副溶血弧菌核酸檢測試劑盒

廣州健侖生物科技有限公司

產(chǎn)品規(guī)格：48T/盒,；

 保存條件：避光 -20度 保存,。

    我司提供各種流感病毒、副流感病毒,、呼吸道合胞病毒,、冠狀病毒、輪狀病毒,、桿菌,、鏈球菌、熱帶病毒等等核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）,，還有各種原料和質(zhì)控品,，隨時(shí)歡迎您的來電：  楊

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以下是我司提供的部分PCR產(chǎn)品

副溶血弧菌核酸檢測試劑盒

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將RNA溶解于DEPC H2O中,，喺65℃中溫育10min左右，冷卻至室溫之后加等訂2×上呀緩沖液,，撈勻后上柱,，即刻有冇收集瀉液。當(dāng)RNA上呀液全部進(jìn)入柱床后,，而且用一×上呀緩沖液洗柱,，繼續(xù)有冇收集瀉液。
5.將所有瀉液于65℃加熱5min,，冷卻至室溫后再次上柱,，有冇收集瀉液。
6.用5-10倍柱床體積嘅一×上呀緩沖液洗柱,，每理1ml分部有冇收集,，OD260測定RNA含量。前地方有冇收集理中瀉液嘅OD260值好高,，其內(nèi)含物為無Poly（A）落尾嘅RNA,。后地方有冇收集理中瀉液嘅OD260值好低或者無吸走啲。
7.用2-3倍柱容積嘅打緩沖液打Poly（A）RNA,，分部有冇收集,，每地方為1/3-1/2柱體積。
8.OD260測定Poly（A）RNA分布,，合并含Poly（A）RNA嘅有冇收集理,，加1/10體積3M NaAc（pH5.2）、2.5倍體積嘅預(yù)凍無水乙醇,，撈勻,，-20℃放置30min。
9.4℃離心,，10000g×15min,，因住食棄上清。用70%乙醇洗滌沉淀,。[注意：此時(shí)Poly（A）RNA嘅沉淀往往睇唔到],。4℃離心,，10000g×5min,，棄上清，室溫晾干,。
10.用適量嘅DEPC H2O溶解RNA,。
注意事項(xiàng)

1.成實(shí)驗(yàn)過程一定要防止Rnase嘅污染。
2.步驟（4）中將RNA溶液置65℃中溫育，然后冷卻至室溫再上樣嘅目的系有兩個(gè),，一個(gè)系破壞RNA二級(jí)結(jié)構(gòu),，尤其系mRNA Poly（A）落尾處二級(jí)結(jié)構(gòu)，令Poly（A）落尾充分穿煲,，從而提高Poly（A.）RNA嘅回收率,；另外一個(gè)目的系可以解離mRNA與rRNA嘅結(jié)合，否則會(huì)導(dǎo)致rRNA嘅污染,。所以此步驟唔省略,。
3.十二烷基肌氨酸鈉鹽喺18℃以下溶解度下降，會(huì)阻滯柱（液體流動(dòng),，若室溫低于18℃zuihao用LiCl替代NaCl,。
4.寡聚（dT）-纖維素柱可喺4℃貯存，反復(fù)使用,。次次使用前應(yīng)該依次用NaOH,、滅菌ddH2O、上呀緩沖液洗柱,。