詳細介紹
公司專業(yè)代理ATCC菌種,*,,質量保證,為大中型科研提供嚴格質量體系控制的ATCC,CMCC,CICC,DSMZ標準菌株,。
產品名稱 | 用途 | 貨號 |
僅供于科研使用 | EY-01J9922 |
實驗內容:
1. 稱量→溶化→調pH→過濾→分裝→加塞→包扎→滅菌→無菌檢查
2.干熱滅菌:裝入待滅菌物品→升溫→恒溫→降溫→開箱取物
3.高壓蒸汽滅菌:加水→裝物品→加蓋→加熱→排冷空氣→加壓→恒壓→降壓回零→排汽→取物→無菌檢查
4.過濾除菌:組裝滅菌→連接→壓濾→無菌檢查→清洗滅菌
培養(yǎng)條件:
1,、營養(yǎng)肉汁瓊脂:牛肉膏 3.0g,蛋白胨 10.0g,,NaCl 5.0g,,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,,pH7.0,。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產生芽孢,。pH7.0,。121℃,15min,。
2,、需氧類型:好氧
3、培養(yǎng)溫度:55℃
儀器設備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃,。
2 1000ml三角燒瓶,、1ml、10ml移液管,。
3 接種針,。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺,。
6 玻片,、酒精燈、洗耳球,、試管架,。
7 天平:感量0.01g,。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm),、試管,,經121℃、30分鐘滅菌,。
10試管夾,、酒精燈、秒表,、載玻片
菌種的培養(yǎng):
1,、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質組成的繁殖材料。菌種分為母種(一級種),、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級,。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離,、初篩和復篩,。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,,也稱種子制備,,是指菌種在一定條件下,經過擴大培養(yǎng)成為具有一定數量和質量的純菌種的制備過程,。以作接入發(fā)酵罐中進一步擴大菌體量及合成產物之用,。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備,。
4,、保存在沙土管或冷凍管中的菌種,用無菌手續(xù)挑取少許,,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對于霉菌類孢子制備,,多數采用大米,、小米之類的天然培養(yǎng)基)。
5,、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天,。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在上延續(xù)使用半年左右,。
6,、如果有些菌種不產孢子,如赤霉素產生菌或產孢子不多的,,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽,、生長,、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),,及無機鹽(如磷酸鹽)等,。作為發(fā)酵罐的種子應生命力旺盛、染色深,、菌絲粗壯,,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%,。
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微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,,培養(yǎng)基中含有一些適合產孢子的營養(yǎng)成分,,如麩皮,、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等,。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,,不利于放線菌孢子的形成,,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導孢子形成,。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數為28 ℃,少數為37 ℃,,培養(yǎng)時間為5~14天,。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米,、小米,、玉米、麩皮、麥粒等天然農產品為培養(yǎng)基,。這是由于這些農產品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子,。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,,培養(yǎng)時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,,常采用母瓶,、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進罐,。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長,。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方,。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,,因菌種不同而異,一般可分為一級種子,、二級種子和三級種子的制備,。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經培養(yǎng)后形成大量的菌絲,,這樣的種子稱為一級種子,,把一級種子轉入發(fā)酵罐內發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵,。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內,,經過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,,將二級種子轉入發(fā)酵罐內發(fā)酵,,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,,使用三級種子的發(fā)酵,,稱為四級發(fā)酵。