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微生物菌種的評價
閱讀：361 發(fā)布時間：2017-7-10一,、微生物菌種生物制品
生物制品用菌毒種應(yīng)采用種子批系統(tǒng)。用菌毒種應(yīng)按各論要求進(jìn)行檢定,。應(yīng)對用菌毒種已知的主要抗原表位的遺傳穩(wěn)定性進(jìn)行檢測,，并證明在規(guī)定的使用代次內(nèi)其遺傳性狀是穩(wěn)定的。菌毒種經(jīng)檢定后,，應(yīng)根據(jù)其特性,，選用凍干或適當(dāng)?shù)姆椒皶r保存。保存的菌毒種傳代或凍干均應(yīng)填寫記錄,。
生物制品各論中涉及的微生物檢定
培養(yǎng)物純度,、培養(yǎng)特征、染色鏡檢,、電鏡檢查,、生化反應(yīng)、血清學(xué)特性、對抗生素的抗性,、毒力試驗,、免疫力試驗、免疫原性試驗,、抗原性試驗,、目的基因核苷酸序列測定、質(zhì)粒DNA檢測,、質(zhì)?？截悢?shù)、DNA殘留,、蛋白質(zhì)殘留等,。
二、微生態(tài)活菌制品
用菌種應(yīng)按照“生物制品檢定用菌毒種管理規(guī)程”的有關(guān)規(guī)定建立種子批系統(tǒng),。
菌種的屬,、種型分類鑒定，應(yīng)依據(jù)版伯杰氏細(xì)菌系統(tǒng)鑒定手冊（Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology）和伯杰氏細(xì)菌命名手冊(Bergey’s Manual of DeterminativeBacteriology）的有關(guān)規(guī)定,，包括形態(tài),、生長代謝特性檢查，原始種子或主種子還應(yīng)作遺傳特性和抗生素敏感性等檢查,。
三級種子批常規(guī)檢查包括培養(yǎng)特性及染色鏡檢,、生化反應(yīng)、毒性試驗,，除另有規(guī)定外,，原始種子或主種子批還需進(jìn)行以下檢查：細(xì)菌代謝產(chǎn)物-脂肪酸測定、遺傳特性分析,、抗生素敏感性試驗,、穩(wěn)定性試驗。
三,、微生物鑒定指導(dǎo)原則（通則9204）
微生物鑒定是藥品微生物檢驗中的重要環(huán)節(jié),，藥典附錄相應(yīng)章節(jié)中對檢出微生物的鑒定做了明確規(guī)定，如“非無菌產(chǎn)品的微生物檢查：控制微生物菌種檢查”（通則1106）中選擇培養(yǎng)基或指示培養(yǎng)基上發(fā)現(xiàn)的疑似菌落需進(jìn)行鑒定,；對“無菌檢查法”（通則1101）的陽性實驗結(jié)果中分離的微生物進(jìn)行鑒定,，以判定試驗是否重試；藥品潔凈實驗室微生物監(jiān)測和控制指導(dǎo)原則（通則9203）中建議對潔凈室和其他受控環(huán)境分離到的微生物進(jìn)行鑒定,，以掌握環(huán)境微生物污染情況,，有助于污染調(diào)查。此外,，在藥品中,，有時亦需對藥物原料,、輔料、制藥用水,、環(huán)境,、中間產(chǎn)物和終產(chǎn)品中檢出的微生物進(jìn)行適當(dāng)水平的鑒定。
微生物鑒定內(nèi)容包括待檢菌的分離純化,、氧化酶試驗,、過氧化氫酶試驗、凝固酶試驗,、培養(yǎng)特征,、細(xì)胞特征、生理學(xué)特征,、生化反應(yīng),、抗生素敏感性、血清學(xué)特征,、脂肪酸、微生物毒素,、全細(xì)胞組分,、DNA-DNA雜交、GC摩爾百分含量,、PCR反應(yīng),、16S rRNA序列、18S rRNA序列,、MLST,、DNA探針、核糖體分型,、限制性酶切片段圖譜等,。
菌株水平的鑒定在污染調(diào)查過程中非常有用，當(dāng)產(chǎn)品中的微生物數(shù)量高于建議水平或出現(xiàn)異常高的微生物檢出率時尤其適用,。菌株水平的鑒定在無菌工藝中也很重要,，在無菌試驗結(jié)果陽性和培養(yǎng)基灌裝等模擬工藝失敗時，必須對檢出的微生物進(jìn)行評估,。微生物菌種水平鑒定技術(shù)方法包括限制性核酸內(nèi)切酶酶解,、Southern雜交、PFGE,、全基因組測序,、血清型等。