消化道病毒多重PCR檢測試劑盒公司正在銷售的產(chǎn)品：蝦肝腸微胞蟲PCR檢測試劑盒 Enterocytozoon hepatopenaei（EHP）PCR.孟氏尖旋線蟲PCR檢測試劑盒 Oxyspirura mansoniPCR.馬流感病毒亞型PCR檢測試劑盒 Equine Influenza Virus(EIV)H3N8RTPCR

操作流程
收集基因信息——>設(shè)計(jì)引物——>PCR ——>回收目的片段——>與載體連接,取得連接產(chǎn)物 ——> 用感受態(tài)細(xì)胞做轉(zhuǎn)化 ——>接菌——>陽性克隆(酶切法或PCR)——>質(zhì)粒抽提——>質(zhì)粒測序——>測序結(jié)果分析——>克隆信息輸入數(shù)據(jù)庫——>質(zhì)粒實(shí)物保存。

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中,，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。
10×PCR buffer
5 μl     dNTP mix （2mM）
4 μl     引物1（10pM）
2 μl     引物2（10pM）
2 μl     Taq酶 （2U/μl）
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl      加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油,。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上,，執(zhí)行擴(kuò)增,。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,，循環(huán)30-35次,，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存,。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,，以除去石蠟油；否則,，直接取5-10μl電泳檢測,。
下列相關(guān)產(chǎn)品：
艾美耳球蟲屬通用PCR檢測試劑盒 Eimeria spp.PCR

施氏油脂線蟲PCR檢測試劑盒 Elaeophora schneideriPCR

伊蒙微小菌PCR檢測試劑盒 Emmonsia parvaPCR
實(shí)時(shí)熒光定量PCR：
實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點(diǎn)檢測的局限，實(shí)現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號(hào)的強(qiáng)度,，并記錄在電腦軟件之中,，通過對每個(gè)樣品Ct值的計(jì)算，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得定量結(jié)果,。因此,，實(shí)時(shí)熒光定量PCR無需內(nèi)標(biāo)是建立在兩個(gè)基礎(chǔ)之上的：
1）Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達(dá)Ct值所在的循環(huán)數(shù)時(shí)，剛剛進(jìn)入真正的指數(shù)擴(kuò)增期（對數(shù)期）,，此時(shí)微小誤差尚未放大,，因此Ct值的重現(xiàn)性，即同一模板不同時(shí)間擴(kuò)增或同一時(shí)間不同管內(nèi)擴(kuò)增，得到的Ct值是恒定的,。
2）Ct值與起始模板的線性關(guān)系由于Ct值與起始模板的對數(shù)存在線性關(guān)系,，可利用標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知樣品進(jìn)行定量測定，因此,，實(shí)時(shí)熒光定量PCR是一種采用外標(biāo)準(zhǔn)曲線定量的方法,。
外標(biāo)準(zhǔn)曲線的定量方法相比內(nèi)標(biāo)法是一種準(zhǔn)確的、值得信賴的科學(xué)方法,。利用外標(biāo)準(zhǔn)曲線的實(shí)時(shí)熒光定量PCR是迄今為止定量最準(zhǔn)確,，重現(xiàn)性定量方法，已得到,，廣泛用于基因表達(dá)研究,、轉(zhuǎn)基因研究，藥物療效考核,、病原體檢測等諸多領(lǐng)域,。
定量PCR方法：
a、競爭法
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個(gè)新內(nèi)切位點(diǎn)的外源競爭性模板,。在同一反應(yīng)管中,，待測樣品與競爭模板用同一對引物同時(shí)擴(kuò)增（其中一個(gè)引物為熒光標(biāo)記）。擴(kuò)增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,，競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個(gè)片段,，而待測模板不被酶切，可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開,，分別測定熒光強(qiáng)度,，根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù)。
b,、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標(biāo)和引物,，內(nèi)標(biāo)用基因工程方法合成。上游引物用熒光標(biāo)記,，下游引物不標(biāo)記,。在模板擴(kuò)增的同時(shí)，內(nèi)標(biāo)也被擴(kuò)增,。在PCR產(chǎn)物中,，由于內(nèi)標(biāo)與靶模板的長度不同，二者的擴(kuò)增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來,，分別測定其熒光強(qiáng)度,，以內(nèi)標(biāo)為對照定量待檢測模板。
c,、PCR－ELISA法
利用di高辛等標(biāo)記引物,，擴(kuò)增產(chǎn)物被固相板上特異的探針?biāo)Y(jié)合,，再加入抗di高辛酶標(biāo)抗體－辣根過氧化物酶結(jié)合物，最終酶使底物顯色,。常規(guī)的PCR－ELISA法只是定性實(shí)驗(yàn),，若加入內(nèi)標(biāo)，作出標(biāo)準(zhǔn)曲線,，也可實(shí)現(xiàn)定量檢測目的,。
下列是公司正在銷售的產(chǎn)品：
大鼠神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)ELISA試劑盒 ，英文名： NSE ELISA Kit

Mouse cytochrome C (Cyt-C) ELISA Kit 小鼠(Cyt-C)ELISA試劑盒

RatThromboxaneB2,TXB2ELISAKit 大鼠血栓素B2(TXB2)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHBsAb乙型肝炎表面抗體規(guī)格：48T/96T

細(xì)胞氨含量光譜法定量檢測試劑盒20次

SheepIerleukin1,IL-1ELISAKit綿羊白介素1(IL-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(GRP78)ELISA試劑盒 ,，英文名： GRP78 ELISA Kit

小鼠表皮生長因子(EGF)ELISA檢測試劑盒MouseEpidermalgrowthfactor,EGFELISAKit 96T/48T

人分泌型卷曲相關(guān)蛋白5(SFRP5)免疫試劑盒 Human SFRP5 ELISA Kit

Ratiestinalfattyacidbindingprotein,iFABPELISAKit大鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

CDK6蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒25次

MouseMethylaseELISA試劑盒小鼠甲基化酶(Methylase)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
消化道病毒多重PCR檢測試劑盒Anti-phospho C-Met/pHGFR(pTyr1365)/FITC 熒光素標(biāo)記抗0酸化原癌基因c-Met抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rabbit Anti-Bovine TG 兔抗甲狀腺球蛋白 (親和層析化)Multi-class antibodies規(guī)格： 1mg

腦腸肽抗體 Anti-Ghrelin 0.1ml

Goat Anti-Chicken IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗雞IgG 0.1ml

FABP6 英文名稱： 回腸脂肪酸結(jié)合蛋白抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-SLC29A4(Tyr198) 0酸化腦質(zhì)膜單胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白PMAT抗體 規(guī)格 0.1ml

Rabbit Anti-Bovine TG 兔抗甲狀腺球蛋白 (親和層析化)Multi-class antibodies規(guī)格： 1mg
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加,。
4.除空白孔外,，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔,，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
5.棄去液體，吸水紙上拍干,，每孔加滿洗滌液（350μL）,，靜置1min，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干,，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。
6.每孔加入底物A,、B各50μL,，37℃避光孵育15min。產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)
7.每孔加入終止液50μL,，15min內(nèi),，在450nm波長處測定各孔的OD值。