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轉(zhuǎn)基因水稻TT51-1(BT63)基因核酸檢測試劑盒

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更新時(shí)間:2023-03-16 08:37:49瀏覽次數(shù):277

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
應(yīng)用領(lǐng)域 化工 主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn)
轉(zhuǎn)基因水稻TT51-1(BT63)基因核酸檢測試劑盒公司正在銷售的產(chǎn)品:小鼠血小板因子4(PF4)PCR檢測試劑盒 ,英文名: PF4
兔子γ干擾素(IFN-γ)ELISA檢測試劑盒rabbitIerferonγ,IFN-γELISAKit 50T
犬半胱抑制劑/胱抑素C(Cys-C)免疫試劑盒 Canine Cystatin C,Cys-C
英文名稱HumanPlaceaGrowthFact

詳細(xì)介紹

實(shí)時(shí)熒光定量PCR
實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點(diǎn)檢測的局限,,實(shí)現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強(qiáng)度,并記錄在電腦軟件之中,通過對每個(gè)樣品Ct值的計(jì)算,,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得定量結(jié)果。因此,,實(shí)時(shí)熒光定量PCR無需內(nèi)標(biāo)是建立在兩個(gè)基礎(chǔ)之上的:
1
Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達(dá)Ct值所在的循環(huán)數(shù)時(shí),,剛剛進(jìn)入真正的指數(shù)擴(kuò)增期(對數(shù)期),此時(shí)微小誤差尚未放大,,因此Ct值的重現(xiàn)性,,即同一模板不同時(shí)間擴(kuò)增或同一時(shí)間不同管內(nèi)擴(kuò)增,得到的Ct值是恒定的,。
2
Ct值與起始模板的線性關(guān)系由于Ct值與起始模板的對數(shù)存在線性關(guān)系,,可利用標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知樣品進(jìn)行定量測定,因此,,實(shí)時(shí)熒光定量PCR是一種采用外標(biāo)準(zhǔn)曲線定量的方法,。
外標(biāo)準(zhǔn)曲線的定量方法相比內(nèi)標(biāo)法是一種準(zhǔn)確的、值得信賴的科學(xué)方法,。利用外標(biāo)準(zhǔn)曲線的實(shí)時(shí)熒光定量PCR是迄今為止定量最準(zhǔn)確,,重現(xiàn)性定量方法,已得到,,廣泛用于基因表達(dá)研究,、轉(zhuǎn)基因研究,藥物療效考核,、病原體檢測等諸多領(lǐng)域,。

5.png


操作流程
收集基因信息——>設(shè)計(jì)引物——>PCR ——>回收目的片段——>與載體連接,取得連接產(chǎn)物 ——> 用感受態(tài)細(xì)胞做轉(zhuǎn)化 ——>接菌——>陽性克隆(酶切法或PCR)——>質(zhì)粒抽提——>質(zhì)粒測序——>測序結(jié)果分析——>克隆信息輸入數(shù)據(jù)庫——>質(zhì)粒實(shí)物保存,。

產(chǎn)品名稱

分類

規(guī)格

轉(zhuǎn)基因水稻TT51-1(BT63)基因核酸檢測試劑盒

PCR檢測試劑盒

50T

下列相關(guān)產(chǎn)品:
小鼠天冬酸轉(zhuǎn)酶2(AST2)PCR檢測試劑盒 ,英文名: AST2

豚鼠內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISA檢測試劑盒GuineaPigEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit 50T

??耿髲?fù)合物(TAT-III)免疫試劑盒 Bovine Thrombin-aithrombin III Complex,TAT-III

英文名稱HumanMyoglobinELISAKit人肌紅蛋白(MYO)ELISAKit

動(dòng)物軟骨組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒10

RatProtein

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl     dNTP mix
2mM
4 μl    
引物110pM
2 μl    
引物210pM
2 μl     Taq
酶 (2U/μl
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl
1 μl      
ddH2O 50 μl
PCR儀有無熱蓋,,不加或添加石蠟油,。
2
:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93
預(yù)變性3-5min,,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,,循環(huán)30-35次,在727min,。
3
:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4
待電泳檢測或-20長期保存。
4
PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油,;否則,,直接取5-10μl電泳檢測。

