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兔源性成分(Rabbit)核酸檢測(cè)試劑盒

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更新時(shí)間:2023-03-15 10:34:05瀏覽次數(shù):235

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
應(yīng)用領(lǐng)域 化工 主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn)
兔源性成分(Rabbit)核酸檢測(cè)試劑盒公司正在銷售的產(chǎn)品:小鼠氧化型低密度脂蛋白(OxLDL)PCR檢測(cè)試劑盒 ,英文名: OxLDL
小鼠高敏狀腺原(u-T3)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseUlasensitivityi-iodothyronine,u-T3ELISAKit 50T
人己糖(HK)免疫試劑盒 Human Hexokinase,HK
RatBonemorphogeneticp

詳細(xì)介紹

實(shí)時(shí)熒光定量PCR
實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點(diǎn)檢測(cè)的局限,,實(shí)現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測(cè)一次熒光信號(hào)的強(qiáng)度,,并記錄在電腦軟件之中,通過對(duì)每個(gè)樣品Ct值的計(jì)算,,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得定量結(jié)果,。因此,實(shí)時(shí)熒光定量PCR無需內(nèi)標(biāo)是建立在兩個(gè)基礎(chǔ)之上的:
1
Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達(dá)Ct值所在的循環(huán)數(shù)時(shí),,剛剛進(jìn)入真正的指數(shù)擴(kuò)增期(對(duì)數(shù)期),,此時(shí)微小誤差尚未放大,因此Ct值的重現(xiàn)性,,即同一模板不同時(shí)間擴(kuò)增或同一時(shí)間不同管內(nèi)擴(kuò)增,,得到的Ct值是恒定的。
2
Ct值與起始模板的線性關(guān)系由于Ct值與起始模板的對(duì)數(shù)存在線性關(guān)系,,可利用標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知樣品進(jìn)行定量測(cè)定,,因此,實(shí)時(shí)熒光定量PCR是一種采用外標(biāo)準(zhǔn)曲線定量的方法,。
外標(biāo)準(zhǔn)曲線的定量方法相比內(nèi)標(biāo)法是一種準(zhǔn)確的,、值得信賴的科學(xué)方法,。利用外標(biāo)準(zhǔn)曲線的實(shí)時(shí)熒光定量PCR是迄今為止定量最準(zhǔn)確,,重現(xiàn)性定量方法,已得到,廣泛用于基因表達(dá)研究,、轉(zhuǎn)基因研究,,藥物療效考核、病原體檢測(cè)等諸多領(lǐng)域,。

5.png


操作流程
收集基因信息——>設(shè)計(jì)引物——>PCR ——>回收目的片段——>與載體連接,取得連接產(chǎn)物 ——> 用感受態(tài)細(xì)胞做轉(zhuǎn)化 ——>接菌——>陽性克隆(酶切法或PCR)——>質(zhì)粒抽提——>質(zhì)粒測(cè)序——>測(cè)序結(jié)果分析——>克隆信息輸入數(shù)據(jù)庫——>質(zhì)粒實(shí)物保存,。

產(chǎn)品名稱

分類

規(guī)格

兔源性成分(Rabbit)核酸檢測(cè)試劑盒

PCR檢測(cè)試劑盒

50T

下列相關(guān)產(chǎn)品:
小鼠同種異體移植炎癥因子1(AIF1)PCR檢測(cè)試劑盒 ,英文名: AIF1

兔子催乳素(PRL)ELISA檢測(cè)試劑盒Rabbitprolactin,PRLELISAKit 50T

牛前列腺素F2α(PGF2α)免疫試劑盒 Bovine Prostaglandin F2α,PGF2α

英文名稱HumanMaixmetalloproteinase-3MMP-3ELISAkit人基質(zhì)金屬3(MMP-3)ELISAkit

動(dòng)物前列腺組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒10

RatProstaglandinE2,PG-

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。
10×PCR buffer
5 μl     dNTP mix
2mM
4 μl    
引物110pM
2 μl    
引物210pM
2 μl     Taq
酶 (2U/μl
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl
1 μl      
ddH2O 50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油,。
2
:調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴(kuò)增,。一般:在93
預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,,循環(huán)30-35次,,在727min
3
:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4
待電泳檢測(cè)或-20長(zhǎng)期保存,。
4
PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油,;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè),。

