詳細(xì)介紹
運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,,-20℃保存,,有效期一年。使用本試劑盒提供的陽性對照時(shí),,由于其濃度較高,,一定要注意不要污染其他試劑和成分。在專門的區(qū)域操作,。本試劑盒不但準(zhǔn)確,、快速、靈敏,,還具有以下
產(chǎn)品名稱 | 鵝裂口線蟲進(jìn)口PCR試劑 |
英文名稱 | Amidostomum anseriPCR |
分類 | PCR檢測試劑盒 |
特點(diǎn):
1. 即開即用,,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,。
2. 預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 494 bp,。
3. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷,。反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物,、酶、dNTP,、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,,只要知道任何一段模板DNA序列,, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增,。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右,。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列,。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),,特別是3'端的互補(bǔ),,否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶,。
⑤引物3'端的堿基,,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗,。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn),, 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處,。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性,。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
血管內(nèi)皮鈣粘著蛋白復(fù)合體(VE-cad)ELISA試劑盒
脫氧胞苷脫氨酶蛋白抗體 ATA ELISA Kit 血管緊張肽酶A(ATA)ELISA試劑盒
蛋白激酶錨定蛋白13抗體 ACE2 ELISA Kit 血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)ELISA試劑盒
AP-1μ2抗體 ACE ELISA Kit 血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA試劑盒
肥大細(xì)胞膜抑制性受體Allergin1抗體 aGT ELISA Kit 血管緊張素原(aGT)ELISA試劑盒
腦鈉通道蛋白1抗體 AgtrⅠa ELISA Kit 血管緊張素Ⅱ受體Ⅰa型(AgtrⅠa)ELISA試劑盒
肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2/3復(fù)合亞單位B1
K)ELISA Kit Mouse extracellular signal-regulated kinase,ERK ELISA Kit
小鼠細(xì)胞角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)ELISA Kit Mouse cytokeratin fragment antigen 21-1,CYFRA21-1 ELISA Kit
小鼠細(xì)胞角蛋白18-M65(CK 18-M65)ELISA Kit Mouse Cytokeratin 18-M65,CK 18-M65 ELISA Kit
鵝裂口線蟲進(jìn)口PCR試劑小鼠細(xì)胞角蛋白18-M30(CK 18-M30)ELISA Kit Mouse Cytokeratin 18-M30,CK 18-M30 ELISA Kit
小鼠細(xì)胞間粘附分子3(ICAM
抗體 AT2R-Ab ELISA Kit 血管緊張素Ⅱ受體2抗體(AT2R-Ab)ELISA試劑盒
三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員2抗體 AT2R ELISA Kit 血管緊張素Ⅱ受體2(AT2R)ELISA試劑盒
甲胎蛋白抗體 ATⅡR1 ELISA Kit 血管緊張素Ⅱ受體1
Q-PCR技術(shù):
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(real-time quantitative PCR)/QRT-PCR,,是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光標(biāo)記物,,利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過擴(kuò)增曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法,。熒光定量PCR不僅實(shí)現(xiàn)真正實(shí)現(xiàn)了定量,,而且具有靈敏度和特異性、高能實(shí)現(xiàn)多重反應(yīng),、自動(dòng)化程度高,、無污染、實(shí)時(shí)和準(zhǔn)確等特點(diǎn),。
熒光定量PCR所使用的熒光基團(tuán)可分為兩種:熒光探針和熒光染料,。
1.使用SYBR熒光染料法來進(jìn)行熒光定量PCR時(shí),我們首先在PCR反應(yīng)體系中加入過量SYBR熒光染料,。SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后發(fā)射一定量的熒光信號,,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會(huì)發(fā)射熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步,。
2.Taqman探針則是利用探針與模板的特異性結(jié)合的特點(diǎn),,以及探針內(nèi)熒光報(bào)告基團(tuán)和淬滅基團(tuán)的分子特性來實(shí)現(xiàn)對PCR進(jìn)行定量檢測。這種方法可以實(shí)現(xiàn)高靈敏度,,嚴(yán)格針對特定堿基序列的定量實(shí)驗(yàn),。