輪狀病毒A組核酸PCR檢測試劑盒

廣州健侖生物科技有限公司

產(chǎn)品規(guī)格：50T/盒,；

 保存條件：避光 -20度 保存,。

    我司提供各種流感病毒、副流感病毒,、呼吸道合胞病毒、冠狀病毒,、輪狀病毒,、桿菌、鏈球菌,、熱帶病毒等等核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）,，還有各種原料和質(zhì)控品，隨時歡迎您的來電：  楊

輪狀病毒A組核酸PCR檢測試劑盒

以下是我司提供的部分PCR產(chǎn)品

我司還提供其它進口或國產(chǎn)試劑盒：登革熱,、瘧疾,、流感、A鏈球菌,、合胞病毒,、腮病毒,、乙腦、寨卡,、黃熱病,、基孔肯雅熱、克錐蟲病,、違禁品濫用,、肺炎球菌、軍團菌,、化妝品檢測,、食品安全檢測等試劑盒以及日本生研細菌分型診斷血清、德國SiFin診斷血清,、丹麥SSI診斷血清等產(chǎn)品,。

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1。細胞懸液嘅制備
1）凍融細胞樣品喺開始使用前應(yīng)解凍,。Pellet離心分離架嘛細胞,，用PBS洗滌細胞，用200℃凍（4°C.）PBS再懸浮細胞,。繼續(xù)執(zhí)行本協(xié)議嘅第二步,。
2）喺懸浮液中生長嘅細胞，通過喺離心理中旋轉(zhuǎn)1200×g,，令顆粒5×106細胞,。擗上清液，用PBS一次洗滌細胞,，用200℃凍（4°C.）PBS再懸浮細胞,。
3）喺單層中生長嘅細胞，透過使用胰蛋白酶處理或者用膠差佬刮擦嚟收獲細胞,。兩次洗滌細胞,，用200℃凍（4°C.）PBS再懸浮細胞。
2,。添加25μL嘅OB蛋白酶同渦流撈好,。喺65℃水浴中哺育五分鐘完成*溶解。
三,。任選：培養(yǎng)細胞具有高水平嘅RNA,，將使用應(yīng)該試劑盒與DNA公司純化。雖然佢唔會煩PCR,，但此時RNA可以畀抹得甩,。加5UL（當5×106）RNase A（25 mg/ml），并喺室溫下哺育2-5分鐘,。
4,。添加220 UL緩沖區(qū)BL同渦流撈,。喺70℃下哺育十分鐘，加緩沖液BL可形成輕質(zhì)沉淀物,，但唔煩DNA回收,。根據(jù)起始物料量較緩沖液BL嘅體積。
5,。加220 UL無水乙醇（室溫,，96%-100%），并以大嘅速度旋轉(zhuǎn)十秒,。如果喺呢一啲上可以睇到降水,，就通過上下十次嘅吸塵嚟打爛降水。
6,。集結(jié),？DNA柱喺2毫升有冇收集理（講嚇嘢喇！）,。將成裂解物由步驟6轉(zhuǎn)移到包可能形成嘅任何沉淀物嘅柱中,。離心機喺8000×g，一分鐘結(jié)合DNA,。拋棄流動液體,。
7。（可選）如果使用大于30毫克嘅組織,，重復(fù)噉將剩余嘅裂解物轉(zhuǎn)移到柱中,，如上所述離心。確保所有裂解物都通過柱,。

一,。細胞懸液之制備
1）凍融細胞樣于始用前應(yīng)解。Pellet離離細胞,，以PBS滌細胞,，以二百真冷（四度心殿）PBS復(fù)懸浮細胞。仍行本言之第二步,。
二）在懸浮液中生之細胞,，因于心管中旋1200×g，使里五×106細胞,。棄上清液，以PBS一滌細胞,，以二百真冷（四度心殿）PBS復(fù)懸浮細胞,。
三）在單中生之細胞，因用胰蛋白酶處或以橡膠jing察刮擦來獲細胞,。再洗細胞,，以二百真冷（四度心殿）PBS復(fù)懸浮細胞,。
二。添得二十五μ孔之OB蛋白酶與渦流混善,。在六十五真水浴傴伏五深所鐘中軍,，成全散。
三,。選：養(yǎng)細胞有優(yōu)者RNA,，將用其試劑盒與DNA共化。雖其不擾PCR,，然此RNA可除,。入5UL（設(shè)五×106）RNase A（二十五mg ml。）,，并于室溫下傴伏2-5深所鐘,。
四。添220 UL緩沖區(qū)BL與渦流混,。在七十真下傴伏十深所鐘,，入緩沖液BL可成輕質(zhì)沉淀物，而不擾DNA收,。因起物料量調(diào)緩沖液BL之積,。
五。220 UL無水乙醇（室溫加入,，96%-100%）,，并以大捷旋十五秒。若在此間可見降,，則通上下十次之吸塵來破降,。
六。集,？DNA柱于二毫升收管（供,。。將全解坼物自化六移該可成之所沉淀物之柱中,。離心機在8000×g,，合DNA深所鐘。,。棄流汁,。
七。（士）若用于三十毫克者也,，重地將余者解坼物移柱中,，如上所述離心。保有解坼物皆因柱,。

1,。細胞懸濁液を準備する
1）凍結(jié)細胞試料はこのプロトコルを開始する前に解凍する必要があります,。遠心分離法による細胞ペレット、pbsで細胞を洗って,、200ul寒さで細胞を再懸濁する（4°c）,。このプロトコルのステップ2に進みます。
2）懸濁液中の細胞成長のために,、ペレット5×106細胞回転によって1200×gの遠心管における,。上澄みを捨て、およびpbsで一旦細胞を洗って,、200ul寒さで細胞を再懸濁する（4°c）,。
3）単分子層における細胞成長のために、どちらのゴムの警官とトリプシン処理や擦り傷による細胞採取,。2回の細胞と細胞を洗って,、200ul寒さで再懸濁する（4°c）。
2,。obプロテアーゼと渦のウルの25のミックスを追加します,。*な溶解効果への5分のための浴槽では65°cでインキュベートした。
3,。オプション：培養(yǎng)細胞のrnaこのキットを用いたdnaを精製するのに高いレベルを持っています,。それはpcrに干渉しない間、この點で除去してもよい,。5ul追加（5×106）rnアーゼa（25 mg／ml）とインキュベートルームの溫度で2?5分のための組織プロトコルを続行してください,。
4。220 ulバッファblと渦を混合物に加えてください,。10分うっすらとした沈殿物をバッファの追加についての形成のための70°cで孵化するが,、dnaの回復(fù)を妨げる。バッファの量は原料の量に基づいて要求を調(diào)整します,。
5,。220 ul（無水エタノールを加え、室溫96-100）との混合物を徹底的に15秒間のマキシの速度で成功します,。降水量はこの點で見られることができるならば,、アップとダウンの10倍の分注による降水を破る。
6,。は,、hibindを集めますか？2 mlコレクションチューブにおけるdnaカラム（提供）,。ステップ6から形成されたかもしれないどんな析出物を含む列への全溶解液を転送します,。8000×g dnaに結(jié)合して1分で遠心分離機。フロー液體を捨ててください。
7,。（オプション）を使用するならば、組織は30 mg,、殘りの溶解液を上記のように,、遠心分離カラムに移動を繰り返します。ライゼートの全てのカラムを通過したことを確認してください,。