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口蹄疫病毒A型核酸PCR檢測試劑盒
廣州健侖生物科技有限公司
產(chǎn)品規(guī)格:50T/盒;
保存條件:避光 -20度 保存,。
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口蹄疫病毒A型核酸PCR檢測試劑盒
以下是我司提供的部分PCR產(chǎn)品
口蹄疫病毒A型核酸檢測試劑盒 |
口蹄疫病毒O型核酸檢測試劑盒 |
小反芻病毒核酸檢測試劑盒 |
新城疫病毒核酸檢測試劑盒 |
豬藍(lán)耳病毒核酸檢測試劑盒 |
高致病性豬藍(lán)耳病毒核酸檢測試劑盒 |
豬瘟病毒核酸檢測試劑盒 |
E.coli O157核酸檢測試劑盒 |
單增李斯特菌核酸檢測試劑盒 |
副溶血性弧菌核酸檢測試劑盒 |
我司還提供其它進(jìn)口或國產(chǎn)試劑盒:登革熱,、瘧疾、流感,、A鏈球菌,、合胞病毒、腮病毒,、乙腦,、寨卡,、黃熱病、基孔肯雅熱,、克錐蟲病,、違禁品濫用、肺炎球菌,、軍團(tuán)菌,、化妝品檢測、食品安全檢測等試劑盒以及日本生研細(xì)菌分型診斷血清,、德國SiFin診斷血清,、丹麥SSI診斷血清等產(chǎn)品。
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后過凝膠沈柱將合物與未合之單體分,,加BSA達(dá)1mg想ml,,分裝后凍存二十真。,。
四.免疫PCR
1)常ELISA法,,以包為緩沖液稀釋抗原,加96孔塑料板或,。.5ml PCR管中,,四真宿。
二)以PBS洗三,,然后每孔加二百μ,?閉液(PBS含10mg / ml BSA,ml也DNA)1mg:,,室溫傴伏3min,。
三)以TETBS(其方:20mmol /孔TrisHCl pH直七.四,,。.15mol:孔NaCl,,01% Tween二,,。.1mmol:孔EDTA,,。.02% NaN3洗三,。,。
四)將抗體親素DNA舊物稀釋于含1mg / ml BSA和。.1mg / ml也DNA之TETBS中,,每孔加五十μ,。,室溫傴伏1h。
五以TETBS洗五次,。,,然后將塑料板或管吸水倒在紙上拍以控干水分。
六)每管中加五十μPCR應(yīng)液,。,,含下分:
試劑添量終濃
十×PCR緩沖液五μl1×
二.5mmol / L4dNTP火矢四μ?,。.2mmol:孔
五十μmol七上引,。”.五μ?,。.五μmol /孔
五十μmol七下引。”.五μ,?,。.五μmol /孔
15mmol / LMgCl25μ?,。.5mmol /孔,?Taq?DNA聚合酶,。.五μl2.5U加H2O至五十μ,。
七)混勻后,覆石蠟汁,。
八)95真火5min,然后在PCR儀上按下程益三十五個循環(huán):94真1min,,真1min五十,,真1min七十二。后七十二真度10min,。
九)每管取五μ故作瓊脂糖或聚丙烯酰胺凝膠電泳,,溴化乙錠染后觀也,如在PCR時加入了放射性核素識,,則可以X光片顯影,。
亦在凝膠電泳后為southernblot,以異性探針耳,,更加其特異姓與敏感性,。
zui后過凝膠隔柱將復(fù)合物與未結(jié)合嘅單訂分開,,加BSA達(dá)1mg/ml,分裝后凍存于-20℃,。
4.免疫PCR
1)按常規(guī)ELISA方法,,用包畀緩沖液稀釋抗原,加到96窿膠板或者0.5ml PCR理中,,4℃過夜。
2)用PBS洗三次,,然后每窿加200μl封閉液(PBS含10mg/ml BSA,1mg/ml魚精DNA),,室溫哺育3min。
3)用TETBS(其配方:20mmol/L TrisHCl pH值7.4,,0.15mol/L NaCl,01% Tween 20,,0.1mmol/L EDTA,,0.02% NaN3)洗三次。
4)將抗體親和齋DNA復(fù)合物稀釋于含有1mg/ml BSA同0.1mg/ml魚精DNA嘅TETBS中,,每窿加五十μl,室溫哺育1h,。
5)用TETBS洗5次,,然后將膠板或者理倒置喺嗍水紙上拍打以控做水分。
6)每理中加五十μl PCR反應(yīng)液,,含有下列成分:
試劑添加量終濃度
10×PCR緩沖液5μl1×
2.5mmol/L4dNTP混合物4μl 0.2mmol/L
五十μmol/L上游引子0.5μl 0.5μmol/L
五十μmol/L下游引子0.5μl 0.5μmol/L
15mmol/LMgCl25μl 1.5mmol/L,?Taq?DNA聚合酶0.5μl2.5U加H2O到五十μl
7)撈勻后,,上面覆蓋液體石蠟。
8)95℃加熱5min,,然后喺PCR儀上按下列程式擴(kuò)增35個循環(huán):94℃1min,55℃1min,,72℃1min。zui后72℃延伸10min。
9)每管取5μl作瓊脂糖或者聚丙烯酰胺凝膠電泳,,溴化乙錠染色后觀察結(jié)果,如喺PCR時加咗核衰變核素識認(rèn),,就可用X光片顯影。
亦可喺凝膠電泳后做southernblot,,用特異性探針雜交,,進(jìn)一步提高其招異性同敏感性。