大鼠子宮頸上皮原代細胞

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2,，5%

大鼠子宮頸上皮細胞分離自子宮頸組織；子宮頸位于子宮下部,，近似圓錐體,，上端與子宮體相連，下端深入陰道。陰道頂端的穹隆又將子宮頸分為兩部分：宮頸突入陰道的部分稱宮頸陰道部,，在陰道穹隆以上的部分稱宮頸陰道上部,。宮頸的中央為前后略扁的長梭性管腔，其上端通過宮頸內(nèi)口與子宮腔相連,，其下端通過宮頸外口開口于陰道,。內(nèi)外口之間即宮頸管。宮頸的大小與宮體比例隨年齡及內(nèi)分泌狀態(tài)等而變化,；宮頸壁由黏膜,、肌層和外膜組成。子宮頸可有多種疾病,，包括胚胎發(fā)育異常,、炎癥、瘤樣病變,、良性腫瘤,、惡性腫瘤、損傷,、宮頸性不孕,、輔助生育技術(shù)、宮頸與性,、宮頸妊娠等許多問題,，體外培養(yǎng)的子宮頸上皮細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義,。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠子宮頸上皮細胞采用先膠原酶消化,、后組織貼塊法，結(jié)合上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的大鼠子宮頸上皮細胞經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　?、?消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞,、淋巴細胞,、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

客戶收到細胞后,，請按照以下方法進行操作,。(該細胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1,、取出細胞瓶,，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃,，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時,，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2,、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng),。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基,，用 PBS 清洗細胞一次,。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右,；顯微鏡下觀察,，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化,。

3)用吸管輕輕吹打混勻,，按 1:2 或 1:3 等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。

4)待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基,。

CD3D Others Mouse 小鼠 CD3d / CD3 delta 人細胞裂解液   前脂肪細胞分化PADM  CL-0302PA319(人大腸癌細胞)  支氣管上皮細胞生長添加物BEpiCGS  Kyse510   人食管癌細胞  BIU-87/Adr 小鼠原代脂肪干細胞 小鼠原代牙髓干細胞

抑制素βE(INHβE)重組蛋白 Recombinant Inhibin Beta E (INHbE)

IL17RA Protein Human 重組人 IL17RA / CD217 蛋白 (His & Fc 標簽)

IL1RAPL1重組人 IL-1R8 / IL1RAPL1 蛋白 Protein

GFP Protein Aequorea victoria 重組水母 GFP 蛋白

HA重組甲型流感 H10N3 (A/duck/Hong Kong/786/1979) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

豚鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)ELISA 試劑盒

Rat androgen (androgen) ELISA Kit 大鼠雄激素(androgen)試劑盒

Humanβ2-Glycoprotein1AibodyIgG,β2-GP1AbIgGELISAKit 人β2糖蛋白1抗體IgG(β2-GP1AbIgG)試劑盒 進口分裝

HumanCX3C-chemokinereceptor1,CX3CR1試劑盒人CX3C趨化因子受體1(CX3CR1)試劑盒

組織ERK1/2激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

Humanprogesteronereceptor,，PGRELISAKit人孕同受體(PGR)試劑盒

中文名稱   方法   規(guī)格

人葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISAKit   ELISA.  

人胰島素原(PI)ELISAKit   ELISA.  

人胰島素受體β(ISR-β)ELISAKit   ELISA.

大鼠子宮頸上皮原代細胞豚鼠內(nèi)皮型合酶(NOS3)試劑盒 ，英文名： NOS3 ELISA Kit

Human replication protein A (RPA-70) ELISA Kit 人復制蛋白A(RPA-70)試劑盒

Rabbitsolublevasccularcelladhesionmolecule1,sVCAM-1ELISAKit 兔子可溶性血管細胞粘附分子1(sVCAM-1)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBAX(RabbitBcl-2AssaciatedXprotein)ELISAKit兔Bcl-2相關(guān)X蛋白

線蟲β-半乳糖苷酶比色法定量試劑盒20次

rabbitCollageypeⅠ,ColⅠELISAKit兔子Ⅰ型膠原(ColⅠ)試劑盒規(guī)格：96T/48T

FGFR4重組食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白  Protein

MDM2 (urine double minute 2 0.5mgMDM2 (urine double minute 2) 雙微體2癌基因抗原

IL21R重組人 IL-21R / Interleukin-21 Receptor 蛋白 (His 標簽) Protein

AK4 Protein Human 重組人 AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L1 蛋白

DDR1 Protein Mouse 重組小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白 (His & GST 標簽)