背景資料:ZNF672 is a 452 amino acid nuclear protein that may be involved in transcriptional regulation. Belonging to the Krüppel C2H2-type zinc-finger protein family, ZNF672 contains 14 C2H2-type zinc fingers. ZNF672 ts as two alternatively spliced isoforms, and is encoded by a e that maps to human chromosome 1q44. Human chromosome 1 spans 260 million base pairs, contains over 3,000 es, comprises nearly 8% of the human ome, and houses a large number of disease-associated es, including those that are involved in familial adenomatous polyposis, Stickler syndrome, Parkinson’s disease, Gaucher disease, schizophrenia and Usher syndrome.
產品名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
ZNF672抗體 | 50ul 100ul 200ul | Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. |
產品分類:抗體 / 一抗
英文名稱:ZNF672
中文名稱 鋅指蛋白672抗體
英文別名 FLJ22301; Zinc finger protein 672; ZN672_HUMAN; Znf672.
交叉反應:Human, Mouse, Rat, Pig, Rabbit
標記: Unconjugated
抗體來源: Rabbit
抗體類型: Polyclonal
免疫原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ZNF672
蛋白細胞定位: 細胞核
純化方法: affinity purified by Protein A
亞型 IgG
性狀: Liquid
濃度: 1mg/ml
儲存液: 0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件: Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one


抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏佐劑和弗氏不佐劑
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實驗活體,。
3,、進行動物免疫實驗。
4,、試取血樣進行測試,,查看免疫效果。
5,、如果免疫成功,,殺死實驗活體,采集全部血清,。
6,、純化出抗體。
7,、鑒定抗體,。
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抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,特異性強,,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
標記法:
直接標記法 | 間接標記法 |
抗體的準備:取提純的Ig溶液測定蛋白質含量,,置于三角燒瓶中加入生理鹽水和0.5mol/L pH9.5碳酸鹽緩沖液,,冰槽中攪拌5~10min,; 熒光素的準備:按每毫克蛋白質加0.01~0.02mg的FITC計算,準確稱取后加入抗體溶液中,; 標記:邊攪拌邊加入熒光素,,避免粉末黏附于壁上,置于4℃冰箱或冰庫繼續(xù)攪拌12~18h,; 透析:結合完畢后,,先將結合物以3000r/min離心20min,除去少量沉淀物后裝入透析袋中再置于pH8.0緩沖鹽的燒杯中透析過夜,; 過柱:取透析過夜的標記物,,過葡聚糖凝膠G-25或G-50柱,分離游 | 抗體的準備:0~4℃下,,用0.01mol/L pH8.0 PBS將待標記的抗體蛋白溶液稀釋到濃度為30~40mg/ml,,置于三角燒瓶內放入冰槽中; 熒光素的準備:按每毫克蛋白質加入0.01mg的熒光素稱取,,溶解于等量的3%重碳酸鈉水溶液中,;將抗體蛋白溶液與FITC溶液等量混合,在0~4℃中攪拌18~24h,,充分攪勻,; 透析或過柱層析。 |
實驗步驟:
① 滴加0.01mol/L,,pH7.4的PBS于待檢標本片上,,10min后棄去,使標本保持一定濕度,。
② 滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,,使其覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內,,保溫一定時間(參考:30min),。
③ 取出玻片,置玻片架上,,先用0.01mol/L,,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,,pH7.4的PBS三缸浸泡,,每缸3-5 min,不時振蕩,。
④ 取出玻片,,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,,以蓋玻片覆蓋,。
⑤ 立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度,,一般可用“+"表示:
(-)無熒光,;(±)極弱的可疑熒光;(+)熒光較弱,,但清楚可見,;(++)熒光明亮;(+++ --++++)熒光閃亮,。待檢標本特異性熒光染色強度達“++"以上,而各種對照顯示為(±)或(-),,即可判定為陽性,。
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