綜合微生物的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:
(1)前期準(zhǔn)備:(A)滅菌處理,;(B)制備Biolite水;(C)檢查設(shè)備和材料,;
(2)按比例配制培養(yǎng)材料,;
(3)導(dǎo)入曝氣,進(jìn)行繁殖培養(yǎng),;
(4)取液觀察,;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yǎng),;
(5)分離并檢測(cè),;
(6)取液儲(chǔ)存;通過(guò)該綜合微生物培養(yǎng)方法簡(jiǎn)單可操作性強(qiáng),,培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以內(nèi),,菌類(lèi)穩(wěn)定不發(fā)生突變,且繁殖快速,。
產(chǎn)品名 | 遲緩芽孢桿菌規(guī)格 |
規(guī)格 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
貨號(hào) | EY-01J9656 |
![123.png 123.png](https://img72.chem17.com/6fd5d5abffebbb9e88ff0a9bd5ae54697d987c8cda683451fddf19895fd814a10455983c64825aa2.png)
使用范圍:
(1)合成培養(yǎng)基,。合成培養(yǎng)基的各種成分*是已知的各種化學(xué)物質(zhì)。這種培養(yǎng)基的化學(xué)成分清楚,,組成成分精確,,重復(fù)性強(qiáng),而且微生物在這類(lèi)培養(yǎng)基中生長(zhǎng)較慢,。如高氏一號(hào)合成培養(yǎng)基、察氏(Czapek)培養(yǎng)基等,。
(2)天然培養(yǎng)基,。由天然物質(zhì)制成,如蒸熟的馬鈴薯和普通牛肉湯,,前者用于培養(yǎng)霉菌,,后者用于培養(yǎng)細(xì)菌。這類(lèi)培養(yǎng)基的化學(xué)成分很不恒定,,也難以確定,,但配制方便,營(yíng)養(yǎng)豐富,,培養(yǎng)效果好,,所以常被采用。
(3)半合成培養(yǎng)基,。在天然有機(jī)物的基礎(chǔ)上適當(dāng)加入已知成分的無(wú)機(jī)鹽類(lèi),,或在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加某些天然成分,如培養(yǎng)霉菌用的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基,。這類(lèi)培養(yǎng)基能更有效地滿足微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需要,。
保存方法:
傳代保存法:培養(yǎng)基的濃度不宜過(guò)高,營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)于豐富,,尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低,。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長(zhǎng)溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種,,則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] ,。
液體石蠟覆蓋保存法:該法較前一種方法保存菌種的時(shí)間更長(zhǎng),適用于霉菌、酵母菌,、放線菌及需氧細(xì)菌等的保存,。
懸液保存法:
① 蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年,。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。
② 糖液保存法:適用于酵母菌,,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,,然后于冷暗處保存,可長(zhǎng)達(dá)10年,。除此之外,,也可使用緩沖液或食鹽水等進(jìn)行保存。
載體保存法:①土壤保存法,;②砂土保存法,;③硅膠保存法;④磁珠保存法,;⑤麩皮保存法,;⑥紙片(濾紙)保存法。
常用的冷凍保存法:
① 低溫冰箱保存法(-20℃,、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時(shí)使用螺旋口試管較為方便,,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時(shí)菌液加量不宜過(guò)多,,有些可添加保護(hù)劑,。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來(lái)吸附菌液,,然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi),,再放入低溫冰箱內(nèi)進(jìn)行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內(nèi),,再置于冰箱內(nèi)進(jìn)行冷凍保存,。
③ 液氮保存法(-196℃):是適用范圍*的微生物保存法。
保藏方法:產(chǎn)品僅供于科研使用
1.傳代培養(yǎng)保藏法
又有斜面培養(yǎng),、穿刺培養(yǎng),、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等(后者作保藏厭氧細(xì)菌用),培養(yǎng)后于4-6℃冰箱內(nèi)保存,。
2. 液體石蠟覆蓋保藏法
是傳代培養(yǎng)的變相方法,,能夠適當(dāng)延長(zhǎng)保藏時(shí)間,它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋滅菌的液體石蠟,,一方面可防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種死亡,,另一方面可阻止氧氣進(jìn)入,,以減弱代謝作用。
3. 載體保藏法
是將微生物吸附在適當(dāng)?shù)妮d體,,如土壤,、沙子、硅膠,、濾紙上,,而后進(jìn)行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和濾紙保藏法應(yīng)用相當(dāng)廣泛,。
4. 寄主保藏法
用于目前尚不能在人工培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的微生物,,如病毒、立克次氏體,、螺旋體等,,它們必須在生活的動(dòng)物、昆蟲(chóng),、雞胚內(nèi)感染并傳代,,此法相當(dāng)于一般微生物的傳代培養(yǎng)保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍干燥保藏法進(jìn)行保藏,。
5. 冷凍保藏法
可分低溫冰箱(-20-30℃,,-50-80℃)、干冰酒精快速凍結(jié)(約-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法,。
6. 冷凍干燥保藏法
先使微生物在極低溫度(-70℃左右)下快速冷凍,然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分(真空干燥),。有些方法如濾紙保藏法,、液氮保藏法和冷凍干燥保藏法等均需使用保護(hù)劑來(lái)制備細(xì)胞懸液,以防止因冷凍或水分不斷升華對(duì)細(xì)胞的損害,。
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