西尼羅河病毒PCR檢測試劑盒公司正在銷售的產(chǎn)品：耐久腸球菌PCR檢測試劑盒 Enterococcus duransPCR.同病毒綿羊膿皰病毒PCR檢測試劑盒 Ovine Ecthyma Virus（Orf）PCR.流行性出血熱病毒PCR檢測試劑盒 Epizootic Hemorrhagic Disease Virus(EHDV)PCR

操作流程
收集基因信息——>設(shè)計引物——>PCR ——>回收目的片段——>與載體連接,取得連接產(chǎn)物 ——> 用感受態(tài)細胞做轉(zhuǎn)化 ——>接菌——>陽性克隆(酶切法或PCR)——>質(zhì)粒抽提——>質(zhì)粒測序——>測序結(jié)果分析——>克隆信息輸入數(shù)據(jù)庫——>質(zhì)粒實物保存,。

PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。
10×PCR buffer
5 μl     dNTP mix （2mM）
4 μl     引物1（10pM）
2 μl     引物2（10pM）
2 μl     Taq酶 （2U/μl）
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl      加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增,。一般：在93℃預(yù)變性3-5min,，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次,，在72℃ 保7min,。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存,。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油,，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則,，直接取5-10μl電泳檢測,。
下列相關(guān)產(chǎn)品：
東部馬腦脊髓炎病毒PCR檢測試劑盒 Eastern Equine Encephalomyelitis Virus(EEEV )RTPCR

細粒棘球絳蟲PCR檢測試劑盒 Echinococcus granulosusPCR

棘球絳蟲通用PCR檢測試劑盒 Echinococcus spp.PCR
實時熒光定量PCR：
實時熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點檢測的局限，實現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強度,，并記錄在電腦軟件之中,，通過對每個樣品Ct值的計算，根據(jù)標準曲線獲得定量結(jié)果,。因此,，實時熒光定量PCR無需內(nèi)標是建立在兩個基礎(chǔ)之上的：
1）Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達Ct值所在的循環(huán)數(shù)時，剛剛進入真正的指數(shù)擴增期（對數(shù)期）,，此時微小誤差尚未放大,，因此Ct值的重現(xiàn)性，即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內(nèi)擴增,，得到的Ct值是恒定的,。
2）Ct值與起始模板的線性關(guān)系由于Ct值與起始模板的對數(shù)存在線性關(guān)系，可利用標準曲線對未知樣品進行定量測定,，因此,，實時熒光定量PCR是一種采用外標準曲線定量的方法。
外標準曲線的定量方法相比內(nèi)標法是一種準確的,、值得信賴的科學(xué)方法,。利用外標準曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量最準確，重現(xiàn)性定量方法,，已得到,，廣泛用于基因表達研究、轉(zhuǎn)基因研究,，藥物療效考核,、病原體檢測等諸多領(lǐng)域。
定量PCR方法：
a,、競爭法
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個新內(nèi)切位點的外源競爭性模板,。在同一反應(yīng)管中，待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增（其中一個引物為熒光標記）,。擴增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,，競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個片段，而待測模板不被酶切,，可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開，分別測定熒光強度,，根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù),。
b、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標和引物，內(nèi)標用基因工程方法合成,。上游引物用熒光標記,，下游引物不標記。在模板擴增的同時,，內(nèi)標也被擴增,。在PCR產(chǎn)物中，由于內(nèi)標與靶模板的長度不同,，二者的擴增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來,，分別測定其熒光強度，以內(nèi)標為對照定量待檢測模板,。
c,、PCR－ELISA法
利用di高辛等標記引物，擴增產(chǎn)物被固相板上特異的探針所結(jié)合,，再加入抗di高辛酶標抗體－辣根過氧化物酶結(jié)合物,，最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCR－ELISA法只是定性實驗,，若加入內(nèi)標,，作出標準曲線，也可實現(xiàn)定量檢測目的,。
下列是公司正在銷售的產(chǎn)品：
大鼠P27蛋白(P27)ELISA試劑盒 ,，英文名： P27 ELISA Kit

Mouse dopamine (DA) ELISA Kit 小鼠多巴胺(DA)ELISA試劑盒

ELISA 小鼠Toll樣受體-2(mouse TLR-2) 48T/96T 進口分裝

CLIAKitforIfi205(Humanierferonactivatedgene205)ELISAKit人干擾素活化基因205規(guī)格：48T/96T

通用型人體腺病毒(adenovirus)定性檢測試劑盒20次

ELISAKitHABP大鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白規(guī)格：48T/96T

小鼠遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat tissue inhibitors of metalloproteinase 2 (TIMP-2) ELISA Kit 大鼠基質(zhì)金屬抑制因子2(TIMP-2)ELISA試劑盒

HumanCenomereProtein,CENP-BELISAKit 人著絲粒蛋白B(CENP-B)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

HamsterreceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligand,RANKLELISA試劑盒倉鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母細胞染色質(zhì)免疫沉淀分析(CHIP)試劑盒(包括抗體)20次

MouseBigEndothelin,BigETELISAKit小鼠大內(nèi)皮素(BigET)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
西尼羅河病毒PCR檢測試劑盒Anti-phospho-c-Jun/AP-1(pThr91/pThr93)/FITC 熒光素標記抗0酸化原癌基因c-Jun抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rabbit Anti-chicken IgG 兔抗雞IgG (親和層析化)Multi-class antibodies規(guī)格： 1mg

生長激素釋放激素因抗體 Anti-GHRF/GHRH 0.1ml

Goat Anti-Chicken IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的羊抗雞IgG 0.1ml

FADS1 英文名稱： 脂肪酸去飽和酶1抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-SLAMF1(Tyr281) 0酸化信號淋巴細胞活化分子CD150抗體 規(guī)格 0.1ml

Rabbit Anti-chicken IgG 兔抗雞IgG (親和層析化)Multi-class antibodies規(guī)格： 1mg
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
2.設(shè)置標準品孔和樣本孔,，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL,；空白孔不加,。
4.除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL,，用封板膜封住反應(yīng)孔,，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,，吸水紙上拍干,，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min,，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機洗板）,。
6.每孔加入底物A,、B各50μL,，37℃避光孵育15min。產(chǎn)品僅用于科研實驗
7.每孔加入終止液50μL,，15min內(nèi),，在450nm波長處測定各孔的OD值。