詳細(xì)介紹
運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,,-20℃保存,有效期一年,。使用本試劑盒提供的陽性對(duì)照時(shí),,由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分,。在專門的區(qū)域操作,。本試劑盒不但準(zhǔn)確、快速,、靈敏,,還具有以下
產(chǎn)品名稱 | 點(diǎn)狀古柏線蟲PCR試劑盒哪家好 |
英文名稱 | Cooperia pectinataPCR |
分類 | PCR檢測試劑盒 |
特點(diǎn):
1. 即開即用,,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,。
2. 預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 494 bp,。
3. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷,。反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物,、酶、dNTP,、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,,只要知道任何一段模板DNA序列,, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增,。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段,。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶,。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列,。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),,避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),,否則會(huì)形成引物二聚體,,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗,。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn),, 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處,。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性,。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
8抗體 dystrophin ELISA Kit 肌養(yǎng)蛋白(dystrophin)ELISA試劑盒
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人激肽釋放酶6(KLK 6)ELISA Kit Human Kallikrein 6,KLK 6 ELISA Kit
人激肽釋放酶2(hK 2)ELISA Kit Human Kallikrein 2,hK 2 ELISA Kit
人激肽釋放酶11(KLK 11)ELISA Kit Human Kallikrein 11,KLK 11 ELISA Kit
人激肽釋放酶1(KLK 1)ELISA Kit Human Kallikrein 1,KLK 1 ELISA Kit
人激素敏感性脂肪酶(HSL)ELISA Kit
點(diǎn)狀古柏線蟲PCR試劑盒哪家好PK)ELISA試劑盒
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神經(jīng)細(xì)胞粘附分子配體1抗體 ROS ELISA Kit 活性氧(ROS)ELISA試劑盒
8號(hào)染色體開放閱讀框30a抗體 ALK1
Q-PCR技術(shù):
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(real-time quantitative PCR)/QRT-PCR,,是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光標(biāo)記物,,利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過擴(kuò)增曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法,。熒光定量PCR不僅實(shí)現(xiàn)真正實(shí)現(xiàn)了定量,,而且具有靈敏度和特異性、高能實(shí)現(xiàn)多重反應(yīng),、自動(dòng)化程度高,、無污染、實(shí)時(shí)和準(zhǔn)確等特點(diǎn),。
熒光定量PCR所使用的熒光基團(tuán)可分為兩種:熒光探針和熒光染料,。
1.使用SYBR熒光染料法來進(jìn)行熒光定量PCR時(shí),我們首先在PCR反應(yīng)體系中加入過量SYBR熒光染料,。SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后發(fā)射一定量的熒光信號(hào),,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會(huì)發(fā)射熒光信號(hào),從而保證熒光信號(hào)的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步,。
2.Taqman探針則是利用探針與模板的特異性結(jié)合的特點(diǎn),,以及探針內(nèi)熒光報(bào)告基團(tuán)和淬滅基團(tuán)的分子特性來實(shí)現(xiàn)對(duì)PCR進(jìn)行定量檢測。這種方法可以實(shí)現(xiàn)高靈敏度,,嚴(yán)格針對(duì)特定堿基序列的定量實(shí)驗(yàn),。