定量PCR方法:
a,、競(jìng)爭(zhēng)法  產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個(gè)新內(nèi)切位點(diǎn)的外源競(jìng)爭(zhēng)性模板。在同一反應(yīng)管中,,待測(cè)樣品與競(jìng)爭(zhēng)模板用同一對(duì)引物同時(shí)擴(kuò)增(其中一個(gè)引物為熒光標(biāo)記),。擴(kuò)增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,競(jìng)爭(zhēng)性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個(gè)片段,,而待測(cè)模板不被酶切,,可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開,分別測(cè)定熒光強(qiáng)度,,根據(jù)已知模板推測(cè)未知模板的起始拷貝數(shù),。
b
、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標(biāo)和引物,,內(nèi)標(biāo)用基因工程方法合成,。上游引物用熒光標(biāo)記,,下游引物不標(biāo)記。在模板擴(kuò)增的同時(shí),,內(nèi)標(biāo)也被擴(kuò)增,。在PCR產(chǎn)物中,由于內(nèi)標(biāo)與靶模板的長(zhǎng)度不同,,二者的擴(kuò)增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來,,分別測(cè)定其熒光強(qiáng)度,以內(nèi)標(biāo)為對(duì)照定量待檢測(cè)模板,。
c
,、PCRELISA
利用di高辛等標(biāo)記引物,擴(kuò)增產(chǎn)物被固相板上特異的探針?biāo)Y(jié)合,,再加入抗di高辛酶標(biāo)抗體-辣根過氧化物酶結(jié)合物,,最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCRELISA法只是定性實(shí)驗(yàn),,若加入內(nèi)標(biāo),,作出標(biāo)準(zhǔn)曲線,也可實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)目的,。

操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,,剩余板條用自封袋密封放回4
2.
設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,;
3.
樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加,。
4.
除空白孔外,,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,,37
水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
5.
棄去液體,吸水紙上拍干,,每孔加滿洗滌液(350μL),,靜置1min,甩去洗滌液,,吸水紙上拍干,,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6.
每孔加入底物A,、B50μL,,37
避光孵育15min
7.
每孔加入終止液50μL,,15min內(nèi),,在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值,。

下列是公司正在銷售的產(chǎn)品:
人孕酮受體(PGR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human tumor vascular endothelial growth factor (TAF) ELISA Kit 人腫瘤血管生長(zhǎng)因子(TAF)ELISA試劑盒

HumanBH3ieractingdomaindeathagonist,BidELISAKit BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humaninsulin-likegrowthfactors2,IGF-2ELISA試劑盒人胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織己糖(HEXOKINASE)酶偶聯(lián)反應(yīng)比色法定量檢測(cè)試劑盒20

HumanLDL-ICELISAKit人低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

小鼠抗酸性0酸酶5b(ACP5b)ELISA試劑盒 ,英文名: ACP5b ELISA Kit

大鼠抗Ⅲ抗體(AT-)ELISA檢測(cè)試劑盒RatAi-Thrombin,AT-ELISAKit 96T/48T

人單絲蛋白1(LIMK1)免疫試劑盒 Human LIMK1 ELISA Kit

RatprocollagenN-terminalpeptide,PNPELISAKit大鼠Ⅰ型前膠原N端前肽(PNP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

H4-K4100微克

Mouseansferrieceptor,TFRELISA試劑盒小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔源性成分(Rabbit)核酸檢測(cè)試劑盒Anti-Parvalbumin/FITC 熒光素標(biāo)記微白蛋白/細(xì)小清蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Goat Anti-human IgM/FITC 熒光素標(biāo)記羊抗人IgMMulti-class antibodies規(guī)格: 0.3ml

人巨細(xì)胞病毒UL23抗體 anti-HCMV UL23/HHV5 UL23 0.1ml

Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc 0.1ml

Fibrinogen beta chain 英文名稱: 纖維蛋白原β鏈抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Tuberin/TSC2 (Tyhr927) 0酸化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體 規(guī)格 0.1ml

Goat Anti-human IgM/FITC 熒光素標(biāo)記羊抗人IgMMulti-class antibodies規(guī)格: 0.3ml


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