大鼠結(jié)腸黏膜上皮原代細(xì)胞公司正在銷售的產(chǎn)品：大鼠原代結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞 BRL(大鼠肝細(xì)胞) HCT-116 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 1ml/T75 GLC-82 肺腺癌 SK-N-SH, 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 Human 小鼠原代小腸平滑肌細(xì)胞

大鼠結(jié)腸黏膜上皮原代細(xì)胞

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

 

大鼠結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞分離自結(jié)腸組織,；結(jié)腸在右髂窩內(nèi)續(xù)于盲腸,，在第3骶椎平面連接直腸。結(jié)腸分升結(jié)腸,、橫結(jié)腸,、降結(jié)腸和乙狀結(jié)腸4部分，大部分固定于腹后壁,，結(jié)腸的排列酷似英文字母“M",，將小腸包圍在內(nèi)。結(jié)腸橫切面由內(nèi)到外依次為：黏膜（上皮層,、固有層,、黏膜肌層）,，黏膜下層（疏松結(jié)締組織），肌層（內(nèi)環(huán)形,、外縱行兩層平滑?。饽ぃɡw維膜或漿膜）,。腸黏膜上皮細(xì)胞是機(jī)體內(nèi)外環(huán)境的重要屏障,，持續(xù)暴露于大量抗原中，也是機(jī)體面對病原微生物的第一道防線,。因此,，腸黏膜上皮細(xì)胞除有吸收、分泌和轉(zhuǎn)運(yùn)等重要生理功能之外,，在黏膜先天性和獲得性免疫防御機(jī)制中也起著重要作用,。腸黏膜上皮細(xì)胞作為首先接觸抗原的細(xì)胞，在黏膜免疫反應(yīng)的起始階段發(fā)揮關(guān)鍵作用,，它決定黏膜免疫反應(yīng)的發(fā)生、性質(zhì)和強(qiáng)度,。探討正常結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞的分離,、體外培養(yǎng)方法，為研究腸黏膜上皮細(xì)胞以及與腸黏膜相關(guān)疾病建立合適的細(xì)胞模型,。

方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞采用先機(jī)械分離法,、后膠原酶消化法并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

　?、?消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。

ACVRL1 Others Mouse 小鼠 ALK-1 人細(xì)胞裂解液   HuH-6(人肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞)     MET Others Human 人 c-MET / HGFR 人細(xì)胞裂解液   SHZ-88(大鼠癌細(xì)胞)   ACHN 人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞 豬原代肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞 小鼠原代頸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞

Insulin protein (from porcine pancreas 0.5mgInsulin protein (from porcine pancreas) 豬胰島素

IL18 Protein Human 重組人 IL18 / Interleukin 18 / IGIF 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

ACE2重組食蟹猴 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 Protein

IL36B Protein Mouse 重組小鼠 IL1F8 / IL36b 蛋白

TLK1重組人 TLK1 / PKU-beta 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

小鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲酸蛋白酶抑制劑(vaspin)ELISA 試劑盒

Rat basic fibroblast growth factor 4 (bFGF-4) ELISA Kit 大鼠堿性成纖維細(xì)胞生長因子4(bFGF-4)試劑盒

HumanCytotoxin-associatedprotein,CagAELISAKit 人細(xì)胞毒素相關(guān)蛋白A(CagA)試劑盒 進(jìn)口分裝

Human6-keto-prostaglandinF1a,6-K-PGF1a試劑盒人6同前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)試劑盒

正常大鼠(SpragueDawley)腸組織微粒體組分(5毫克/毫升)500微升

MouseAi-myocardialaibody,AMAELISAKit小鼠抗心肌抗體(AMA)試劑盒

整合素α2β1   英文名稱：   Iegrin α2β1   規(guī)格：      英文縮寫：   Iegrin α2β1

整合素α5β3   英文名稱：   Iegrin α5β3   規(guī)格：      英文縮寫：   Iegrin α5β3

β-整合素   英文名稱：   β-Iegrin   規(guī)格：      英文縮寫：   β-Iegrin

誘導(dǎo)型合酶   英文名稱：   induced niic oxide syhas   規(guī)格：      英文縮寫：   iNOS

大鼠結(jié)腸黏膜上皮原代細(xì)胞植物過氧化物酶(POD)試劑盒

Human ai ribosomal P protein aibody (ARPA/Rib-P) ELISA Kit 人抗核糖體P蛋白抗體(ARPA/Rib-P)試劑盒

PorcineapoproteinA1,apo-A1ELISAKit 豬載脂蛋白A1(apo-A1)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAECA(Mouseai-endothelialcellaibody)ELISAKit小鼠抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體

血液氧化型(GSSG)濃度高效液相色譜定量試劑盒50次

MouseSomalcellderivedfactor1β,SDF-1βELISAKit小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)試劑盒

IL13RA1重組大鼠 IL13RA1 蛋白  Protein

Ghrelin 28 腦腸肽28 0.5mgGhrelin 28 腦腸肽28

FCGR2B重組人 CD32b / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 標(biāo)簽), Biotinylated Protein

AGER Protein Human 重組人 AGER / RAGE 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CXADR Protein Mouse 重組小鼠 CXADR 蛋白 (His 標(biāo)簽)

客戶收到細(xì)胞后,，請按照以下方法進(jìn)行操作。(該細(xì)胞傳代次數(shù)有限約 2 代,，建議客戶收到細(xì)胞后盡快安排后續(xù)實(shí)驗(yàn))

1,、取出細(xì)胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜,，放入 37℃,，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時(shí)，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。

2,、待細(xì)胞達(dá)到 80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

3,、細(xì)胞傳代：

1)吸出細(xì)胞瓶中的培養(yǎng)基,，用 PBS 清洗細(xì)胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中,，37℃消化 3min 左右,；顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,，再加入培養(yǎng)液終止消化,。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL,，放入 37℃ 5% CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細(xì)胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基,。