人骨髓來源內(nèi)皮祖原代細胞公司正在銷售的產(chǎn)品：人原代骨髓來源內(nèi)皮祖細胞 MCF-7(人癌細胞) RAW 264.7 小鼠單核巨噬細胞白血病細胞 1ml/T75 P388D1 小鼠淋巴樣瘤細胞 HCT-15 人結(jié)直腸腺癌細胞 小鼠原代腸系膜平滑肌細胞

人骨髓來源內(nèi)皮祖原代細胞

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代,；不建議多次傳代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%

 

人骨髓來源內(nèi)皮祖細胞分離自骨髓,；骨髓是機體的造血組織，位于身體的許多骨骼內(nèi),。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓,。紅骨髓能制造紅細胞,、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用,，白細胞能殺滅與抑制各種病原體,，包括細菌、病毒等,；某些淋巴細胞能制造抗體,。因此，骨髓不但是造血器官,，它還是重要的免疫器官,。骨髓是存在于長骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,，是一種海綿狀的組織,，能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色,，稱為紅骨髓,。出生時，紅骨髓充滿全身骨髓腔,，隨著年齡增大,，脂肪細胞增多，相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,，后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓,。內(nèi)皮祖細胞是血管內(nèi)皮細胞的前體細胞，亦稱為成血管細胞（Angioblast）,，是一群具有游走特性,，能進一步增殖分化的幼稚內(nèi)皮細胞，缺乏成熟內(nèi)皮細胞的特征性表型,，不能形成管腔樣結(jié)構(gòu),，其功能主要為參與了出生后缺血組織的血管發(fā)生和血管損傷后的修復(fù)。研究顯示,，內(nèi)皮祖細胞在心腦血管疾病,、外周血管疾病、腫瘤血管形成及創(chuàng)傷愈合等方面均發(fā)揮重要作用,，并為缺血性疾病的研究治療提供了新思路,，EPCs生物學(xué)特性和治療作用的研究成為這一領(lǐng)域新的熱點。

方法簡介：

公司實驗室分離的人骨髓來源內(nèi)皮祖細胞采用沖洗骨髓,、密度梯度離心,、差速貼壁法結(jié)合內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的人骨髓來源內(nèi)皮祖細胞經(jīng)CD34免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞,，如白血病細胞、淋巴細胞,、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。

Chang liver細胞,，CCL13張氏肝細胞正常 人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染細胞株(HEK293),APP-PS1細胞 豚鼠皮膚細胞;GP-S3  人腦血管周細胞裂解物HBVCL  小鼠皮層神經(jīng)膠質(zhì)細胞(EGFP標記) 小鼠骨骼肌成纖維細胞，NOR-10細胞 小鼠原代胸腺基質(zhì)細胞 小鼠原代睪丸間質(zhì)細胞

結(jié)合球蛋白(CBG)重組蛋白 Recombinant Corticosteroid Binding Globulin (CBG)

CDK1 Protein Human 重組人 CDC2 Kinase / CDK1 蛋白 (GST 標簽)

FGF1重組人 aFGF / FGF1 蛋白 Protein

HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/S1211394/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

SMR3B重組人 SMR3B 蛋白 (Fc 標簽) Protein

兔子高遷移率族蛋白1(HMG-1)ELISA 試劑盒

People androstene two ketone (ASD) ELISA Kit 人雄(ASD)試劑盒

Humanai-macrophageaibodyELISAKit 人抗巨噬細胞抗體(ai-macrophageAb)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanepidemicparotitis,EP試劑盒人流行性腮腺(EP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織PKG激酶總活性定量試劑盒(A/B/C)20次

HumanPancreaticPolypeptide,PPELISAKit人胰多肽(PP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人粘蛋白21(MUC21)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human MUC21 (Mucin 21) ELISA Kit

人伴侶蛋白10(CPN10)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human CPN10 (Chaperonin 10) ELISA Kit

人趨化素(CHEM)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human CHEM(Chemerin) ELISA Kit

人趨化因子C-C-基元配體1(CCL1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human CCL1 (Chemokine C-C-Motif Ligand 1) ELISA Kit

人骨髓來源內(nèi)皮祖原代細胞豚鼠谷轉(zhuǎn)酶(ALT)試劑盒 ,，英文名： ALT ELISA Kit

Human calmodulin (CAM) ELISA Kit 人鈣調(diào)素(CAM)試劑盒

rabbitEndostatin,ESELISAKit 兔子內(nèi)皮抑素(ES)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBACE2ELISAKit大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2

線蟲繁殖培養(yǎng)試劑盒10次

rabbitCarboxyterminalpropeptideoftypeⅠprocollagen,PⅠCPELISAKit兔子Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

LTA4H重組小鼠 Leukotriene A4 Hydrolase / LTA4H 蛋白 Protein

Batroxobin Protein 蛇毒巴曲酶全蛋白 1mgBatroxobin Protein 蛇毒巴曲酶全蛋白

CALML3重組人 CALML3 蛋白 Protein

IL23 Protein Human 重組人 IL-23 (IL23A & IL12B Heterodimer) 蛋白

HGF Protein Rat 重組大鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白

客戶收到細胞后,，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數(shù)有限約 2 代,，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1,、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜,，放入 37℃,，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時,，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2,、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng),。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基,，用 PBS 清洗細胞一次,。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右,；顯微鏡下觀察,，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化,。

3)用吸管輕輕吹打混勻,，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL,，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基,。