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沙門氏菌屬PCR檢測試劑盒

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更新時間:2023-03-14 09:20:38瀏覽次數(shù):136

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
應(yīng)用領(lǐng)域 化工 主要用途 僅供科研實驗
沙門氏菌屬PCR檢測試劑盒公司正在銷售的產(chǎn)品:雞減蛋綜合征病毒PCR檢測試劑盒 Egg Drop Syndrome Virus1976(EDSV76)1976PCR.諾如病毒型PCR檢測試劑盒 Norwalk Viruses G1 (NV1)G1RTPCR.班氏絲蟲PCR檢測試劑盒 Wuchereria bancroftiPCR

詳細介紹

操作流程
收集基因信息——>設(shè)計引物——>PCR ——>回收目的片段——>與載體連接,取得連接產(chǎn)物 ——> 用感受態(tài)細胞做轉(zhuǎn)化 ——>接菌——>陽性克隆(酶切法或PCR)——>質(zhì)粒抽提——>質(zhì)粒測序——>測序結(jié)果分析——>克隆信息輸入數(shù)據(jù)庫——>質(zhì)粒實物保存,。

產(chǎn)品名稱

分類

規(guī)格

沙門氏菌屬PCR檢測試劑盒

PCR檢測試劑盒

50T

4.png


PCR實驗方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。
10×PCR buffer
5 μl     dNTP mix
2mM
4 μl    
引物110pM
2 μl    
引物210pM
2 μl     Taq
酶 (2U/μl
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl
1 μl      
ddH2O 50 μl
PCR儀有無熱蓋,,不加或添加石蠟油,。
2
:調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴增,。一般:在93
預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,,循環(huán)30-35次,,在727min
3
:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4
待電泳檢測或-20長期保存,。
4
PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油,;否則,直接取5-10μl電泳檢測,。
下列相關(guān)產(chǎn)品:
產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿菌型PCR檢測試劑盒 Clostridium perfringens types AAPCR

產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿菌通用PCR檢測試劑盒 Clostridium perfringensPCR

敗血梭狀芽胞桿菌PCR檢測試劑盒 Clostridium septicumPCR
實時熒光定量PCR
實時熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點檢測的局限,,實現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強度,并記錄在電腦軟件之中,,通過對每個樣品Ct值的計算,,根據(jù)標準曲線獲得定量結(jié)果。因此,,實時熒光定量PCR無需內(nèi)標是建立在兩個基礎(chǔ)之上的:
1
Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達Ct值所在的循環(huán)數(shù)時,,剛剛進入真正的指數(shù)擴增期(對數(shù)期),此時微小誤差尚未放大,,因此Ct值的重現(xiàn)性,,即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內(nèi)擴增,得到的Ct值是恒定的,。
2
Ct值與起始模板的線性關(guān)系由于Ct值與起始模板的對數(shù)存在線性關(guān)系,,可利用標準曲線對未知樣品進行定量測定,因此,實時熒光定量PCR是一種采用外標準曲線定量的方法,。
外標準曲線的定量方法相比內(nèi)標法是一種準確的,、值得信賴的科學(xué)方法。利用外標準曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量最準確,,重現(xiàn)性定量方法,,已得到,廣泛用于基因表達研究,、轉(zhuǎn)基因研究,,藥物療效考核、病原體檢測等諸多領(lǐng)域,。
定量PCR方法:
a,、競爭法
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個新內(nèi)切位點的外源競爭性模板。在同一反應(yīng)管中,,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增(其中一個引物為熒光標記),。擴增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個片段,,而待測模板不被酶切,,可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開,分別測定熒光強度,,根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù)。
b
,、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標和引物,,內(nèi)標用基因工程方法合成。上游引物用熒光標記,,下游引物不標記,。在模板擴增的同時,內(nèi)標也被擴增,。在PCR產(chǎn)物中,,由于內(nèi)標與靶模板的長度不同,二者的擴增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來,,分別測定其熒光強度,,以內(nèi)標為對照定量待檢測模板。
c
,、PCRELISA
利用di高辛等標記引物,,擴增產(chǎn)物被固相板上特異的探針所結(jié)合,再加入抗di高辛酶標抗體-辣根過氧化物酶結(jié)合物,,最終酶使底物顯色,。常規(guī)的PCRELISA法只是定性實驗,若加入內(nèi)標,作出標準曲線,,也可實現(xiàn)定量檢測目的,。
下列是公司正在銷售的產(chǎn)品:
大鼠成纖維細胞生長因子2(FGF2/bFGF)ELISA試劑盒 ,英文名: FGF2/bFGF ELISA Kit

Mouse factor B (BF) ELISA Kit 小鼠B因子(BF)ELISA試劑盒

ELISA 小鼠補體C3a(mouse C3a) 48T/96T 進口分裝

CLIAKitforLepIgGISAKit大鼠鉤端IgG規(guī)格:48T/96T

通用型HSV(HERPESSIMPLX)病毒定性檢測試劑盒20

ELISAKitα1-MGα1微球蛋白規(guī)格:48T/96T

小鼠強啡肽(Dyn)ELISA試劑盒 ,,英文名: Dyn ELISA Kit

人金葡菌腸毒素(SE)ELISA檢測試劑盒Humanstaphylococcusaureuseerotoxins,SEELISAKit 96T/48T

大鼠脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)免疫試劑盒 Rat lipolysaccharide binding protein,LBP ELISA Kit

英文名稱HumanP53ELISAKitP53(P53)規(guī)格:96T/48T

動物組織內(nèi)質(zhì)網(wǎng)粗提分離試劑盒10

VTGELISA試劑盒鯉魚卵黃蛋白原規(guī)格:96T/48T
沙門氏菌屬PCR檢測試劑盒Anti-Phospho-Rb (Ser608) /FITC 熒光素標記0酸化視網(wǎng)膜母細胞瘤相關(guān)蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-Goat IgM Whole serum 兔抗羊IgM抗血清Multi-class antibodies規(guī)格: 1ml

胰島素樣生長因子2 mRNA 結(jié)合蛋白3抗體 IGF-IIBP3 0.2ml

Goat Anti-Bovine IgG 羊抗IgG 1mg

FANCC 英文名稱: 范可尼綜合征相關(guān)蛋白FANCC抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-Pyk2 (Tyr881) 0酸化富含脯的酪激酶2抗體 規(guī)格 0.1ml

Rabbit Anti-Goat IgM Whole serum 兔抗羊IgM抗血清Multi-class antibodies規(guī)格: 1ml
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,,剩余板條用自封袋密封放回4
2.
設(shè)置標準品孔和樣本孔,,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL,;
3.
樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加,。
4.
除空白孔外,,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,,37
水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
5.
棄去液體,吸水紙上拍干,,每孔加滿洗滌液(350μL),,靜置1min,甩去洗滌液,,吸水紙上拍干,,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.
每孔加入底物A,、B50μL,,37
避光孵育15min產(chǎn)品僅用于科研實驗
7.
每孔加入終止液50μL,,15min內(nèi),,在450nm波長處測定各孔的OD值。


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