大鼠輸尿管上皮原代細胞

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

大鼠輸尿管上皮細胞分離自輸尿管組織,；輸尿管上接腎盂,，下連膀胱，是一對細長的管道,，呈扁圓柱狀,，位于腹膜后，為一肌肉粘膜所組成管狀結(jié)構(gòu),，沿腰大肌內(nèi)側(cè)的前方垂直下降進入骨盆,。輸尿管有三個狹窄部：一個在腎盂與輸尿管移行處（輸尿管起始處）；一個在越過小骨盆入口處,；后一個在進入膀胱壁的內(nèi)部,。這些狹窄是結(jié)石、及壞死組織容易停留的部位,。輸尿管——膀胱連接處有一種特殊結(jié)構(gòu),，即瓦耳代爾鞘，它能有效地防止膀胱內(nèi)尿液返流到輸尿管,。臨床上將輸尿管分為上,、中、下三段,，也可稱為腹段,、盆段、膀胱段,。其中,，腹段自腎盂輸尿管交界處，到跨越髂動脈處,；盆段,，自髂動脈到膀胱壁；膀胱段,，自膀胱壁內(nèi)斜行至膀胱粘膜,、輸尿管開口。輸尿管管壁分為4層，黏膜層,、固有層,、肌層、外膜,。黏膜層表面為移行上皮,，約有4-5層細胞；固有層由細密的結(jié)締組織構(gòu)成,，內(nèi)含膠原纖維和少量彈性纖維,；輸尿管肌層主要由內(nèi)縱和外環(huán)兩層平滑肌組成；外膜為疏松結(jié)締組織,，營養(yǎng)血管由外膜進入輸尿管,。其中，輸尿管上皮細胞主要分布于黏膜層,。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠輸尿管上皮細胞采用先蛋白酶消化,、然后機械分離法使輸尿管分層、后膠原酶消化,，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的大鼠輸尿管上皮細胞經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞,，如白血病細胞、淋巴細胞,、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。

客戶收到細胞后,，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數(shù)有限約 2 代,，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1,、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜,，放入 37℃,，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時，以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。

2,、待細胞達到 80%匯合時準(zhǔn)備進行傳代培養(yǎng)。

3,、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基,，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中,，37℃消化 3min 左右,；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液,，再加入培養(yǎng)液終止消化,。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代,，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL,，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。

BxPC-3細胞,，人原位胰腺腺癌細胞 人皮膚纖維微細胞系,Malmc細胞 小鼠漿細胞瘤;MPC-11  原代平滑肌細胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝：5/2.5/1ml  Raji細胞,，Butt's 淋巴瘤細胞 卵巢癌細胞,L1細胞 羊原代肺成纖維細胞 小鼠原代骨髓肥大細胞

2,4-D/KLH(2,4-Dichlorophenoxyacetic acid 5mg2,4-D/KLH(2,4-Dichlorophenoxyacetic acid) 2,，4-二氯苯氧乙酸偶聯(lián)血藍蛋白

IL3 Protein Human 重組人 IL-3 / Interleukin-3 蛋白

YWHAE重組小鼠 14-3-3 epsilon / YWHAE 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein

IL3 Protein Rat 重組大鼠 IL3 / interleukin 3 蛋白

NRG1重組人 NRG1-beta 1 蛋白 (ECD) Protein

小鼠凋亡相關(guān)因子配體(FASL)ELISA 試劑盒

Human iggering receptor expressed on myeloid cells -1 (EM-1) ELISA Kit 人髓系細胞觸發(fā)受體-1(EM-1)試劑盒

HumanChlamydiaachomatis,CTELISAKit 人沙眼衣原體抗體(CT)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanargininevasopressin,AVP試劑盒人精加壓素(AVP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物源性食品花生(pean)試劑盒20次

Humahymus-leukemiaaigen,TLaELISAKit人白血病抗原(TLa)試劑盒規(guī)格：96T/48T

木聚糖酶測試盒   可見分光光度法   50管/24樣

酸性木聚糖酶測試盒   可見分光光度法   50管/24樣

堿性木聚糖酶測試盒   可見分光光度法   50管/24樣

β-木糖苷酶測試盒   可見分光光度法   50管/24樣

大鼠輸尿管上皮原代細胞豬催乳素(PRL)試劑盒

Human macrophage chemotatic factor (MCF) ELISA Kit 人巨噬細胞趨化因子(MCF)試劑盒

Porcinemyeloperoxidase,MPOELISAKit 豬髓過氧化物酶(MPO)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforAlpha1-AGP(HumanAlpha1-Acidglycoprotein)ELISAKit人α1酸性糖蛋白

血液0酸二酯酶2(PDE2)活性熒光定量試劑盒10次

Mouseβ2-glycoprotein1aibodyIgA/G/M,β2-GP1IgA/G/MELISAKit小鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1IgA/G/M)試劑盒

MDGA2重組小鼠 MDGA2 / MAMDC1 蛋白 Protein

BCRP/ABCG2(breast cancer resistance protein 0.5mgBCRP/ABCG2(breast cancer resistance protein) 癌耐藥相關(guān)蛋白(抗原)

LRP10重組人 LRP10 蛋白 Protein

IL1RL1 Protein Human 重組人 IL1RL1 / ST2 蛋白 (isoform a, His 標(biāo)簽)

CD40LG Protein Rat 重組大鼠 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)