定量PCR方法:
a,、競爭法  產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個(gè)新內(nèi)切位點(diǎn)的外源競爭性模板,。在同一反應(yīng)管中,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時(shí)擴(kuò)增(其中一個(gè)引物為熒光標(biāo)記),。擴(kuò)增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,,競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個(gè)片段,而待測模板不被酶切,,可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開,,分別測定熒光強(qiáng)度,根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù),。
b
,、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標(biāo)和引物,內(nèi)標(biāo)用基因工程方法合成,。上游引物用熒光標(biāo)記,,下游引物不標(biāo)記。在模板擴(kuò)增的同時(shí),,內(nèi)標(biāo)也被擴(kuò)增,。在PCR產(chǎn)物中,,由于內(nèi)標(biāo)與靶模板的長度不同,二者的擴(kuò)增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來,,分別測定其熒光強(qiáng)度,,以內(nèi)標(biāo)為對照定量待檢測模板。
c
,、PCRELISA
利用di高辛等標(biāo)記引物,,擴(kuò)增產(chǎn)物被固相板上特異的探針?biāo)Y(jié)合,再加入抗di高辛酶標(biāo)抗體-辣根過氧化物酶結(jié)合物,,最終酶使底物顯色,。常規(guī)的PCRELISA法只是定性實(shí)驗(yàn),若加入內(nèi)標(biāo),,作出標(biāo)準(zhǔn)曲線,,也可實(shí)現(xiàn)定量檢測目的。

操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,,剩余板條用自封袋密封放回4,。
2.
設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,;
3.
樣本孔中加入待測樣本50μL,;空白孔不加。
4.
除空白孔外,,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,,用封板膜封住反應(yīng)孔,37
水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
5.
棄去液體,,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),,靜置1min,,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板),。
6.
每孔加入底物AB50μL,,37
避光孵育15min,。
7.
每孔加入終止液50μL15min內(nèi),,在450nm波長處測定各孔的OD值,。

下列是公司正在銷售的產(chǎn)品:
人腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)化酶(TACE/ADAM17)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human ue insulin (TI) ELISA Kit 人真胰島素(TI)ELISA試劑盒

HumanHeatShockProtein20,HSP-20ELISAKit 人熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanhiston-H2bELISA試劑盒人組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織環(huán)氧化酶(CYCLOOXYGENASE-2)活性比色法定量檢測試劑盒20

HumanlowdensitylipoproteinLDLELISAKit人低密度脂蛋白(LDL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

小鼠抗抗體(AsAb)ELISA試劑盒 ,,英文名: AsAb ELISA Kit

大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHC/AgB/H-1)ELISA檢測試劑盒Ratmajorhistocompatibilitycomplex,MHC/AgB/H-1ELISAKit 96T/48T

人單核細(xì)胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)免疫試劑盒 Human MCP-3 ELISA kit

Ratprogesteronereceptor,PGRELISAKit大鼠孕同受體(PGR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

HA(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微升

MouseansformingGrowthfactorβ1,TGF-β1ELISA試劑盒小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
轉(zhuǎn)基因水稻TT51-1(BT63)基因核酸檢測試劑盒Anti-phospho-p38 ERK/MAPK14 (pThr180/pTyr182) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人,、大,、小鼠、兔,、馬,、犬、豬,、0酸化原活化蛋白p38抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Goat Anti-human IgA/Biotin 化羊抗人IgAMulti-class antibodies規(guī)格: 0.3ml

C型尿肽抗體 Anti-CNP/CNPase 0.1ml

Rabbit Anti-mouse IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗小鼠IgG 0.1ml

Phospho-FADD (Ser191) 英文名稱: 0酸化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh PIK3C3/PI3 kinase type 3 0脂酰肌醇3催化亞單位3抗體 規(guī)格 0.1ml

Goat Anti-human IgA/Biotin 化羊抗人IgAMulti-class antibodies規(guī)格: 0.3ml


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