詳細介紹
產(chǎn)品名稱:斯氏分枝桿菌PCR試劑免費代測
英文名稱:Mycobacterium szulgaiPCR
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融,。
運輸:低溫,、避光,快遞免費送貨上門,。
PCR實驗外包服務:
PCR起源:熒光定量PCR(也稱TaqMan PCR,以下簡稱FQ-PCR)是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術,,該技術是在常規(guī)PCR基礎上加入熒光標記探針來實現(xiàn)其定量功能的,與變通PCR相比,,F(xiàn)Q-PCR具有許多優(yōu)點,。與普通PCR相比,F(xiàn)Q-PCR具有許多優(yōu)點:1,、封閉反應,,無需PCR后處理。2,、特異性強,,靈敏度高。3,、采用對數(shù)期分析,,摒棄終點數(shù)據(jù),定量準確,。4,、定量范圍寬,可達到10個數(shù)量級,。5、儀器在線式實時檢測,,結(jié)果直觀,,避免人為判斷。6,、可實現(xiàn)一管雙檢或多檢,。7、操作安全,,縮短時間,,提高效率。熒光定量 PCR是 通過對 PCR 擴增反應中每一個循環(huán)產(chǎn)物熒光信號的實時檢測從而實現(xiàn)對起始模板定量及定性的分析,。
注意事項:
1.基礎程序,;
2.擴增溫度和延伸溫度,;
3.反應時間;
4.循環(huán)次數(shù),;
5.PCR 反應液的配制,;
6.PCR技術的基本原理;
7.PCR的反應動力學,;
8.PCR擴增產(chǎn)物,;
9.PCR反應體系與反應條件。【結(jié)果分析條件設定】
u 基線(Baseline)設定:應選擇該次實驗指數(shù)擴增前所有樣本熒光信號比較穩(wěn)定的一段區(qū)域(所有樣本熒光信號無較大波動),,起始點(Start)應避開熒光采集起始階段的信號波動,,終止點(End)應比早出現(xiàn)指數(shù)擴增的樣本Ct值減少1~3個循環(huán),建議基線設為6~15,。
u 閾值(Threshold)設定:將閾值線設定在剛好超過正常陰性質(zhì)控品擴增曲線的點,。
【質(zhì)控標準】
1. 陰性質(zhì)控品的檢測結(jié)果應為陰性,無指數(shù)擴增期,,Ct=40或無Ct,;
2. 陽性質(zhì)控品的檢測結(jié)果應為陽性,有明顯的指數(shù)擴增期,,Ct值應小于等于35,;
3. 以上要求需在一次實驗中同時滿足,否則該次實驗視為無效,。
【結(jié)果判斷】
1. 陽性:有明顯的指數(shù)擴增期,,且Ct<38;
2.可疑:有明顯的指數(shù)擴增期,,且38≤Ct<40,,此時樣本為可疑樣本;對于可疑樣本建議復核一次,,若復核結(jié)果Ct<40且有指數(shù)擴增期,,則判定為陽性,否則判定為陰性,;
3. 陰性:無指數(shù)擴增期,,Ct=40或無Ct值均判定為陰性樣本。
【對檢驗結(jié)果的解釋】
1. 實驗室環(huán)境污染,、試劑污染,、樣品交叉污染會出現(xiàn)假陽性結(jié)果;
2. 試劑運輸,、保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降,,可能會導致出現(xiàn)假陰性結(jié)果。
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特點優(yōu)勢:
1.特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,,特異性均達到100%,。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%,。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,,無需繁瑣的增菌過程,。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,,除GenBank公布的序列外,,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性,。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果,。