詳細(xì)介紹
運輸及保存:低溫運輸,,-20℃保存,有效期一年,。使用本試劑盒提供的陽性對照時,,由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分,。在專門的區(qū)域操作,。本試劑盒不但準(zhǔn)確、快速,、靈敏,,還具有以下
產(chǎn)品名稱 | 新生隱球菌PCR試劑免費代測 |
英文名稱 | Cryptococcus neoformansPCR |
分類 | PCR檢測試劑盒 |
特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,,操作簡單,。
2. 預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 494 bp。
3. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷,。反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物,、酶、dNTP,、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,,只要知道任何一段模板DNA序列,, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增,。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,,特定條件下可擴增長至10kb的片段,。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶,。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列,。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,,否則會形成引物二聚體,,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗,。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點,, 這對酶切分析或分子克隆很有好處,。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會,。
95 IFITM1/CD225/IFI17 ELISA Kit 干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白1(IFITM1/CD225/IFI17)ELISA試劑盒
20號染色體開放閱讀框187抗體 IP-10/CXCL10 ELISA Kit 干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA試劑盒
21號染色體開放閱讀框59抗體 ITAC/CXCL11 ELISA Kit 干擾素誘導(dǎo)T細(xì)胞趨化因子(ITAC/CXCL11)ELISA試劑盒
20號染色體開放閱讀框152抗體 IRF8 ELISA Kit 干擾素調(diào)節(jié)因子8(IRF8)ELISA試劑盒
20號染色體開放閱讀框165抗體 IRF3 ELISA Kit 干擾素調(diào)節(jié)因子3(IRF3)ELISA試劑盒
20號染色體開放閱讀框166抗體 IRF ELISA Kit 干擾素調(diào)節(jié)因子(IRF)ELISA試劑盒
20號染色體開放閱讀框173抗體 Ifi205 ELISA Kit 干擾素活化基因205(Ifi205)ELISA試劑盒
20號染色體開放閱讀框24抗體 Anti-IFN-ab ELISA Kit 干擾素a-抗體(Anti-IFN-ab)ELISA試劑盒
20號染色體開放閱讀框30抗體 BIRC2/3 ELISA Kit 桿狀病毒IAP重復(fù)包含蛋白2/3(BIRC2/3)ELISA試劑盒
20號染色體開放閱讀框4抗體 HL ELISA Kit 肝脂酶(HL)ELISA試劑盒
20號染色體開放閱讀框7抗體 L-FA
Kit Human PEPD ELISA Kit
人脯氨酸羥化酶(PHD)ELISA Kit Human PHD ELISA Kit
人脯氨酸/谷氨酰銨富含性剪接因子(SFPQ)ELISA Kit Human SFPQ ELISA Kit
人封閉蛋白4(CLDN4)ELISA Kit Human CLDN4 ELISA Kit
人分泌型卷曲相關(guān)蛋白5(SFRP5)ELISA Kit Human SFRP5 ELISA Kit
新生隱球菌PCR試劑免費代測人分泌型卷曲相關(guān)蛋白4(SFRP4)EL
BP ELISA Kit 肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白(L-FABP)ELISA試劑盒
20號染色體開放閱讀框79抗體 HTGL ELISA Kit 肝臟甘油三脂脂肪酶(HTGL)ELISA試劑盒
20號染色體開放閱讀框94抗體 L-FAB
Q-PCR技術(shù):
實時熒光定量PCR(real-time quantitative PCR)/QRT-PCR,,是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光標(biāo)記物,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,后通過擴增曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法,。熒光定量PCR不僅實現(xiàn)真正實現(xiàn)了定量,,而且具有靈敏度和特異性、高能實現(xiàn)多重反應(yīng),、自動化程度高,、無污染、實時和準(zhǔn)確等特點,。
熒光定量PCR所使用的熒光基團(tuán)可分為兩種:熒光探針和熒光染料,。
1.使用SYBR熒光染料法來進(jìn)行熒光定量PCR時,我們首先在PCR反應(yīng)體系中加入過量SYBR熒光染料,。SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后發(fā)射一定量的熒光信號,,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步,。
2.Taqman探針則是利用探針與模板的特異性結(jié)合的特點,,以及探針內(nèi)熒光報告基團(tuán)和淬滅基團(tuán)的分子特性來實現(xiàn)對PCR進(jìn)行定量檢測。這種方法可以實現(xiàn)高靈敏度,,嚴(yán)格針對特定堿基序列的定量實驗,。