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豬皰疹病毒PCR檢測試劑盒

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更新時間:2023-03-14 10:39:09瀏覽次數(shù):164

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
應(yīng)用領(lǐng)域 化工 主要用途 僅供科研實驗
豬皰疹病毒PCR檢測試劑盒公司正在銷售的產(chǎn)品:小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGFβ1)PCR檢測試劑盒 ,英文名: TGFβ1
犬孕激素/孕酮(PROG)ELISA檢測試劑盒CanineProgesterone,PROGELISAkit 50T
犬A(VA)免疫試劑盒 Dog Vitamin A,VA
英文名稱HumanGlycoprotein96ELISAKit人腫瘤排斥性抗原g
超氧化物歧化酶(

詳細(xì)介紹

實時熒光定量PCR
實時熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點檢測的局限,,實現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強(qiáng)度,,并記錄在電腦軟件之中,通過對每個樣品Ct值的計算,,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得定量結(jié)果,。因此,實時熒光定量PCR無需內(nèi)標(biāo)是建立在兩個基礎(chǔ)之上的:
1
Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達(dá)Ct值所在的循環(huán)數(shù)時,,剛剛進(jìn)入真正的指數(shù)擴(kuò)增期(對數(shù)期),,此時微小誤差尚未放大,,因此Ct值的重現(xiàn)性,,即同一模板不同時間擴(kuò)增或同一時間不同管內(nèi)擴(kuò)增,得到的Ct值是恒定的,。
2
Ct值與起始模板的線性關(guān)系由于Ct值與起始模板的對數(shù)存在線性關(guān)系,,可利用標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知樣品進(jìn)行定量測定,因此,,實時熒光定量PCR是一種采用外標(biāo)準(zhǔn)曲線定量的方法,。
外標(biāo)準(zhǔn)曲線的定量方法相比內(nèi)標(biāo)法是一種準(zhǔn)確的、值得信賴的科學(xué)方法,。利用外標(biāo)準(zhǔn)曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量最準(zhǔn)確,,重現(xiàn)性定量方法,已得到,,廣泛用于基因表達(dá)研究,、轉(zhuǎn)基因研究,藥物療效考核,、病原體檢測等諸多領(lǐng)域,。

4.png


操作流程
收集基因信息——>設(shè)計引物——>PCR ——>回收目的片段——>與載體連接,取得連接產(chǎn)物 ——> 用感受態(tài)細(xì)胞做轉(zhuǎn)化 ——>接菌——>陽性克隆(酶切法或PCR)——>質(zhì)粒抽提——>質(zhì)粒測序——>測序結(jié)果分析——>克隆信息輸入數(shù)據(jù)庫——>質(zhì)粒實物保存。

產(chǎn)品名稱

分類

規(guī)格

豬皰疹病毒PCR檢測試劑盒

PCR檢測試劑盒

50T

下列相關(guān)產(chǎn)品:
小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)PCR檢測試劑盒 ,,英文名: ACE

小鼠α1微球蛋白(α1-MG)ELISA檢測試劑盒Mouseα1-microglobulin,α1-MGELISAKit 50T

人活性氧(ROS)免疫試劑盒 Human Reactive OXyen Species,ROS

RatCollageype,ColELISAKit大鼠Ⅱ型膠原(Col)PCR檢測試劑盒

10倍細(xì)菌合成基礎(chǔ)培養(yǎng)液100毫升

MouseComplemefragme4a,C4aPCR檢測試劑盒小鼠過敏毒素/

PCR實驗方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl     dNTP mix
2mM
4 μl    
引物110pM
2 μl    
引物210pM
2 μl     Taq
酶 (2U/μl
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl
1 μl      
ddH2O 50 μl
PCR儀有無熱蓋,,不加或添加石蠟油,。
2
:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93
預(yù)變性3-5min,,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,,循環(huán)30-35次,,在727min
3
:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4
待電泳檢測或-20長期保存,。
4
PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油,;否則,直接取5-10μl電泳檢測,。

