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輪狀病毒PCR檢測試劑盒

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更新時間:2023-03-13 16:16:12瀏覽次數(shù):127

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
應(yīng)用領(lǐng)域 化工 主要用途 僅供科研實驗
輪狀病毒PCR檢測試劑盒公司正在銷售的產(chǎn)品:雞胚致死孤兒病毒PCR檢測試劑盒 Chicken Embro Lethal Orphan Virus(CELOV)PCR.折光馬爾太蟲PCR檢測試劑盒 Marteilia refringensPCR.豬乳頭瘤病毒PCR檢測試劑盒 Swine PapillomavirusPCR

詳細(xì)介紹

實時熒光定量PCR
實時熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點檢測的局限,,實現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強度,,并記錄在電腦軟件之中,通過對每個樣品Ct值的計算,,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得定量結(jié)果,。因此,實時熒光定量PCR無需內(nèi)標(biāo)是建立在兩個基礎(chǔ)之上的:
1
Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達(dá)Ct值所在的循環(huán)數(shù)時,,剛剛進(jìn)入真正的指數(shù)擴增期(對數(shù)期),,此時微小誤差尚未放大,因此Ct值的重現(xiàn)性,,即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內(nèi)擴增,,得到的Ct值是恒定的。
2
Ct值與起始模板的線性關(guān)系由于Ct值與起始模板的對數(shù)存在線性關(guān)系,,可利用標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知樣品進(jìn)行定量測定,,因此,實時熒光定量PCR是一種采用外標(biāo)準(zhǔn)曲線定量的方法,。
外標(biāo)準(zhǔn)曲線的定量方法相比內(nèi)標(biāo)法是一種準(zhǔn)確的,、值得信賴的科學(xué)方法。利用外標(biāo)準(zhǔn)曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量最準(zhǔn)確,,重現(xiàn)性定量方法,,已得到,廣泛用于基因表達(dá)研究,、轉(zhuǎn)基因研究,,藥物療效考核,、病原體檢測等諸多領(lǐng)域。

5.png

操作流程
收集基因信息——>設(shè)計引物——>PCR ——>回收目的片段——>與載體連接,取得連接產(chǎn)物 ——> 用感受態(tài)細(xì)胞做轉(zhuǎn)化 ——>接菌——>陽性克隆(酶切法或PCR)——>質(zhì)粒抽提——>質(zhì)粒測序——>測序結(jié)果分析——>克隆信息輸入數(shù)據(jù)庫——>質(zhì)粒實物保存,。

產(chǎn)品名稱

分類

規(guī)格

輪狀病毒PCR檢測試劑盒

PCR檢測試劑盒

50T

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同性戀螺桿菌PCR檢測試劑盒 Helicobacter cinaediPCR

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PCR實驗方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。
10×PCR buffer
5 μl     dNTP mix
2mM
4 μl    
引物110pM
2 μl    
引物210pM
2 μl     Taq
酶 (2U/μl
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl
1 μl      
ddH2O 50 μl
PCR儀有無熱蓋,,不加或添加石蠟油。
2
:調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增,。一般:在93
預(yù)變性3-5min,,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,,在727min,。
3
:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4
待電泳檢測或-20長期保存,。
4
PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油,;否則,,直接取5-10μl電泳檢測。

定量PCR方法:
a,、競爭法  產(chǎn)品僅用于科研實驗
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個新內(nèi)切位點的外源競爭性模板,。在同一反應(yīng)管中,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增(其中一個引物為熒光標(biāo)記),。擴增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,,競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個片段,而待測模板不被酶切,,可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開,,分別測定熒光強度,根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù),。
b
,、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標(biāo)和引物,內(nèi)標(biāo)用基因工程方法合成,。上游引物用熒光標(biāo)記,,下游引物不標(biāo)記。在模板擴增的同時,內(nèi)標(biāo)也被擴增,。在PCR產(chǎn)物中,,由于內(nèi)標(biāo)與靶模板的長度不同,,二者的擴增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來,,分別測定其熒光強度,以內(nèi)標(biāo)為對照定量待檢測模板,。
c
,、PCRELISA
利用di高辛等標(biāo)記引物,擴增產(chǎn)物被固相板上特異的探針?biāo)Y(jié)合,,再加入抗di高辛酶標(biāo)抗體-辣根過氧化物酶結(jié)合物,,最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCRELISA法只是定性實驗,,若加入內(nèi)標(biāo),,作出標(biāo)準(zhǔn)曲線,也可實現(xiàn)定量檢測目的,。

操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,,剩余板條用自封袋密封放回4
2.
設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,;
3.
樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加,。
4.
除空白孔外,,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,,37
水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
5.
棄去液體,吸水紙上拍干,,每孔加滿洗滌液(350μL),,靜置1min,甩去洗滌液,,吸水紙上拍干,,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.
每孔加入底物A,、B50μL,,37
避光孵育15min
7.
每孔加入終止液50μL,,15min內(nèi),,在450nm波長處測定各孔的OD值。

下列是公司正在銷售的產(chǎn)品:
大鼠白介素2可溶性受體(IL-2sR)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-2sR ELISA Kit

Mouse ierleukin 7 (IL-7) ELISA Kit 小鼠白介素7(IL-7)ELISA試劑盒

ELISA 小鼠類胰島素生長因子結(jié)合蛋白-2(mouse IGBPF-2) 48T/96T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforIMA(MouseIschemiaModifiedAlbumin)ELISAKit小鼠缺血修飾白蛋白規(guī)格:48T/96T

通用型瓜類細(xì)菌性果斑病(西瓜果斑)(Acidovoraxavenaesubsp.ciulli;WatermelonFruitBlotch)試劑盒20

ELISAKitINHBP大鼠抑制素結(jié)合蛋白規(guī)格:48T/96T

小鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISA試劑盒 ,,英文名: AQP-1 ELISA Kit

小鼠血小板生成素(TPO)ELISA檢測試劑盒MouseThrombopoietin,TPOELISAkit 96T/48T

人庚型肝炎病毒(HGV)抗體(IgG)免疫試劑盒 Human HGV IgG ELISA kit

RatGranulocyte-MacrophageColonyStimulatingFactor,GM-CSFELISAKit大鼠粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

BAD(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克

MouseIgMELISA試劑盒小鼠IgMELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
輪狀病毒PCR檢測試劑盒Anti-SCF/FITC 熒光素標(biāo)記干細(xì)胞生長因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

rDen(rh-Dengue Virus) 多價重組人登革熱病毒診斷抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 100ug

髓鞘少樹突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白抗體 Anti-MOG 0.2ml

SUMO 1 英文名稱: 泛素樣修飾體-1抗體 0.1ml

FABPB 英文名稱: 腦型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體(C) 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-PDGFRA(Tyr1018) 0酸化血小板源性生長因子受體-α抗體 規(guī)格 0.1ml

rDen(rh-Dengue Virus) 多價重組人登革熱病毒診斷抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 100ug


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