牛支原體（MYPB）核酸檢測試劑盒公司正在銷售的產(chǎn)品：小鼠載脂蛋白C3(APOC3)PCR檢測試劑盒 ,，英文名： APOC3
白介素1(IL-1)ELISA檢測試劑盒MonkeyIerleukin1,IL-1ELISAKit 50T
犬降鈣素(CALCA)免疫試劑盒 Dog calcitonin,CALCA
英文名稱HumanVWFELISAKit人血管性血友病因子(VWF)PCR檢測試劑盒

操作流程
收集基因信息——>設(shè)計引物——>PCR ——>回收目的片段——>與載體連接,取得連接產(chǎn)物 ——> 用感受態(tài)細胞做轉(zhuǎn)化 ——>接菌——>陽性克隆(酶切法或PCR)——>質(zhì)粒抽提——>質(zhì)粒測序——>測序結(jié)果分析——>克隆信息輸入數(shù)據(jù)庫——>質(zhì)粒實物保存。

PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中,，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。
10×PCR buffer
5 μl     dNTP mix （2mM）
4 μl     引物1（10pM）
2 μl     引物2（10pM）
2 μl     Taq酶 （2U/μl）
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl      加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油,。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上,，執(zhí)行擴增,。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,，循環(huán)30-35次,，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存,。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液,，以除去石蠟油,；否則，直接取5-10μl電泳檢測,。
下列相關(guān)產(chǎn)品：
小鼠細胞周期素D2(CCND2)PCR檢測試劑盒 ,，英文名： CCND2

兔誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)ELISA檢測試劑盒Rabbitinducibleniicoxidesyhase,iNOSELISAKIT 50T

牛(NO)免疫試劑盒 Bovine Niic Oxide,NO

英文名稱HumanG-CSFELISAKit人粒細胞克隆刺激因子(G-CSF)

蛋類總?cè)樗岜壬ǘ繖z測試劑盒20次

Ratnicotinicacetylcholinereceptor,N-AChRPCR檢測試劑盒大鼠型乙酰受
實時熒光定量PCR：
實時熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點檢測的局限，實現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強度,，并記錄在電腦軟件之中,，通過對每個樣品Ct值的計算，根據(jù)標準曲線獲得定量結(jié)果,。因此,，實時熒光定量PCR無需內(nèi)標是建立在兩個基礎(chǔ)之上的：
1）Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達Ct值所在的循環(huán)數(shù)時，剛剛進入真正的指數(shù)擴增期（對數(shù)期）,，此時微小誤差尚未放大,，因此Ct值的重現(xiàn)性，即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內(nèi)擴增,，得到的Ct值是恒定的,。
2）Ct值與起始模板的線性關(guān)系由于Ct值與起始模板的對數(shù)存在線性關(guān)系，可利用標準曲線對未知樣品進行定量測定,，因此,，實時熒光定量PCR是一種采用外標準曲線定量的方法,。
外標準曲線的定量方法相比內(nèi)標法是一種準確的、值得信賴的科學(xué)方法,。利用外標準曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量最準確,，重現(xiàn)性定量方法，已得到,，廣泛用于基因表達研究,、轉(zhuǎn)基因研究，藥物療效考核,、病原體檢測等諸多領(lǐng)域,。
定量PCR方法：
a、競爭法
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個新內(nèi)切位點的外源競爭性模板,。在同一反應(yīng)管中,，待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增（其中一個引物為熒光標記）。擴增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,，競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個片段,，而待測模板不被酶切，可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開,，分別測定熒光強度,，根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù)。
b,、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標和引物,，內(nèi)標用基因工程方法合成。上游引物用熒光標記,，下游引物不標記,。在模板擴增的同時，內(nèi)標也被擴增,。在PCR產(chǎn)物中,，由于內(nèi)標與靶模板的長度不同，二者的擴增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來,，分別測定其熒光強度,，以內(nèi)標為對照定量待檢測模板。
c,、PCR－ELISA法
利用di高辛等標記引物,，擴增產(chǎn)物被固相板上特異的探針所結(jié)合，再加入抗di高辛酶標抗體－辣根過氧化物酶結(jié)合物,，最終酶使底物顯色,。常規(guī)的PCR－ELISA法只是定性實驗，若加入內(nèi)標,，作出標準曲線,，也可實現(xiàn)定量檢測目的。
下列是公司正在銷售的產(chǎn)品：
大鼠穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA試劑盒 ,，英文名： PF/PFP ELISA Kit

Mouse 6 keto prostaglandin F1a (6-keto-PGF1a) ELISA Kit 小鼠6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA試劑盒

ELISA 小鼠睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(mouse CF) 48T/96T 進口分裝

CLIAKitforLF/LTF(RabbitLactoferrin)ELISAKit兔乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白規(guī)格：48T/96T

通用型HRP-DAB底物顯色試劑盒10次

ELISAKitMMP11基質(zhì)金屬11規(guī)格：48T/96T

小鼠硫氧還蛋白還原酶1(xR1)ELISA試劑盒 ,，英文名： xR1 ELISA Kit

人上皮特異性抗原(ESA)ELISA檢測試劑盒Humanepithelialspecificaigen,ESAELISAKit 96T/48T

大鼠胰(ypsin)免疫試劑盒 Rat ypsin ELISA Kit

英文名稱KeRatin,AKA抗角蛋白抗體(KeRatin,AKA)Kit規(guī)格：96T/48T

父母印記(IMPRIING)基因克隆技術(shù)試劑盒5次

ELISAKitNAP人中性粒細胞堿性0酸酶規(guī)格：48T/96T
牛支原體（MYPB）核酸檢測試劑盒Anti-SSTR4/FITC 熒光素標記受體4(SSTR4)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

MMP-3(matrix metalloproteinase-3/Transin-1/SL-1/Stromelysin-1 precursor) 基質(zhì)金屬-3(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

腸道肽轉(zhuǎn)運蛋白2/小肽轉(zhuǎn)運蛋白2抗體 Anti-PEPT2 0.1ml

phospho-Syntaxin 1a(Ser14) 英文名稱： 0酸化突觸融合蛋白1抗體 0.1ml

Ephrina1 英文名稱： 內(nèi)皮細胞受體蛋白酪酸A抗體(壞死因子α誘導(dǎo)蛋白4) 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-MYPT1 (Thr853) 0酸化肌球蛋酸酶抗體 規(guī)格 0.1ml

MMP-3(matrix metalloproteinase-3/Transin-1/SL-1/Stromelysin-1 precursor) 基質(zhì)金屬-3(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
2.設(shè)置標準品孔和樣本孔,，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL,；空白孔不加,。
4.除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL,，用封板膜封住反應(yīng)孔,，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,，吸水紙上拍干,，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min,，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機洗板）,。
6.每孔加入底物A,、B各50μL，37℃避光孵育15min,。產(chǎn)品僅用于科研實驗
7.每孔加入終止液50μL,，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值,。