甲型H1N1流感病毒核酸檢測試劑盒

廣州健侖生物科技有限公司

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甲型H1N1流感病毒核酸檢測試劑盒

以下是我司提供的部分PCR產(chǎn)品

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鐵蛋白嘅提取
1）配制2%鏹水銨液，并以1mol/L嘅NaOH或者HCl調(diào)pH值,，啱啱為5.85,。攞1g鐵蛋白溶于100ml嘅2%硫酸銨液中。
2）加20%硫酸鎘，令zui終濃度為5%,，撈勻,，4℃過夜。
3）1500g離心（4℃）2h,，去上清,。仍加2 %鏹水銨至100ml，撈勻,，離心,，抹得甩不純沉渣。
4）于上清液中重新加20%硫酸鎘,，重復(fù)步驟⑵,，離心，去上清,。
5）檢查沉渣,，置顯微鏡下檢查，應(yīng)具有典型嘅黃褐色結(jié)晶,，結(jié)晶為六角形,，雙一四點結(jié)構(gòu)，如結(jié)晶唔典型,，應(yīng)繼續(xù)重復(fù)以上步驟,。
6）以少量嘅蒸餾水溶解，再加50%飽和鏹水銨溶液,，令之沉淀,，離心，去上清,。
7）重復(fù)步驟⑹一次,。
8）以少量蒸餾水溶解，常水透析24h后,，以0.05mol/L pH7.5 PBS透析24h,。
9）100000r/min離心2h，抹得甩上部冇色上清液（約3/4總量）,，置4℃過夜,。
10）用微孔濾膜（孔徑0.45μm）隔，令鐵蛋白含量為65mg/ml-75mg/ml,，分裝,，4℃保存唔凍做保存，以免鐵蛋白結(jié)構(gòu)遭破壞,。
2.鐵蛋白－抗體交聯(lián)法
1）以0.3Mol/L pH 9.5硼酸鹽緩沖液將鐵蛋白稀釋成20mg/ml-25mg/ml,。
2）以一∶1000（W/W）嘅比例加XC液室溫攪拌45min，離心去沉淀。
3）以0.3Mol/L pH 9.5硼酸鹽緩沖液將提純lgG襯成5mg/ml,，以一∶4嘅比例（V/V）加IgG與鐵蛋白－XC液,，4℃攪拌48h。
4）以0.1Mol/L式碳銨溶液透析過夜,，以除去多余嘅異氰酸鹽,，再以0.05Mol/l pH 7.5 PBS透析，令pH值恢復(fù)到生理水平,。
5）超速離心以1.00×105g離心5h,，去上清，沉淀以0.05Mol/L PBS懸浮,，再次離心,，以除去未結(jié)合嘅IgG。
6）以血清學(xué)同免疫學(xué)方法測定結(jié)合抗體嘅特異性,、免疫活性與及識認效應(yīng),，如果用步驟嚴格，結(jié)果系滿意嘅,。
3.鐵蛋白－抗體結(jié)合物處理標(biāo)本
1）將標(biāo)本以5%福爾馬林pH 7.2（4℃）PBS液入墻40min-60min,。
2）用凍嘅PBS液洗滌,，離心,。
3）如系組織蚊，就喺解剖顯微鏡下切更忽,，放入試管中,，加埋鐵蛋白－抗體結(jié)合物置室溫20min，不時振蕩,，
4）以凍PBS液洗滌三次,，離心。
5）沉淀以2.5%戊二醛入墻20min,，以PBS洗滌,。
6）再以鋨酸入墻，脫水包壅,。
都可以先超薄切片,，再進行鐵蛋白－抗體結(jié)合物染色。
唔識用如下：
1）將培養(yǎng)細胞以1%福爾馬林PBS液入墻（4℃）,。
2）PBS液洗滌離心,。
3）以0.5ml，30%牛血清蛋白PBS液懸浮置入膠透析膜袋中,，再將袋置于嗍水劑粉末上,，對牛血清白蛋白成膠狀物時，將透析袋移至2%戊二醛PBS液（pH7.5）中入墻3h。
4）拎出,，切忽,，以PBS液洗滌。
5）置干燥器中以矽膠糠,。
6）包壅,、切片、喺水上有冇收集切片置于經(jīng)4%牛血清白蛋白PBS液處理嘅摟有膠膜嘅在網(wǎng)上（牛血清白蛋白嘅處理在于少鐵蛋白結(jié)合物非特異性吸附于在網(wǎng)上）,。
7）滴一滴鐵蛋白－抗體結(jié)合物于在網(wǎng)上,。
8）5min后，浮絲網(wǎng)于PBS液面,，標(biāo)本口當(dāng)面同下,，以除去多余嘅結(jié)合物。
9）凍做后,，滴一滴醋酸雙氧鈾或者氫氧化鉛以復(fù)染,。
10）水洗、晾干,、電鏡觀察,。

