shí)驗(yàn)情況揀啱嘅摩爾數(shù)過。
8.用高效嘅感受態(tài)細(xì)胞(轉(zhuǎn)化效率≥1×108 cfu/μg pUC19),,噉先可能得到比較理想嘅陽性克隆,。