大鼠冠狀動脈內(nèi)皮原代細胞

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%

大鼠冠狀動脈內(nèi)皮細胞分離自冠狀動脈組織；冠狀動脈是供給心臟血液的動脈,，起于主動脈根部,，分左右兩支，行于心臟表面,。采用Schlesinger等的分類原則,，將冠狀動脈的分布分為三型：右優(yōu)勢型、均衡型,、左優(yōu)勢型,。左右冠狀動脈是升主動脈的第一對分支,。左冠狀動脈為一短干，發(fā)自左主動脈竇,，經(jīng)肺動脈起始部和左心耳之間,，沿冠狀溝向左前方行后，立即分為前室間支和旋支,。前室間支沿前室間溝下行,，旋支繞過心尖切跡至心的膈面與右冠狀動脈的后室間支相吻合。冠狀動脈內(nèi)皮細胞呈單層扁平分布,，是一薄層的專門上皮細胞,，它形成冠狀動脈的內(nèi)壁，是血管管腔內(nèi)血液及其他血管壁（單層鱗狀上皮）的接口,。內(nèi)皮細胞是沿著整個循環(huán)系統(tǒng),，由心臟直至最小的微血管。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠冠狀動脈內(nèi)皮細胞采用混合酶短暫消化后組織貼塊,、結合內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的大鼠冠狀動脈內(nèi)皮細胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　?、?消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞,、淋巴細胞,、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用,。

A498細胞,，人腎癌細胞系 蝙蝠肺細胞,Tb 1 Lu細胞 CL-0430RS1(大鼠皮膚成纖維樣細胞)  Jurkat, Clone E6-1 (人急性T淋巴細胞白血病細胞)     HUM, 正常人主動脈平滑肌細胞 小鼠成纖維細胞， 豬原代氣管上皮細胞 人原代腦血管周細胞

Tn-C(Tenascin-C 0.5mgTn-C(Tenascin-C)C-Terminus 腱糖蛋白-C(固生蛋白)C端抗原

AMBP Protein Human 重組人 AMBP / Alpha 1 microglobulin 蛋白

RSV-F重組人類呼吸道合胞病毒 hRSV (A2) Fusion glycoprotein / RSV-F 蛋白 (His 標簽) Protein

VEGFC Protein Human 重組人 VEGF-C 蛋白 (His 標簽)

RAC1重組人 RAC1 / MIG5 蛋白 (GST 標簽) Protein

小鼠酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA 試劑盒

One set of membrane protein (iNV) ELISA Kit 人套膜蛋白(iNV)試劑盒

Humanglycogensyhasekinase,GSKELISAKit 人糖原合成酶激酶(GSK)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanbonesialoprotein,BSP試劑盒人骨涎蛋白(BSP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物組織胞漿超氧化物歧化酶(Cu/ZnSOD)分離試劑盒50次

HumanStaphylococalproteinA,SPAELISAKit人葡萄球菌蛋白A(SPA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠髓過氧化物酶   英文名稱：   Mouse Myeloperoxidase   規(guī)格：      英文縮寫：   MPO

小鼠巨噬細胞趨化蛋白-1   英文名稱：   monocyte chemotactic protein 1   規(guī)格：      英文縮寫：   MCP-1

小鼠巨噬細胞趨化蛋白-3   英文名稱：   monocyte chemotactic protein 3   規(guī)格：      英文縮寫：   MCP-3

小鼠M-能受體結合力   英文名稱：   M—cholinoceptor binding capacity   規(guī)格：      英文縮寫：   MCBC

大鼠冠狀動脈內(nèi)皮原代細胞豚鼠過氧化脂質/乳過氧化物酶(LPO)試劑盒 ,，英文名： LPO ELISA Kit

Human hepatitis D virus IgM (HDV IgM) ELISA Kit 人丁型肝IgM(HDV IgM)試劑盒

Rabbitglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit 兔子神經(jīng)膠質纖維酸性蛋白(GFAP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforbFGF(Humanbasicfibroblastgrowthfactor)ELISAKit人堿性成纖維細胞生長因子

細菌色酶原位染色試劑盒20次

RabbitIerleukin10,IL-10ELISAKit兔子白介素10(IL-10)試劑盒規(guī)格：96T/48T

ACE2重組食蟹猴 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 Protein

Insulin protein (from porcine pancreas 0.5mgInsulin protein (from porcine pancreas) 豬胰島素

TLK1重組人 TLK1 / PKU-beta 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

IL18 Protein Human 重組人 IL18 / Interleukin 18 / IGIF 蛋白 (GST 標簽)

IL36B Protein Mouse 重組小鼠 IL1F8 / IL36b 蛋白

客戶收到細胞后,，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數(shù)有限約 2 代,，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1,、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜,，放入 37℃,，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時，以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。

2,、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

3,、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基,，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中,，37℃消化 3min 左右,；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液,，再加入培養(yǎng)液終止消化,。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當?shù)谋壤M行接種傳代,，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL,，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。