大鼠骨骼肌原代細胞

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右,；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

大鼠骨骼肌細胞分離自四肢肌肉組織；骨骼肌又稱橫紋肌,，肌肉中的一種,，約占全身重量的40%。骨骼肌纖維為長柱形的多核細胞,，肌膜的外面有基膜緊密貼附,。屬于橫紋肌，橫紋肌還包括心肌與內(nèi)臟橫紋肌,，其中骨骼肌主要分布于四肢,。每塊肌肉都是具有一定形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能的器官,，有豐富的血管,、淋巴分布，在軀體神經(jīng)支配下收縮或舒張,，進行隨意運動,。肌肉可根據(jù)共形狀、大小,、位置,、起止點、纖維方向和作用等命名,。依形態(tài)命名的如斜方肌,、菱形肌、三角肌,、梨狀肌等,。骨骼肌細胞呈纖維狀，不分支,，有明顯橫紋,，核很多，且都位于細胞膜下方,。肌細胞內(nèi)有許多沿細胞長軸平行排列的細絲狀肌原纖維,。每一肌原纖維都有相間排列的明帶（Ⅰ帶）及暗帶（A帶）。明帶染色較淺,，而暗帶染色較深,。暗帶中間有一條較明亮的線稱H線。H線的中部有一M線,。明帶中間,，有一條較暗的線稱為Z線。兩個Z線之間的區(qū)段,，叫做一個肌節(jié),。骨骼肌細胞也稱橫紋肌細胞,，細胞呈纖維狀，不分支,，有明顯橫紋,，核很多，且都位于細胞膜下方,，細胞多呈梭行，具有一定的方向性,。骨骼肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一,，呈梭形,、不規(guī)則形、三角形或扇形,，核卵圓形,、居中；2周后細胞匯合,，多數(shù)細胞伸展呈長梭形,，胞漿豐富，有分枝狀突起,，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,，高低起伏；細胞密度低時,，常交織成網(wǎng)狀,；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細胞生長較快,，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點,。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠骨骼肌細胞采用膠原酶消化法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的大鼠骨骼肌細胞經(jīng)α-Sarcometric actin免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。

　?、?消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞,，如白血病細胞,、淋巴細胞、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

客戶收到細胞后,，請按照以下方法進行操作,。(該細胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1,、取出細胞瓶,，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃,，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時,，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2,、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng),。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基,，用 PBS 清洗細胞一次,。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右,；顯微鏡下觀察,，待細胞回縮變圓后吸棄消化液,，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻,，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代,，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。

4)待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基,。

A-427細胞,，人肺癌細胞 小鼠成纖維細胞,L929細胞 CM-R103大鼠腦靜脈血管平滑肌細胞769-P(人細胞腺癌細胞)     人星形膠質(zhì)細胞 人肺癌細胞，NCI-H1869[H1869]細胞 YAC-1(淋巴瘤細胞)  卵巢顆粒細胞Many 豬原代乳腺成纖維細胞 豬原代肺成纖維細胞

BMP4(bone morphogenetic protein 4 0.5mgBMP4(bone morphogenetic protein 4) 骨形態(tài)發(fā)生蛋白4(抗原)

CFD Protein Human 重組人 Adipsin / Complement Factor D / CFD 蛋白

PRLR重組小鼠 PRLR / Prolactin Receptor 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

CSF2RB Protein Rat 重組大鼠 CD131 / CSF2RB / IL3RB / IL5RB 蛋白 (Fc 標簽)

KIT重組人 KIT / c-KIT / CD117 蛋白 (aa 540-972, His & GST 標簽) Protein

小鼠銅藍蛋白(CP/CER)ELISA 試劑盒

Kappa B subunit p65 factor - nucleus of rat affinity peptide (NF- kappa B p65) ELISA Kit 大鼠核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)試劑盒

Humanserineprotease,PRSSELISAKit 人絲蛋白酶(PRSS)試劑盒 96T/48T 進口分裝

ChickenSolubleIercellularAdhesionMolecule-1,sICAM-1試劑盒雞可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細胞PI-3KINASEP110BETA蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MouseFcoagulationfactorⅨ,FⅨELISAKit小鼠Ⅸ(FⅨ)試劑盒規(guī)格：96T/48T

豬α干擾素試劑盒   豬α干擾素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豬α干擾素試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝）,，產(chǎn)品別名：豬α干擾素試劑盒,、豬α干擾素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

豬白介素10試劑盒   豬白介素10試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豬白介素10試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T,，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：豬白介素10試劑盒,、豬白介素10eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月,。

豬B細胞淋巴瘤因子2試劑盒   豬B細胞淋巴瘤因子2試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豬B細胞淋巴瘤因子2試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T,，來源：試劑盒（進口分裝）,，產(chǎn)品別名：豬B細胞淋巴瘤因子2試劑盒、豬B細胞淋巴瘤因子2eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月,。

豬Bcl-2相關(guān)X蛋白試劑盒   豬Bcl-2相關(guān)X蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豬Bcl-2相關(guān)X蛋白試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝）,，產(chǎn)品別名：豬Bcl-2相關(guān)X蛋白試劑盒,、豬Bcl-2相關(guān)X蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

大鼠骨骼肌原代細胞小鼠糖蛋白130(gp130)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat leinizing hormone releasing hormone (LHRH) ELISA Kit 大鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)試劑盒

HumanCytochromeP450c21/21-hydroxylase,CYP21AELISAKit 人細胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)試劑盒 96T/48T 進口分裝

cit瓜規(guī)格：96T/48T

載玻片細胞鈣ATP酶PMCA蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次

Mouseeosinophilcationicprotein,ECPELISAKit小鼠嗜酸性粒細胞陽離子蛋白(ECP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

FKBP1A重組人 FKBP12 蛋白 Protein

神經(jīng)顆粒素(NRGN)重組蛋白 Recombinant Neurogranin (NRGN)

LPAL2重組人 LPAL2 蛋白 (Fc 標簽) Protein

IL3RA Protein Human 重組人 IL3RA / CD123 蛋白 (His & Fc 標簽)

HA Protein Influenza 重組甲型流感 H1N1 (A/England/195/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白