詳細(xì)介紹
大鼠肝細(xì)胞瘤,;H4-II-E-C3傳代方法注意事項:
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們,。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,,如細(xì)胞形態(tài),、所用培養(yǎng)基、血清比例,、所需細(xì)胞因子等,。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運輸問題貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng),隔天再取出觀察,。此時多數(shù)細(xì)胞均會貼壁,,若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力,如果證實細(xì)胞活力正常,,請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng),;如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請拍下照片及時和我們,,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次,。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,,細(xì)胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,,記錄細(xì)胞狀態(tài),,便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研,,不得用于臨床應(yīng)用,。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療,。
細(xì)胞名稱 大鼠肝細(xì)胞瘤;H4-II-E-C3傳代方法
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 在糖皮質(zhì)激素,、胰島素或cAMP衍生物的誘導(dǎo)下可以產(chǎn)生酪氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶,;可被逆轉(zhuǎn)錄病毒感染;可產(chǎn)生白蛋白,、轉(zhuǎn)鐵蛋白,、凝血酶原,;在AxC大鼠中可以成瘤。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 20%HS+5%FBS
傳代方法 1:4~1:12傳代,;2~3天換液1次,。
傳代情況
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(
大鼠肝細(xì)胞瘤;H4-II-E-C3傳代方法細(xì)胞培養(yǎng)
1,、冷凍管應(yīng)如何解凍,?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍,, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化,, 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形,。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時,, 必須注意安全, 預(yù)防冷凍管之爆裂,。
2,、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時, 是否應(yīng)馬上去除DMSO,?
除少數(shù)特別注明對DMSO 敏感之細(xì)胞外,, 絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞), 在解凍之后,, 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中,, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無法生長或貼附之問題,。
3,、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能,。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基,, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無法立即適應(yīng),, 造成細(xì)胞無法存活,。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類,?
不能,。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源, 所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生的影響,。來自不同物種的血清,, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細(xì)胞無法存活,。CAS95-54-5 鄰苯二胺 5g
100103B-20 裂殖酵母化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞制備試劑盒 ( 含轉(zhuǎn)化液 ) 20 次
100103A-20 裂殖酵母化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞制備試劑盒 20 次
CAS103476-89-7 亮抑酶肽 2mg
100836-1 亮抑蛋白酶肽溶液,,10 mg/mL 1mL
CAS5141-20-8 亮綠 SF( 淡黃 ) 5g
CAS633-03-4 亮綠 5g
131128I-100 兩棲類和爬行類動物種屬鑒定 PCR Mix 100 次
80206-50 兩管式 RT-PCR 試劑盒 (MMLV-Taq) 50 次
130921-50 兩管式 RT-PCR 試劑盒 (AMV-Taq) 50 次
CAS9013-20-1 鏈親和素 0.1mg
120701-10 鏈脲佐菌素溶液 ,10mg/mL 10mL
CAS18883-66-4 鏈脲佐菌素 100mg
130521-2 鏈霉親和素磁珠 2mL
130818-0.1 鏈霉親和素,,HRP 標(biāo)記 0.1mL
131022-0.5 鏈霉親和素,AP 標(biāo)記 0.5mL
131021-1 鏈霉親和素 1mg
131131F-100 鏈霉菌 PCR Mix 6 100 次
CAS9036-06-0 鏈霉蛋白酶 E 250mg
131183-100 鏈激酶 100μg
120700-10 利福平溶液 ,100mg/mL 10mL
CAS13292-46-1 利福平 250mg
100924-250 麗春紅 S 染膜液 250mL
CAS6226-79-5 麗春紅 S 10g
CAS9032-75-1 離析酶 R-10 1g
130824-10000 冷啟動核酸酶 10,000U
130969-100 冷凍型血液 RNA 保存液 100mL
131105A-100 酪蛋白溶液 (TBS) 100mL
131105B-100 酪蛋白溶液 (PBS) 100mL
120674-50 酪蛋白 50g