定量PCR方法:
a,、競爭法  產(chǎn)品僅用于科研實驗
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個新內(nèi)切位點的外源競爭性模板。在同一反應(yīng)管中,,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴(kuò)增(其中一個引物為熒光標(biāo)記),。擴(kuò)增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個片段,,而待測模板不被酶切,,可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開,分別測定熒光強(qiáng)度,,根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù),。
b
、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標(biāo)和引物,,內(nèi)標(biāo)用基因工程方法合成,。上游引物用熒光標(biāo)記,下游引物不標(biāo)記,。在模板擴(kuò)增的同時,,內(nèi)標(biāo)也被擴(kuò)增。在PCR產(chǎn)物中,,由于內(nèi)標(biāo)與靶模板的長度不同,,二者的擴(kuò)增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強(qiáng)度,,以內(nèi)標(biāo)為對照定量待檢測模板,。
c
PCRELISA
利用di高辛等標(biāo)記引物,,擴(kuò)增產(chǎn)物被固相板上特異的探針?biāo)Y(jié)合,,再加入抗di高辛酶標(biāo)抗體-辣根過氧化物酶結(jié)合物,最終酶使底物顯色,。常規(guī)的PCRELISA法只是定性實驗,,若加入內(nèi)標(biāo),作出標(biāo)準(zhǔn)曲線,,也可實現(xiàn)定量檢測目的,。

操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,,剩余板條用自封袋密封放回4
2.
設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,;
3.
樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加,。
4.
除空白孔外,,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,,37
水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
5.
棄去液體,吸水紙上拍干,,每孔加滿洗滌液(350μL),,靜置1min,甩去洗滌液,,吸水紙上拍干,,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6.
每孔加入底物A,、B50μL37
避光孵育15min,。
7.
每孔加入終止液50μL,,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值,。

下列是公司正在銷售的產(chǎn)品:
大鼠酚(PYD)ELISA試劑盒 ,,英文名: PYD ELISA Kit

Mouse beta galactosidase (beta GAL) ELISA Kit 小鼠β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA試劑盒

ELISA 小鼠Fibronectin(mouse Fibronectin) 48T/96T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforJo1/HRS(HumanJo-1Aibody)ELISAKitJo1抗體/抗組氨酰NA合成酶抗體規(guī)格:48T/96T

通用型氮含量克爾道(Kjeldahl)法定量檢測試劑盒20

ELISAKitTSGF大鼠腫瘤特異生長因子/腫瘤相關(guān)因子規(guī)格:48T/96T

小鼠黏膜地址素細(xì)胞黏附分子(MAdCAM1)ELISA試劑盒 ,英文名: MAdCAM1 ELISA Kit

5羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA檢測試劑盒Human5-hydroxyindolaceticacid,5-HIAAELISAKit 96T/48T

大鼠抑制素結(jié)合蛋白(INHBP)免疫試劑盒 Rat Inhibin binding protein,INHBP ELISA Kit

英文名稱HumanCCL24ELISAKitCCL24規(guī)格:96T/48T

非哺乳動物封阻緩沖液100毫升

ELISAKitTPA人組織多肽抗原規(guī)格:48T/96T
豬皰疹病毒PCR檢測試劑盒GRB2/ASH peptide 生長因子受體結(jié)合蛋白2抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

Oct4 Oct4 鼠單抗 (FITC) Human

Rhesus antibody Rh phospho-CstF64(Ser498) 0酸化細(xì)胞分裂相關(guān)蛋白CSTF64抗體 規(guī)格 0.1ml

染色液 100ml 自產(chǎn)

ZNF704 英文名稱: 鋅指蛋白704抗體 0.2ml

DCUN1D2 英文名稱: DCN1樣蛋白2抗體 0.2ml

Oct4 Oct4 鼠單抗 (FITC) Human


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