背景資料:卵黃蛋白原(VTG)是檢測外源性化合物雌激素效應(yīng)的敏感分子生物標志物,,作為生物標志物可以很好地評價環(huán)境水體中污染物雌激素效應(yīng)。 卵黃蛋白原(Vitelloin,,VTG)是由卵生脊椎動物肝細胞合成的一種復(fù)雜大分子蛋白,,是由雌激素誘導(dǎo)在肝臟中表達的脂蛋白—卵黃蛋白的前體。成熟雌魚在體內(nèi)雌激素17β-雌二醇的刺激下由肝臟合成,,經(jīng)過血液運輸?shù)竭_卵巢并加工成卵黃蛋白,。雄魚在正常情況下不合成這種蛋白,但受到雌激素(內(nèi)源或外源)刺激也可合成這種蛋白,,由于沒有卵巢有效地清除VTG,,雄魚血液中VTG
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
VTG抗體 | 50ul 100ul 200ul | Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. |
產(chǎn)品分類:抗體 / 一抗
英文名稱:VTG
中文名稱 魚、青鳉魚卵黃蛋白原抗體
英文別名 vitelloin.
標記: Unconjugated
抗體來源: Rabbit
抗體類型: Polyclonal
免疫原 VTG protein
純化方法: Affinity purified by Protein A
亞型 IgG
性狀: Liquid
濃度: 1mg/ml
儲存液: 0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件: Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
研究領(lǐng)域: 細胞生物 免疫學(xué)
濃度:會升高,。因此,,通過檢測VTG含


抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏佐劑和弗氏不佐劑
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體,。
3,、進行動物免疫實驗。
4,、試取血樣進行測試,,查看免疫效果。
5,、如果免疫成功,,殺死實驗活體,采集全部血清,。
6、純化出抗體,。
7,、鑒定抗體,。
相關(guān)產(chǎn)品:
CD4抗體
磷酸化心肌肌鈣蛋白抗體
細胞角蛋白12抗體
睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子抗體
內(nèi)毒素受體抗體
抗體的制備過程:
1.免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2.免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3.免疫血清的收集:一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4.免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,特異性強,,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5.免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
標記法:
直接標記法 | 間接標記法 |
抗體的準備:取提純的Ig溶液測定蛋白質(zhì)含量,,置于三角燒瓶中加入生理鹽水和0.5mol/L pH9.5碳酸鹽緩沖液,,冰槽中攪拌5~10min,;
熒光素的準備:按每毫克蛋白質(zhì)加0.01~0.02mg的FITC計算,準確稱取后加入抗體溶液中,;
標記:邊攪拌邊加入熒光素,,避免粉末黏附于壁上,置于4℃冰箱或冰庫繼續(xù)攪拌12~18h,;
透析:結(jié)合完畢后,,先將結(jié)合物以3000r/min離心20min,除去少量沉淀物后裝入透析袋中再置于pH8.0緩沖鹽的燒杯中透析過夜,;
過柱:取透析過夜的標記物,,過葡聚糖凝膠G-25或G-50柱,分離游
| 抗體的準備:0~4℃下,,用0.01mol/L pH8.0 PBS將待標記的抗體蛋白溶液稀釋到濃度為30~40mg/ml,,置于三角燒瓶內(nèi)放入冰槽中;
熒光素的準備:按每毫克蛋白質(zhì)加入0.01mg的熒光素稱取,,溶解于等量的3%重碳酸鈉水溶液中,;將抗體蛋白溶液與FITC溶液等量混合,在0~4℃中攪拌18~24h,,充分攪勻,;
透析或過柱層析。
|
實驗步驟:
① 滴加0.01mol/L,,pH7.4的PBS于待檢標本片上,,10min后棄去,使標本保持一定濕度,。
② 滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,,使其覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),,保溫一定時間(參考:30min),。
③ 取出玻片,置玻片架上,,先用0.01mol/L,,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,,pH7.4的PBS三缸浸泡,,每缸3-5 min,不時振蕩,。
④ 取出玻片,,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,,以蓋玻片覆蓋,。
⑤ 立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度,,一般可用“+"表示:
(-)無熒光;(±)極弱的可疑熒光,;(+)熒光較弱,,但清楚可見;(++)熒光明亮,;(+++ --++++)熒光閃亮,。待檢標本特異性熒光染色強度達“++"以上,而各種對照顯示為(±)或(-),,即可判定為陽性,。
小鼠水通道蛋白2(AQP-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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熒光素標記腺苷酸環(huán)化酶激活肽受體-I/血管活性腸肽-I抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-pig IgG/Biotin 化兔抗豬IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.3ml
脫羧酶蛋白體36抗體 Anti-CXorf36 0.2ml
Rabbit anti-MG IgG/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗長爪沙鼠IgG 0.1ml
FXYD7 英文名稱: FXYD離子轉(zhuǎn)運調(diào)節(jié)因子7抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-VEGF receptor 2(Tyr1214) 0酸化血管內(nèi)皮生長因子受體2抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-pig IgG/Biotin 化兔抗豬IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.3ml
VTG抗體病毒性出血性敗血癥病毒PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Viral Hemorrhagic Septicemia Virus(VHSV)RTPCR
丙酸蛛網(wǎng)菌PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Arachnia propionicaPCR
變形絲囊霉菌PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Aphanomyces astaciPCR
鼻血吸蟲PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Schistosoma nasalePCR
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,是用于化學(xué)反應(yīng),、分析化驗,、研究實驗、教學(xué)實驗,、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,,價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),,售后完善,。