鉄蛋白の抽出
1）2 %の強水アンモニウム液を配合し、1 ml / LのNaOHまたはHClのpH値を使用した,。1 gの鉄蛋白は100 mlの2 %の硫酸アンモニウムの中に溶けます,。
2）の20 %の硫酸カドミウムを加えて、zui終的な濃度を5 %とし,、均等に引き揚げ,、4℃で夜を過ごす。
3）150 gは心（4℃）2 h,、清に行く,。依然として2 %の強水アンモニウムに100 mlまで加えて、均等に引き揚げて,、心を離れて,、塗って純粋に沈めます。
4）上清液の中で2 %の硫酸カドミウムを加えて,、ステップを繰り返して,、心を離れて、清に行く,。
5）沈殿を検査して,、顕微鏡の下で検査をして、典型的な黃色の褐色の結(jié)晶を持つべきで,、結(jié)晶は六角形で,、2つの4點の構(gòu)造,、結(jié)晶のような典型的なように、引き続き以上の手順を続けなければなりません,。
6）少量の蒸留水で溶かし,、さらに50 %が飽和した強い水アンモニウム溶液を加え、沈殿させ,、心を離す,。
7）繰り返しのステップを一度繰り返す。
8）少量の蒸留水で溶解し,、常水透析24 hの後,、0.05 mml / L pH 7 PBSで透析した24 h。
9 ) 100000 / min離心2 h,、上の色の上清液（約3 / 4の総量）を塗り,、4℃で夜を過ごす。
10）マイクロ孔フィルタ（孔徑0.45μm）を使って,、鉄蛋白の含有量を65 mg / ml - 75 mg / mlとし,、4℃で保存して保存し、鉄蛋白の構(gòu)造が破壊されないようにする,。
2 .鉄蛋白－抗體交換法
1）は,、0.32 mg / L pH 9.5ホウ酸塩緩衝液を20 mg / ml - 25 mg / mlに希釈する。
2）1：1000（W / W）の割合でXC液室溫度をプラスして45 minをかき混ぜて,、心から沈殿します,。
3）0.3 M / L pH 9.5ホウ酸塩緩衝液を5 mg / mlに引き立て、1：4の割合（V／V）にIgGと鉄卵白－XC液,、4℃で48 hをかき混ぜます,。
4）は、余分なシアン酸塩を除去し,、0.05モル／l pH 7.5 PBSで透析して生理レベルに回復(fù)する。
5）超速度で心を離れて1.00×105 gで離心して5 h,、上清に行って,、沈殿して0.05モル／L PBSで浮遊して、再び心を離れて,、未結(jié)合のIgGを取り除くためです,。
6）血清學(xué)同免疫學(xué)の方法で測定して抗體の特異性、免疫活性と認識効果を測定します,。
3 .鉄蛋白－抗體の結(jié)合物が標(biāo)本を処理する
1）標(biāo)本を5 %のホルマリンpH 7.2（4℃）PBS液で壁40メートル- 60 minに入る,。
2）凍ったPBS液で洗濯し、心を離す,。
3）蚊を組織すると,、解剖顕微鏡の下でより忽然として,、試験管に入れて、鉄の卵白を埋める－抗體の結(jié)合物が室溫の20 minをつけて,、度々振動する,。
4）冷凍PBS液で3回洗濯し、心を離す,。
5）沈殿して2.5 %のスピリヒドで壁に20 minを入れて,、PBSで洗います。
6）また,、オスル酸で壁に入って,、脫水してふさぐ。
すべてを超えてスライスして,、更に鉄の卵白－抗體が物を結(jié)びつけて染色することができます,。
以下のように
1）培養(yǎng)細胞を1 %のホルマリンPBS液で壁に入れる（4℃）。
2）PBS液は心を離す,。
3）は0.5 mlで,、30 %の牛の血清卵白PBS液がゴム袋の袋の中に浮いて、更に袋をしゃぶる水剤の粉末の上に置いて,、牛の血清の白蛋白がゴム狀になったときに,、透析袋を2 %のスピリヒドPBS液（pH 7）の中に壁を3 hに移す。
4）持って出て,、切って,、PBS液で洗う。
5）乾燥器にはシリコンの糠がある,。
6）パッケージ,、切片、水の上には,、4 %の牛の血清白卵白PBS液の処理の接著剤を収集することができます,。
1滴の鉄蛋白－抗體結(jié)合物がネット上にある。
8）5 minの後,、PBS液面に浮かんで,、標(biāo)本口と面と向かって余分な結(jié)合物を取り除く。
9）凍結(jié)した後に,、1滴の酢酸の雙酸素のウランあるいは水素の酸化の炭素は回復(fù)します,。
10）水洗い、干し,、鏡で観察する,。