甲型H1N1（2009）核酸檢測(cè)試劑盒

廣州健侖生物科技有限公司

產(chǎn)品規(guī)格：50T/盒,；

 保存條件：避光 -20度 保存,。

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甲型H1N1（2009）核酸檢測(cè)試劑盒

以下是我司提供的部分PCR產(chǎn)品

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組織培養(yǎng)嘅單層細(xì)胞可用勻漿緩沖液裂解,，都可直頭喺SDS凝膠加樣緩沖液中裂解,；制備好嘅樣品用做SDS- PAGE分析。
2）電泳按常規(guī)方法進(jìn)行SDS-PAGE,。
2.蛋白質(zhì)由凝膠轉(zhuǎn)移到NC膜上（半干式轉(zhuǎn)移）
1）戥頭凝膠：用轉(zhuǎn)膜緩沖液戥頭,，5min×三次。
2）膜處理：將濾紙同NC膜,，一同喺轉(zhuǎn)膜緩沖液中浸泡10min,。
3）轉(zhuǎn)膜：
a.轉(zhuǎn)膜裝置由下至上依次按陽(yáng)極碳黑、3層厚濾紙,、PVDF尼龍膜,、凝膠、3層厚濾紙,、陰極碳板嘅順序放好,，濾紙、凝膠,、PVDF尼龍膜精確對(duì)齊,，每一步抹得甩氣泡，上責(zé)500g重物,，將碳板上面多余嘅液體吸干,。
b.用支架夾緊上述各層，置電轉(zhuǎn)移槽中,，NC膜一側(cè)靠正極,，凝膠一側(cè)靠負(fù)極,。接通電源，40V,、約1.5A轉(zhuǎn)移1.5～6h,。過(guò)咗時(shí)間長(zhǎng)短依靶蛋白分子量大小嚟較。
c.轉(zhuǎn)移結(jié)束后,，斷開(kāi)電源將膜拎出,，鎅攞對(duì)量膜條做免疫印跡。
d.將有蛋白Marker嘅條帶染色,，放入膜染色液中50s后,，喺50%甲醇中多次脫色，至背景清晰,，跟住用對(duì)蒸水洗,，風(fēng)干夾于兩層濾紙中保存，留喺騷咸濕結(jié)果作對(duì)比,。
3.免疫探測(cè)包畀轉(zhuǎn)印到膜上嘅靶抗原與*抗體（特異抗體）反應(yīng),、與酵素標(biāo)第二抗體（抗抗體）反應(yīng)，與及用酵素相應(yīng)嘅底物處理后進(jìn)行靶蛋白（抗原）信號(hào)檢測(cè),。
1）用0.01mol/L PBS洗膜,，5min×三次。
2）加封閉液（5%脫脂奶粉或者2%牛血清白蛋白）,，浸泡畀轉(zhuǎn)印膜，室溫或者37℃（平緩震緊）反應(yīng)1～3h,，以封閉轉(zhuǎn)印膜上啲非特異性蛋白質(zhì)嘅潛在結(jié)合位點(diǎn),，逃過(guò)非特異性反應(yīng)。
3）棄封閉液,，用0.01mol/L PBS洗膜,，5min×三次，振蕩,。
4）將封閉好嘅轉(zhuǎn)印膜浸入*抗體溶液（按啱稀釋比例,，用1/2量0.01mol/L PBS加1/2量封閉液稀釋?zhuān)┲校贵w液用量約0.2ml/cm2,，37℃反應(yīng)1～2h或者4℃反應(yīng)12h以上,，保持平緩震緊。陰性對(duì)照,，以1%BSA取代一抗,，其余步驟與實(shí)驗(yàn)組相同。
5）棄一抗,，用0.01mol/L PBS分別就洗膜,，10min×三次,，振蕩。
6）加辣根過(guò)氧化物酵素（HP）偶聯(lián)二抗溶液〔稀釋方法同（4）〕,，室溫下反應(yīng)1～2h,，保持平緩震緊。
7）棄二抗,，用0.01mol/L PBS洗膜,，10min×4次，振蕩,。