詳細(xì)介紹
抗體的鑒定:
1)抗體的效價(jià)鑒定:鑒定效價(jià)的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等,。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較,。如制備抗抗體的效價(jià),一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來鑒定,。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力??贵w的特異性高,它的識別能力就強(qiáng),。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗(yàn)測定,。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計(jì)算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時(shí)的濃度,并按公式計(jì)算交叉反應(yīng)率,。
3)真核翻譯起始因子2C2抗體的親和力:是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的,。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力,。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol。
中文名稱 | 產(chǎn)品名稱 | 貨號 |
載脂蛋白E3抗體 | Anti-APOE3抗體 | EY-01K63402 |
別 名 AD2; APOE3; ApoEb; Apolipoprotein EIII; Apolipoprotein E; APOE_HUMAN.
英文名稱 Anti-APOE3
中文名稱 載脂蛋白E3抗體
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Pig, Cow
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子
蛋白分子量 predicted molecular weight: 34kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human APOE3
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟:僅供科研使用
一,、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水,、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油,、搪瓷桶三只,、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡,、玻片架,、濾紙、37℃溫箱等,。
二,、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,,十分鐘后棄去,,使標(biāo)本保持一定濕度,。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,,使其*覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),,保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考,。
3.取出玻片,置玻片架上,,先用0.01mol/L,,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,,每缸三到五分鐘,,并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片,,用濾紙吸去多余水分,,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,,以蓋玻片覆蓋,。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度,。
抗體的生活習(xí)性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他免疫球蛋白分子區(qū)別,,就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng),??贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補(bǔ)體:抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后,,借助暴露的補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)去激活補(bǔ)體系統(tǒng),、激發(fā)補(bǔ)體的溶菌、溶細(xì)胞等免疫作用,。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的免疫球蛋白,,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,產(chǎn)生不同的疚,,參與免疫應(yīng)答,。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動(dòng)免疫,。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),,也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能,。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性,。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),,均能破壞抗體的作用,。抗體可被中性鹽類沉淀,。在上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
TCEP 溶液,,0.5M5mL miRNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)30 次
鹽酸胍溶液,,8M200mL miRNA PAGE 膠回收試劑盒40 次
咪唑溶液,2M100mL miRNA cDNA 第一鏈合成試劑盒25 次
咪唑25g MgSO4溶液,,10mM,,PCR 級5mL
亞氨二乙酸介質(zhì)10mL MgCl2溶液,25mM,,PCR 級5mL
KT5823(PKG 抑制劑 )50μg Bradford 法蛋白定量試劑盒100mL
L-Arginine(NO 前體 )5g BLOTTO 溶液100mL
L-Canavanine(iNOS 抑制劑 )20mg BL21-CodonPlus(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞10×100μL
L-Citrulline(NO 中間體 )1g BL21(DE3)pLysS 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10
Leptomycin B( 出核轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑 )10μg BL21(DE3) 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10
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