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腺病毒單克隆抗體
廣州健侖生物科技?有限公司
本司長期供應(yīng)尼古?。商鎸帲z測試劑盒,,其主要品牌包括美國NovaBios,、廣州健侖,、廣州創(chuàng)侖等進(jìn)口產(chǎn)品,,國產(chǎn)產(chǎn)品,試劑盒的實驗方法是膠體金方法,。
我司還有很多違禁品檢測,、激素檢測,、疫病類檢測,、腫瘤標(biāo)志物檢測等抗原抗體原料,,還有熒光FITC標(biāo)記類抗體,、各種可標(biāo)記單抗以及免疫磁珠等等產(chǎn)品以及各種生物原料和質(zhì)控品等,,。
我司還提供其它進(jìn)口或國產(chǎn)試劑盒:登革熱,、瘧疾,、流感,、A鏈球菌,、合胞病毒、腮病毒,、乙腦,、寨卡、黃熱病,、基孔肯雅熱,、克錐蟲病、違禁品濫用,、肺炎球菌,、軍團菌、化妝品檢測,、食品安全檢測等試劑盒以及日本生研細(xì)菌分型診斷血清,、德國SiFin診斷血清、丹麥SSI診斷血清等產(chǎn)品,。
腺病毒單克隆抗體
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以下是出售的一小部分產(chǎn)品
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【公司名稱】 廣州健侖生物科技有限公司
【】 楊永漢
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【公司地址】 廣州清華科技園創(chuàng)新基地番禺石樓鎮(zhèn)創(chuàng)啟路63號二期2幢101-3室
【企業(yè)文化宣傳】
3.鏈接同轉(zhuǎn)化反應(yīng)
將純化產(chǎn)物鏈接至pGEM-T載體(Promega,,USA),并進(jìn)一步轉(zhuǎn)化到感受態(tài)大腸桿菌DH5α中,具體用步驟如下,。
1)鏈接反應(yīng)
a.短暫離心裝有載體嘅離心理,,以免液體掛喺理壁上;
b.將反應(yīng)體系加200ul嘅離心理,,10ul反應(yīng)體系具體加量如下:2xRapid Ligation Buffer 5ul,,pGEM-T載體lul,PCR產(chǎn)物3ul,,T4 DNA Ligase 1ul,;
c.用槍頭吸打撈勻反應(yīng)體系,4℃放置過夜反應(yīng),。
2)轉(zhuǎn)化反應(yīng)
a.由-70℃柜中拎出感受態(tài)細(xì)胞DH5α,,雪上放置10min解凍,輕彈理壁以撈勻細(xì)胞,;
b.短暫離心鏈接反應(yīng)理,,攞曬量或者一半體積嘅鏈接反應(yīng)物于解凍后嘅感受態(tài)細(xì)胞中輕彈撈勻,凍水浴40min,,中間浪一次,,防止菌體沉淀,;
c.拎出離心理,,于42℃水浴90sec熱休克;
d.冰浴2min,;
e.離心理中加900ul LB培養(yǎng)液(AMP-)(無菌用);
f. 37℃馴品噉振浪2h,,令細(xì)菌復(fù)蘇;
g. 4000rpm常溫10min離心,,反而去上清,保留150ul左右,,吹吸令菌體重溶,,往菌液中加3.5ul 200mg/mL IPTG同60ul二十mg/mL X-Gal撈勻,,將撈液體扠于預(yù)早處理好嘅帶有Amp嘅平板培養(yǎng)基上,,等吸走啲后倒置放入37℃烘箱中,,培養(yǎng)12-16h,,觀察藍(lán)白菌落,;
h.羅滅菌嘅10 mL試管若干,加約3 mL左右嘅LB培養(yǎng)液(Amp),;
i.用滅菌牙簽小心挑取白色菌落,,置于試管中;
j. 37℃,,250rpm/min振蕩培養(yǎng)過夜,,至溶液混濁;
k.將經(jīng)過培養(yǎng)后嘅菌體直接進(jìn)行PCR檢測,。
4.序列測定
經(jīng)PCR檢測后將陽性克隆用于測序,。所有測序工均由大連TaKaRa公司做,選用377測序儀,。個個地理種群隨機撍3個樣本進(jìn)行測序,,以佢哋嘅*序列為準(zhǔn)。
5.序列分析
獲得嘅DNA序列先提交到GenBank數(shù)據(jù)庫中,,然后利用“BLAST”,,工具(NCBI站點)進(jìn)行序列分析、DNA序列檢索,;用GenDoc軟件進(jìn)行序列同源性比較,;用BioEdit軟件進(jìn)行序列老編;用Clustal X軟件(Thompson等,,1997)進(jìn)行序列比對(alignment),;比對結(jié)果輸入MEGA2.1軟件(Kumar等,2001),,采用腳法計算多唔同種類品間嘅遺傳腳,,并基于Kimura-2 Parameter模型,用鄰接法(Neighbor-Joining,,NJ)構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹,,通過自展1000次檢驗獲得系統(tǒng)樹分支嘅置信度。