大鼠鞏膜成纖維原代細(xì)胞公司正在銷售的產(chǎn)品：大鼠原代鞏膜成纖維細(xì)胞 A9(小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞) 小管上皮細(xì)胞 CNE-2 低分化鼻咽癌細(xì)胞 DU 145, 人前列腺癌細(xì)胞 Human 小鼠原代支氣管平滑肌細(xì)胞

大鼠鞏膜成纖維原代細(xì)胞

培養(yǎng)信息：

包被條件 貼壁不包被

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳2-3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2,，5%

 

大鼠鞏膜成纖維細(xì)胞分離自鞏膜組織，鞏膜是眼球壁的主要組成之一,。是眼球纖維膜的后5/6部分,。前方聯(lián)接角膜，后方與視神經(jīng)的鞘膜延續(xù),。鞏膜在視神經(jīng)穿出部附近最厚,，愈前愈薄，在肌腱附著處又復(fù)增厚,。其與角膜交界處,，外面有環(huán)形的角膜溝，深部有鞏膜靜脈竇,。小兒的鞏膜為淺藍(lán)色,，成年為白色，老年因脂肪沉著而帶黃色,。鞏膜結(jié)構(gòu)堅(jiān)韌,，有支持和保護(hù)眼內(nèi)組織的作用。成纖維細(xì)胞是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來,；成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚,，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng)，在一定條件下,，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化,；成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用,。剛分離的成纖維細(xì)胞呈圓形,、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細(xì)胞貼壁,，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起,；6h后細(xì)胞基本貼壁,，伸展成梭形，胞核清晰,，分布較均勻,，散在生長，不聚集成團(tuán),；細(xì)胞生長迅速,，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密,，有的交叉重疊生長,，平坦、胞體較大,，細(xì)胞質(zhì)透明,，細(xì)胞核較大，呈橢圓形,，顏色淡,。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀,；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。

方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠鞏膜成纖維細(xì)胞采用混合膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠鞏膜成纖維細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

　?、?消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

A-375 [A375], 人惡性黑素瘤細(xì)胞株 Human  原代系膜細(xì)胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1ml  人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞;THP-1  人臍帶血單個(gè)核細(xì)胞 人肺成纖維細(xì)胞,，Hs888Lu細(xì)胞 F9(畸胎瘤細(xì)胞) 豬原代腎上腺髓質(zhì)細(xì)胞 兔原代胸腺基質(zhì)細(xì)胞

LOX-1/OLR1 凝集素樣氧化型低密度脂蛋白受體 0.5mgLOX-1/OLR1 凝集素樣氧化型低密度脂蛋白受體

AARSD1 Protein Human 重組人 AARSD1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

REG1B重組食蟹猴 REG1B / PSPS2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

KLK11 Protein Mouse 重組小鼠 KLK11 / Kallikrein-11 蛋白 (His 標(biāo)簽)

KLK8重組人 KLK-8 / Kallikrein-8 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

小鼠脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISA 試劑盒

Rat anaphylatoxin / compleme fragme 4a (C4a) ELISA Kit 大鼠過敏毒素/補(bǔ)體片斷4a(C4a)試劑盒

HumanactivatedproteinC,APCELISAKit 人活化蛋白C(APC)試劑盒 進(jìn)口分裝

Chickenniicoxide,NO試劑盒雞(NO)試劑盒

載玻片細(xì)胞P35蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MouseFollistatin,FSELISAKit小鼠卵泡抑素(FS)試劑盒

小鼠脫酶(ID)試劑盒   96T/48T

小鼠褪黑素(MT/MLT)試劑盒   96T/48T

小鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白(HABP)試劑盒   96T/48T

小鼠透明質(zhì)酸(HA)試劑盒   96T/48T

大鼠鞏膜成纖維原代細(xì)胞豬單核細(xì)胞增多性李斯特菌素(listeriolysin)ELISA 試劑盒

Human macrophage colony stimulating factor receptor (M-CSFR) ELISA Kit 人巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體(M-CSFR)試劑盒

PorcinevonWillebrandFactor,vWFELISAKit 豬血管性血友病因子/瑞斯托輔因子(VWF)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAlpha1-AT(HumanAlpha1-Aiypsin)ELISAKit人α1抗

血液0酸二酯酶1(PDE1)活性熒光定量試劑盒10次

Mouseβ-Defensins,β-DFELISAKit小鼠β-防御素(β-DF)試劑盒

IL18R1重組小鼠 IL-18R1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

C-fos(i mmediate early gene, ieg 0.5mgC-fos(i mmediate early gene, ieg) 即刻早期基因(是一種原癌基因)抗原

CSF2重組人 GM-CSF / CSF2 蛋白 Protein

IL36B Protein Human 重組人 IL36B / IL1F8 蛋白

FSTL3 Protein Mouse 重組小鼠 FLRG / Fstl3 蛋白

客戶收到細(xì)胞后，請按照以下方法進(jìn)行操作,。(該細(xì)胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細(xì)胞后盡快安排后續(xù)實(shí)驗(yàn))

1,、取出細(xì)胞瓶,，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃,，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時(shí),，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。

2,、待細(xì)胞達(dá)到 80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

3,、細(xì)胞傳代：

1)吸出細(xì)胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細(xì)胞一次,。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中,，37℃消化 3min 左右,；顯微鏡下觀察,，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化,。

3)用吸管輕輕吹打混勻,，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL,，放入 37℃ 5% CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。

4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基,。