人肝竇內(nèi)皮原代細(xì)胞公司正在銷售的產(chǎn)品：人原代肝竇內(nèi)皮細(xì)胞 LoVo(人大腸癌細(xì)胞) EL4 小鼠淋巴瘤細(xì)胞 1ml/T75 NCI-H524 人小細(xì)胞肺癌 RKO 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞 小鼠原代肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞

人肝竇內(nèi)皮原代細(xì)胞

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）

培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%

 

人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞細(xì)胞分離自肝臟組織,；肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個(gè)器官，并在身體里面起著去氧化,、儲(chǔ)存肝糖,、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用；肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁,。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里大的器官,，位于機(jī)體中的腹部位置，在右側(cè)橫隔膜之下,，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,，胃的上方。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中大的消化腺,，為一紅棕色的V字形器官,。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官,。肝臟在機(jī)體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu)：肝臟位于右上腹,，隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面，大部分肝為肋弓所復(fù)蓋，僅在腹上區(qū),、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,，肝上面則與膈及腹前壁相接。肝竇內(nèi)皮細(xì)胞（SEC）是肝臟內(nèi)所占比例高的非實(shí)質(zhì)細(xì)胞,，位于肝竇腔與肝細(xì)胞之間,，具有物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)、吞噬,、抗原提呈,、免疫耐受等功能。SEC由于擁有一般細(xì)胞所沒(méi)有的窗孔結(jié)構(gòu),、細(xì)胞間連結(jié)松散,、內(nèi)皮下缺少基底膜而使其具有高度通透性，從而達(dá)到快速交換各種大小分子的目的,。肝在遭到多種病原侵襲時(shí),，肝竇內(nèi)皮細(xì)胞窗孔逐漸減少或消失，內(nèi)皮下基膜形成,，產(chǎn)生類似于連續(xù)型毛細(xì)血管的結(jié)構(gòu),，這一過(guò)程稱為肝竇毛細(xì)血管化。它由多種因素引起,，其過(guò)程極復(fù)雜,，在多種肝病的發(fā)病前期階段均有出現(xiàn)，近年來(lái)受到廣泛關(guān)注,。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞采用混合酶灌流消化,、反復(fù)低速離心、密度梯度離心法,，并通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31,、CD14免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV,、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用,、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng),。

　?、?消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,，如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

CFHR2 Others Human 人 CFHR2 / FHR2 / HFL3 人細(xì)胞裂解液   IFNA8 Others Human 人 Ierferon alpha-B / IFNA8 人細(xì)胞裂解液   CM-H046人肝星形細(xì)胞中和液TNS  b16   小鼠黑色素瘤細(xì)胞 小鼠原代嗅球神經(jīng)干細(xì)胞 人原代結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞

2,4-D/BSA 2,，4-二氯苯氧乙酸偶聯(lián)牛血清白蛋白 1mg2,4-D/BSA 2,，4-二氯苯氧乙酸偶聯(lián)牛血清白蛋白

AK4 Protein Human 重組人 AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

PLA2G12B重組小鼠 PLA2G12B / PLA2G13 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

LTBR Protein Rat 重組大鼠 LTBR / TNFRSF3 蛋白 (His 標(biāo)簽)

USP46重組人 / 小鼠 USP46 蛋白 (N-SUMO) Protein

兔子血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA 試劑盒

Rat angiopoietin receptor Tie2 (ANG-R-Tie2) ELISA Kit 大鼠血管生成素受體Tie2(ANG-R-Tie2)試劑盒

Humanai-ribosomalPproteinaibody,ARPA/Rib-PELISAKit 人抗核糖體P蛋白抗體(ARPA/Rib-P)試劑盒 進(jìn)口分裝

HumanD-Dimer,D2D試劑盒人D二聚體(D2D)試劑盒

組織IRAK1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

Humanplasmin-aiplasmincomplex,PAPELISAKit人纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)試劑盒

小鼠纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)試劑盒   96T/48T

小鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)試劑盒   96T/48T

小鼠纖溶酶/纖維蛋白溶酶(PL/Fbn)試劑盒   96T/48T

小鼠纖連蛋白(FN)試劑盒   96T/48T

人肝竇內(nèi)皮原代細(xì)胞小鼠戊糖素(Peosidine)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human Phosphoglucomase (PGM) ELISA Kit 人0酸葡萄糖變位酶(PGM)試劑盒

HumanAngiotensinaseELISAKit 人血管緊張肽酶(Angiotensinase)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

ChickenIerferonγ,IFN-γ試劑盒雞γ干擾素(IFN-γ)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞ERBETA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次

Mouseglycogensyhasekinase,GSKELISAKit小鼠糖原合成酶激酶(GSK)試劑盒規(guī)格：96T/48T

CD86重組大鼠 CD86 / B7-2 蛋白 Protein

HIV gp120 艾滋病病毒(抗原 0.5mgHIV gp120 艾滋病病毒(抗原)

HSPD1重組人 HSPD1 / HSP60 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

IL27 Protein Human 重組人 IL27 / Interleukin-27 蛋白

HDAC8 Protein Mouse 重組小鼠 HDAC8 / HDACL1 蛋白

客戶收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作,。(該細(xì)胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細(xì)胞后盡快安排后續(xù)實(shí)驗(yàn))

1,、取出細(xì)胞瓶,，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃,，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時(shí),，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2,、待細(xì)胞達(dá)到 80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

3、細(xì)胞傳代：

1)吸出細(xì)胞瓶中的培養(yǎng)基,，用 PBS 清洗細(xì)胞一次,。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右,；顯微鏡下觀察,，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻,，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。

4)待細(xì)胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基,。