鉤端螺旋體(Lep)核酸檢測試劑盒公司正在銷售的產(chǎn)品：小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP2)PCR檢測試劑盒 ,，英文名： IGFBP2
兔子白介素10(IL-10)ELISA檢測試劑盒RabbitIerleukin10,IL-10ELISAKit 50T
犬甘油-3-0酸脫氫酶(GAPDH)免疫試劑盒 Dog Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenas

操作流程
收集基因信息——>設(shè)計(jì)引物——>PCR ——>回收目的片段——>與載體連接,取得連接產(chǎn)物 ——> 用感受態(tài)細(xì)胞做轉(zhuǎn)化 ——>接菌——>陽性克隆(酶切法或PCR)——>質(zhì)粒抽提——>質(zhì)粒測序——>測序結(jié)果分析——>克隆信息輸入數(shù)據(jù)庫——>質(zhì)粒實(shí)物保存,。

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。
10×PCR buffer
5 μl     dNTP mix （2mM）
4 μl     引物1（10pM）
2 μl     引物2（10pM）
2 μl     Taq酶 （2U/μl）
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl      加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,，立即置PCR儀上,，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min,，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min,。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油,，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,，以除去石蠟油；否則,，直接取5-10μl電泳檢測,。
下列相關(guān)產(chǎn)品：
小鼠網(wǎng)膜素(omein)PCR檢測試劑盒 50T

Rat caspase 3 (Casp-3)  大鼠胱天3(Casp-3)PCR檢測試劑盒

HumanCCAAT/enhancerbindingproteinepsilon,C/EBPεELISAKit 人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白ε(C/EBPε)PCR檢測試劑盒 50T 進(jìn)口分裝

ChickenMyoglobin,MYO/MBPCR檢測試劑盒雞肌紅蛋白(MYO/MB)PCR檢測試劑盒

載玻片細(xì)胞P16蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次

Mouse
實(shí)時(shí)熒光定量PCR：
實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點(diǎn)檢測的局限，實(shí)現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號(hào)的強(qiáng)度,，并記錄在電腦軟件之中,，通過對(duì)每個(gè)樣品Ct值的計(jì)算，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得定量結(jié)果,。因此,，實(shí)時(shí)熒光定量PCR無需內(nèi)標(biāo)是建立在兩個(gè)基礎(chǔ)之上的：
1）Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達(dá)Ct值所在的循環(huán)數(shù)時(shí)，剛剛進(jìn)入真正的指數(shù)擴(kuò)增期（對(duì)數(shù)期）,，此時(shí)微小誤差尚未放大,，因此Ct值的重現(xiàn)性，即同一模板不同時(shí)間擴(kuò)增或同一時(shí)間不同管內(nèi)擴(kuò)增,，得到的Ct值是恒定的,。
2）Ct值與起始模板的線性關(guān)系由于Ct值與起始模板的對(duì)數(shù)存在線性關(guān)系，可利用標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知樣品進(jìn)行定量測定,，因此,，實(shí)時(shí)熒光定量PCR是一種采用外標(biāo)準(zhǔn)曲線定量的方法。
外標(biāo)準(zhǔn)曲線的定量方法相比內(nèi)標(biāo)法是一種準(zhǔn)確的,、值得信賴的科學(xué)方法,。利用外標(biāo)準(zhǔn)曲線的實(shí)時(shí)熒光定量PCR是迄今為止定量最準(zhǔn)確，重現(xiàn)性定量方法,，已得到，廣泛用于基因表達(dá)研究,、轉(zhuǎn)基因研究,，藥物療效考核、病原體檢測等諸多領(lǐng)域,。
定量PCR方法：
a,、競爭法
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個(gè)新內(nèi)切位點(diǎn)的外源競爭性模板。在同一反應(yīng)管中，待測樣品與競爭模板用同一對(duì)引物同時(shí)擴(kuò)增（其中一個(gè)引物為熒光標(biāo)記）,。擴(kuò)增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,，競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個(gè)片段，而待測模板不被酶切,，可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開,，分別測定熒光強(qiáng)度，根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù),。
b,、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標(biāo)和引物，內(nèi)標(biāo)用基因工程方法合成,。上游引物用熒光標(biāo)記,，下游引物不標(biāo)記。在模板擴(kuò)增的同時(shí),，內(nèi)標(biāo)也被擴(kuò)增,。在PCR產(chǎn)物中，由于內(nèi)標(biāo)與靶模板的長度不同,，二者的擴(kuò)增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來,，分別測定其熒光強(qiáng)度，以內(nèi)標(biāo)為對(duì)照定量待檢測模板,。
c,、PCR－ELISA法
利用di高辛等標(biāo)記引物，擴(kuò)增產(chǎn)物被固相板上特異的探針?biāo)Y(jié)合,，再加入抗di高辛酶標(biāo)抗體－辣根過氧化物酶結(jié)合物,，最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCR－ELISA法只是定性實(shí)驗(yàn),，若加入內(nèi)標(biāo),，作出標(biāo)準(zhǔn)曲線，也可實(shí)現(xiàn)定量檢測目的,。
下列是公司正在銷售的產(chǎn)品：
小鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human vitamin B6 (VB6) ELISA Kit 人B6(VB6)ELISA試劑盒

HumanCollagenaseTypeIIELISAKit 人膠原酶II(CollagenaseII)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanc-fosELISA試劑盒人c-fosELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

轉(zhuǎn)基因玉米MON863品系基因定量檢測試劑盒20次

Humanserine/threonineproteinkinase,STKELISAKit人絲/蛋酸酶(STK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠可溶性半乳糖凝集素3結(jié)合蛋白(LGALS3BP)ELISA試劑盒 ,，英文名： LGALS3BP ELISA Kit

人可溶性腺苷酸環(huán)化酶(sAC)ELISA檢測試劑盒HumanSolubleAdenylateCyclase,sACELISAKit 96T/48T

大鼠血栓素A2(TXA2)免疫試劑盒 Rat Thromboxane A2,TXA2 ELISA Kit

英文名稱RatGCP-2ELISAKit大鼠中性粒細(xì)胞趨化蛋白-2(GCP-2)規(guī)格：96T/48T

肝素血液抗凝液100毫升

ELISAKitiNOS人誘導(dǎo)型合成酶規(guī)格：48T/96T
鉤端螺旋體(Lep)核酸檢測試劑盒Anti-Phospho-PKC alpha/beta II (Thr638/641)/FITC 熒光素標(biāo)記0酸化蛋白C α/β2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Guinea IgG (親和化) 豚鼠IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 10mg

戊型肝炎病毒抗體 Anti-HEV 0.1ml

Rabbit Anti-Mink IgG 兔抗水貂IgG 1mg

FRMD5 英文名稱： FRMD5蛋白抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-RPH3AL(Ser234) 0酸化Ras相關(guān)GTP結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

Guinea IgG (親和化) 豚鼠IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 10mg
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL,；空白孔不加,。
4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL,，用封板膜封住反應(yīng)孔,，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
5.棄去液體，吸水紙上拍干,，每孔加滿洗滌液（350μL）,，靜置1min，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干,，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。
6.每孔加入底物A,、B各50μL,，37℃避光孵育15min。產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)
7.每孔加入終止液50μL,，15min內(nèi),，在450nm波長處測定各孔的OD值。