大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)原代細(xì)胞公司正在銷售的產(chǎn)品：大鼠原代視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞 WB-F344(大鼠肝上皮樣干細(xì)胞) HL-60 人早幼粒急性白血病細(xì)胞 1ml/T75 JM 人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞 NCI-H1650 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 小鼠原代臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞

大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞分離自視網(wǎng)膜組織；視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層,，是一層透明的薄膜,。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺層組成，兩層間在病理情況下可分開,，稱為視網(wǎng)膜脫離,。色素上皮層與脈絡(luò)膜緊密相連，由色素上皮細(xì)胞組成,，它們具有支持和營(yíng)養(yǎng)光感受器細(xì)胞,、遮光、散熱以及再生和修復(fù)等作用。組織學(xué)上視網(wǎng)膜分為10層,，由外向內(nèi)分別為：色素上皮層,、視錐、視桿細(xì)胞層,、外界膜,、外顆粒層,、外叢狀層,、內(nèi)顆粒層、內(nèi)叢狀層,、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層,、神經(jīng)纖維層、內(nèi)界膜,。視網(wǎng)膜內(nèi)層為襯于血管膜內(nèi)面的一層薄膜,，有感光作用；后部鼻側(cè)有一視神經(jīng)乳頭,。視網(wǎng)膜上的感覺層是由三個(gè)神經(jīng)元組成,。第一神經(jīng)元是視細(xì)胞層，專司感光,，它包括錐細(xì)胞和桿細(xì)胞,。視桿細(xì)胞主要在離中心凹較遠(yuǎn)的視網(wǎng)膜上，而視錐細(xì)胞則在中心凹處多,。第二層叫雙節(jié)細(xì)胞,，約有10到數(shù)百個(gè)視細(xì)胞通過雙節(jié)細(xì)胞與一個(gè)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞相聯(lián)系，負(fù)責(zé)聯(lián)絡(luò)作用,。第三層叫節(jié)細(xì)胞層,，專管傳導(dǎo)。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復(fù)雜的結(jié)構(gòu),，它貼于眼球的后壁部,，傳遞來自視網(wǎng)膜感受器沖動(dòng)的神經(jīng)纖維跨越視網(wǎng)膜表面，經(jīng)由視神經(jīng)到達(dá)出口,。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的,，在黃斑區(qū)，其分辨能力,。視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞貼壁后呈單層排列,，部分細(xì)胞聚集成團(tuán)，細(xì)胞呈圓形或橢圓形,，核圓且相對(duì)透明,，有些細(xì)胞膜上伸出短而小的突起；該細(xì)胞為高度分化細(xì)胞，在體外屬于不增殖群,。視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞是青光眼病理性損害的主要細(xì)胞,，視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的死亡可導(dǎo)致視功能不可逆損傷，研究視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞損害的細(xì)胞學(xué)和分子生物學(xué)機(jī)制有利于青光眼發(fā)病機(jī)制的研究,。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞采用蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法,，結(jié)合視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)和化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞經(jīng)CD90免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。

大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)原代細(xì)胞

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 神經(jīng)元細(xì)胞樣

傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞,；屬于不增殖細(xì)胞群

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%

 

?組織

?

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用,、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng),。

　?、?消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,，如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。

BT-20(人癌細(xì)胞)  人肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞HPASMC  原代骨骼肌細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝：5/2.5/1ml  SELL Others Mouse 小鼠 SELL / CD62L / L-selectin 人細(xì)胞裂解液   NCI-H1299 羊原代肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 大鼠原代杏仁核神經(jīng)元細(xì)胞

NOS-3 (eNOS 0.5mgNOS-3 (eNOS) endotheli cell NOS 合成酶-3(抗原)

CDH1 Protein Human 重組人 E-Cadherin / CDH1 / E-cad / CD324 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

EFNB2重組狗 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

VCL Protein Mouse 重組小鼠 VCL / Vinculin 蛋白

TRIB2重組人 TRIB2 / TRB2 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

小鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(HGFR/ c-MET)試劑盒

Human varicella zoster virus IgG (VZV-IgG) ELISA Kit 人水痘帶狀皰疹病毒IgG(VZV-IgG)試劑盒

HumanAi-ThrombinⅢ,AT-ⅢELISAKit 人抗Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanai-ophoblastaibody,ATA試劑盒人抗滋養(yǎng)膜細(xì)胞抗體(ATA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物氧化應(yīng)激活性氧(ROS)比色法定量試劑盒(超氧陰離子)20次

Humanansferfactor，TFELISAKit人轉(zhuǎn)移因子(TF)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGF-β2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒   Human TGF-β2 (ansforming Growth Factor β2) ELISA Kit

人血小板生成素(TPO)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒   Human TPO (Thrombopoietin) ELISA Kit

人血小板反應(yīng)蛋白1(TSP-1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒   Human TSP-1 (Thrombospondin-1) ELISA Kit

人血小板反應(yīng)蛋白2(TSP-2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒   Human TSP-2 (Thrombospondin-2) ELISA Kit

大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)原代細(xì)胞豬雌激素(E)ELISA 試劑盒

Human macrophage inflammatory protein 3 alpha (MIP-3 alpha /CCL20) ELISA Kit 人巨噬細(xì)胞性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)試劑盒

Porcinegasieceptor,GsaRELISAKit 豬促胃液素受體(GsaR)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforALP-B(MouseBone-specificAlkphaseB)ELISAKit小鼠骨特異性堿性0酸酶B

血液0酸二酯酶5(PDE5)活性酶連續(xù)循環(huán)定0比色法定量試劑盒20次

Mouseα-Glucosidase,a-GluELISAKit小鼠α葡萄糖苷酶(a-Glu)試劑盒

WIF1重組小鼠 WIF1 / WIF-1 蛋白 Protein

催乳素(PRL)重組蛋白 Recombinant Prolactin (PRL)

BTK重組人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 蛋白 Protein

IL2 Protein Human 重組人 Interleukin-2 / IL-2 蛋白

NT5E Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD73 / NT5E 蛋白

客戶收到細(xì)胞后,，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作,。(該細(xì)胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細(xì)胞后盡快安排后續(xù)實(shí)驗(yàn))

1,、取出細(xì)胞瓶,，75%酒精消毒后拆下封口膜,，放入 37℃,，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時(shí)，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。

2,、待細(xì)胞達(dá)到 80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

3,、細(xì)胞傳代：

1)吸出細(xì)胞瓶中的培養(yǎng)基,，用 PBS 清洗細(xì)胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中,，37℃消化 3min 左右,；顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,，再加入培養(yǎng)液終止消化,。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL,，放入 37℃ 5% CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細(xì)胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。