酶標(biāo)儀與分光光度計(jì)的區(qū)別與優(yōu)缺點(diǎn)
圣賓儀器科技上海有限公司
酶標(biāo)儀和分光光度計(jì)都是實(shí)驗(yàn)室常用的分析測(cè)量工具,，它們的測(cè)定原理是相同的，都是使用朗伯-比耳定律,，測(cè)定的都是樣本的吸光度。
一,、酶標(biāo)儀和分光光度計(jì)的三大差別
酶標(biāo)儀即酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀,。是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的專(zhuān)用儀器又稱(chēng)微孔板檢測(cè)器?？珊?jiǎn)單地分為半自動(dòng)和全自動(dòng)2大類(lèi),，但其工作原理基本上都是一致的，其核心都是一個(gè)比色計(jì),即用比色法來(lái)進(jìn)行分析,。測(cè)定一般要求測(cè)試液的最終體積在250μL以下,，用一般光電比色計(jì)無(wú)法完成測(cè)試，因此對(duì)酶標(biāo)儀中的光電比色計(jì)有特殊要求,。
分光光度計(jì),，又稱(chēng)光譜，是將成分復(fù)雜的光分解為光譜線的科學(xué)儀器,。測(cè)量范圍一般包括波長(zhǎng)范圍為380~780 nm的可見(jiàn)光區(qū)和波長(zhǎng)范圍為200～380 nm的紫外光區(qū),。不同的光源都有其*的發(fā)射光譜,因此可采用不同的發(fā)光體作為儀器的光源。
同為,，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)測(cè)定吸光度的儀器,，酶標(biāo)儀和分光光度計(jì)存在一些不同之處，具體差別體現(xiàn)在以下三個(gè)方面：
（1）盛裝待測(cè)溶液的容器：
分光光度計(jì)用的是比色皿,，酶標(biāo)儀使用的是塑料微孔板(酶標(biāo)板),。比色皿只能起到盛裝溶液的作用，每個(gè)比色皿一次只能盛裝一種溶液。酶標(biāo)板常用透明的聚乙烯材料制成,，對(duì)抗原抗體有較強(qiáng)的吸附作用,，因此用它作為固相載體，酶標(biāo)板通常為48孔或96孔,，每個(gè)微孔可以盛裝不同的溶液,。
（2）光路的方向：
分光光度計(jì)是水平光路，而酶標(biāo)儀則是垂直光路,。由于酶標(biāo)板盛樣本的塑料微孔板是多排多孔的,光線只能垂直穿過(guò),因此酶標(biāo)儀的光束都是垂直通過(guò)待測(cè)溶液和微孔板的,光束既可是從上到下,也可以是從下到上穿過(guò)比色液,。垂直光的特點(diǎn)是標(biāo)本吸光度受液體濃縮或稀釋的影響小，不足之處是受被測(cè)樣本液面是否水平,、酶標(biāo)板透光性,、孔底是否平整等的影響較大。
（3）光路的長(zhǎng)度：
由于光密度(OD值)與吸光系數(shù), 待測(cè)組分的濃度以及光路長(zhǎng)度成正比關(guān)系,。
分光光度計(jì)采用的比色杯的寬度通常是1cm,，所以光路長(zhǎng)度固定為1cm。因此不同儀器,，不同批次測(cè)量的數(shù)據(jù)具有同樣的可比性,。
而酶標(biāo)儀采用的是垂直光路, 所以光路的長(zhǎng)度應(yīng)該是液體液面的高度。所以測(cè)得的值受到樣品的體積的影響,。
二,、酶標(biāo)儀和分光光度計(jì)的優(yōu)缺點(diǎn)比較
分光光度計(jì)：
優(yōu)點(diǎn)：1、檢測(cè)波長(zhǎng)范圍較寬,；2,、加樣量不一致對(duì)測(cè)量結(jié)果沒(méi)有影響。
缺點(diǎn)：1,、工作量大,，操作繁瑣，耗時(shí),；2,、耗試劑；3,、結(jié)果穩(wěn)定性差,，重復(fù)性較差，誤差較大,；4,、對(duì)于微量物質(zhì)，難以檢測(cè)到,。
主要應(yīng)用領(lǐng)域：藥品檢驗(yàn),、藥物分析、環(huán)境檢測(cè)、衛(wèi)生防疫食品,、化工,、科研等領(lǐng)域?qū)ξ镔|(zhì)進(jìn)行定性、定量分析,。
酶標(biāo)儀：
優(yōu)點(diǎn)：1,、一次性處理樣品量大，省時(shí),；2,、樣本、試劑用量少,；3,、操作簡(jiǎn)單，重復(fù)性好,，檢測(cè)速度快,、效率高。
缺點(diǎn)：1,、酶標(biāo)儀96孔板在紫外光區(qū)有較強(qiáng)的紫外吸收,，應(yīng)盡量避免在300nm以下使用酶標(biāo)儀進(jìn)行含量測(cè)定；2,、必須確保微孔板每個(gè)孔加樣量嚴(yán)格一致,，對(duì)實(shí)驗(yàn)者的操作技能提出了更高的要求。
主要應(yīng)用領(lǐng)域：臨床檢驗(yàn),、生物學(xué)研究、農(nóng)業(yè)科學(xué),、食品和環(huán)境科學(xué)等,。
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