詳細介紹
背景資料:具有酰基轉移酶活性。具有乙酰轉移酶活性,。活性不依賴于鈣。
產品名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
LPCAT1抗體 | 50ul 100ul 200ul | Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. |
產品分類:抗體 / 一抗
英文名稱:LPCAT1
英文別名 PCAT1_HUMAN; Lysophosphatidylcholine acyltransferase 1; AYTL2; PFAAP3; EC:2.3.1.23; LPC acyltransferase 1; LPCAT-1; LysoPC acyltransferase 1; 1-acylglycerol-3-phosphate O-acyltransferase. EC:2.3.1.51; 1-acylglycerophosphocholine O-acyltransferase; 1-alkenylglycerophosphocholine O-acyltransferase. EC:2.3.1.25; 1-alkylglycerophosphocholine O-acetyltransferase. EC:2.3.1.67; Acetyl-CoA:lyso-platelet-activating factor acetyltransferase (Acetyl-CoA:lyso-PAF acetyltransferase; Lyso-PAF acetyltransferase; LysoPAFAT);
交叉反應:Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian
標記: Unconjugated
抗體來源: Rabbit
抗體類型: Monoclonal
克隆號: B4H4
蛋白細胞定位: 細胞漿,細胞膜
純化方法: affinity purified by Protein A
性狀: Liquid
濃度: 1mg/ml
儲存液: 0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件: Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏佐劑和弗氏不佐劑
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實驗活體。
3,、進行動物免疫實驗,。
4、試取血樣進行測試,,查看免疫效果,。
5、如果免疫成功,,殺死實驗活體,,采集全部血清。
6,、純化出抗體,。
7,、鑒定抗體。
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抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,家兔,、豚鼠,、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,,特異性強,,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質量,、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑,。
標記法:
直接標記法 | 間接標記法 |
抗體的準備:取提純的Ig溶液測定蛋白質含量,,置于三角燒瓶中加入生理鹽水和0.5mol/L pH9.5碳酸鹽緩沖液,,冰槽中攪拌5~10min; | 抗體的準備:0~4℃下,,用0.01mol/L pH8.0 PBS將待標記的抗體蛋白溶液稀釋到濃度為30~40mg/ml,置于三角燒瓶內放入冰槽中,; |
實驗步驟:
① 滴加0.01mol/L,,pH7.4的PBS于待檢標本片上,10min后棄去,,使標本保持一定濕度,。
② 滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,,使其覆蓋標本,,置于有蓋搪瓷盒內,保溫一定時間(參考:30min),。
③ 取出玻片,,置玻片架上,先用0.01mol/L,,pH7.4的PBS沖洗后,,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,,每缸3-5 min,,不時振蕩。
④ 取出玻片,,用濾紙吸去多余水分,,但不使標本干燥,,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋,。
⑤ 立即用熒光顯微鏡觀察,。觀察標本的特異性熒光強度,一般可用“+"表示:
(-)無熒光,;(±)極弱的可疑熒光,;(+)熒光較弱,但清楚可見,;(++)熒光明亮,;(+++ --++++)熒光閃亮。待檢標本特異性熒光染色強度達“++"以上,,而各種對照顯示為(±)或(-),,即可判定為陽性。
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