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禽偏肺病毒(aMPV)核酸檢測試劑盒

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更新時(shí)間:2023-03-15 08:26:26瀏覽次數(shù):217

聯(lián)系我們時(shí)請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
應(yīng)用領(lǐng)域 化工 主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn)
禽偏肺病毒(aMPV)核酸檢測試劑盒公司正在銷售的產(chǎn)品:小鼠脂質(zhì)運(yùn)載蛋白1(LCN1)PCR檢測試劑盒 ,,英文名: LCN1
犬α干擾素(IFN-α)ELISA檢測試劑盒CanineIerferonα,IFN-αELISAKit 50T
犬熱休克蛋白60,線粒體(HSPD1/Hsp-60)免疫試劑盒 Dog 60 kDa heat shock protein,mitochondrial,HSPD

詳細(xì)介紹

操作流程
收集基因信息——>設(shè)計(jì)引物——>PCR ——>回收目的片段——>與載體連接,取得連接產(chǎn)物 ——> 用感受態(tài)細(xì)胞做轉(zhuǎn)化 ——>接菌——>陽性克隆(酶切法或PCR)——>質(zhì)粒抽提——>質(zhì)粒測序——>測序結(jié)果分析——>克隆信息輸入數(shù)據(jù)庫——>質(zhì)粒實(shí)物保存,。

產(chǎn)品名稱

分類

規(guī)格

禽偏肺病毒(aMPV)核酸檢測試劑盒

PCR檢測試劑盒

50T

5.png


PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。
10×PCR buffer
5 μl     dNTP mix
2mM
4 μl    
引物110pM
2 μl    
引物210pM
2 μl     Taq
酶 (2U/μl
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl
1 μl      
ddH2O 50 μl
PCR儀有無熱蓋,,不加或添加石蠟油,。
2
:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93
預(yù)變性3-5min,,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,,循環(huán)30-35次,在727min,。
3
:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4
待電泳檢測或-20長期保存。
4
PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油;否則,,直接取5-10μl電泳檢測,。
下列相關(guān)產(chǎn)品:
小鼠信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子1(Smad1)PCR檢測試劑盒 ,英文名: Smad1

小鼠乙型肝炎e抗原(HBeAg)ELISA檢測試劑盒MousehepatitisBviruseaigen,HBeAgELISAKit 50T

人環(huán)0酸鳥苷(cGMP)免疫試劑盒 Human Cyclic guanosine monophosphate,cGMP

ratCoicosterone,COELISAKit大鼠皮質(zhì)同/腎上腺同(CO)PCR檢測試劑盒

2%戊二固著液(Glaraldehyde)50毫升

MouseCTX-2
實(shí)時(shí)熒光定量PCR
實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點(diǎn)檢測的局限,,實(shí)現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強(qiáng)度,,并記錄在電腦軟件之中,通過對每個(gè)樣品Ct值的計(jì)算,,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得定量結(jié)果,。因此,實(shí)時(shí)熒光定量PCR無需內(nèi)標(biāo)是建立在兩個(gè)基礎(chǔ)之上的:
1
Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達(dá)Ct值所在的循環(huán)數(shù)時(shí),,剛剛進(jìn)入真正的指數(shù)擴(kuò)增期(對數(shù)期),,此時(shí)微小誤差尚未放大,因此Ct值的重現(xiàn)性,,即同一模板不同時(shí)間擴(kuò)增或同一時(shí)間不同管內(nèi)擴(kuò)增,,得到的Ct值是恒定的。
2
Ct值與起始模板的線性關(guān)系由于Ct值與起始模板的對數(shù)存在線性關(guān)系,,可利用標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知樣品進(jìn)行定量測定,,因此,實(shí)時(shí)熒光定量PCR是一種采用外標(biāo)準(zhǔn)曲線定量的方法,。
外標(biāo)準(zhǔn)曲線的定量方法相比內(nèi)標(biāo)法是一種準(zhǔn)確的,、值得信賴的科學(xué)方法。利用外標(biāo)準(zhǔn)曲線的實(shí)時(shí)熒光定量PCR是迄今為止定量最準(zhǔn)確,,重現(xiàn)性定量方法,,已得到,廣泛用于基因表達(dá)研究,、轉(zhuǎn)基因研究,,藥物療效考核、病原體檢測等諸多領(lǐng)域,。
定量PCR方法:
a,、競爭法
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個(gè)新內(nèi)切位點(diǎn)的外源競爭性模板。在同一反應(yīng)管中,,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時(shí)擴(kuò)增(其中一個(gè)引物為熒光標(biāo)記),。擴(kuò)增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個(gè)片段,,而待測模板不被酶切,,可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開,分別測定熒光強(qiáng)度,,根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù),。
b
、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標(biāo)和引物,,內(nèi)標(biāo)用基因工程方法合成,。上游引物用熒光標(biāo)記,下游引物不標(biāo)記,。在模板擴(kuò)增的同時(shí),,內(nèi)標(biāo)也被擴(kuò)增。在PCR產(chǎn)物中,,由于內(nèi)標(biāo)與靶模板的長度不同,,二者的擴(kuò)增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強(qiáng)度,,以內(nèi)標(biāo)為對照定量待檢測模板,。
c
PCRELISA
利用di高辛等標(biāo)記引物,,擴(kuò)增產(chǎn)物被固相板上特異的探針?biāo)Y(jié)合,,再加入抗di高辛酶標(biāo)抗體-辣根過氧化物酶結(jié)合物,最終酶使底物顯色,。常規(guī)的PCRELISA法只是定性實(shí)驗(yàn),,若加入內(nèi)標(biāo),作出標(biāo)準(zhǔn)曲線,,也可實(shí)現(xiàn)定量檢測目的,。
下列是公司正在銷售的產(chǎn)品:
大鼠周期素依賴性抑制因子2A(CDKN2A)ELISA試劑盒 ,英文名: CDKN2A ELISA Kit

Mouse ai platelet aibody IgG/M/A (PA-IgG/M/A) ELISA Kit 小鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA試劑盒

MouseBrainderivedneuroophicfacor,BDNFELISAKit 小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanisletamyloidpolypeptide,IAPPELISAKit人胰島淀粉樣多肽規(guī)格:48T/96T

微型RNA(miRNA)北方雜交試劑盒5

ELISAKitMIF大鼠巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子規(guī)格:48T/96T

小鼠腦型肌酸(CKB)ELISA試劑盒 ,,英文名: CKB ELISA Kit

人二0酸腺苷(ADP)ELISA檢測試劑盒HumanAdenosinediphosphate,ADPELISAKit 96T/48T

大鼠胰高血糖素(GC)免疫試劑盒 Rat Glucagon,GC ELISA Kit

英文名稱HumanAβ1-42proteinELISAKitAβ1-42蛋白規(guī)格:96T/48T

分離高爾基體度雙酶法(GT/NCR)檢測試劑盒20

ELISAKitMHC/HLA-Ⅲ人主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類規(guī)格:48T/96T
禽偏肺病毒(aMPV)核酸檢測試劑盒Anti-Tetraspan5/FITC 熒光素標(biāo)記四分子交聯(lián)體5抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

MTLC (c-Myc target from laryngeal cancer cells)又稱:MYC 致癌基因(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

線粒體促凋亡蛋白抗體 anti-Smac/DIABLO 0.1ml

SMC2 英文名稱: 染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白2抗體 0.2ml

phospho-ERK1 (Thr202+Tyr204) + ERK2 (Thr185+Tyr187) 英文名稱: 0酸化原活化蛋白ERK抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-MAX protein(Tyr123) 0酸化Myc基因相關(guān)X因子抗體 規(guī)格 0.1ml

MTLC (c-Myc target from laryngeal cancer cells)又稱:MYC 致癌基因(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,,剩余板條用自封袋密封放回4
2.
設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,;
3.
樣本孔中加入待測樣本50μL,;空白孔不加。
4.
除空白孔外,,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,,用封板膜封住反應(yīng)孔,37
水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
5.
棄去液體,,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),,靜置1min,,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板),。
6.
每孔加入底物AB50μL,,37
避光孵育15min,。產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)
7.
每孔加入終止液50μL15min內(nèi),,在450nm波長處測定各孔的OD值,。


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