基孔肯雅病毒PCR檢測試劑盒公司正在銷售的產(chǎn)品：羊布魯氏菌PCR檢測試劑盒 Brucella melitensisPCR.唾液乳酸桿菌PCR檢測試劑盒 Lactobacillus salivariusPCR.圣路易斯腦炎病毒PCR檢測試劑盒 St.Louis Encephalitis Virus(SLEV)RTPCR

實時熒光定量PCR：
實時熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點檢測的局限，實現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強度,，并記錄在電腦軟件之中,，通過對每個樣品Ct值的計算，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得定量結(jié)果,。因此,，實時熒光定量PCR無需內(nèi)標(biāo)是建立在兩個基礎(chǔ)之上的：
1）Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達(dá)Ct值所在的循環(huán)數(shù)時，剛剛進(jìn)入真正的指數(shù)擴增期（對數(shù)期）,，此時微小誤差尚未放大,，因此Ct值的重現(xiàn)性，即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內(nèi)擴增,，得到的Ct值是恒定的,。
2）Ct值與起始模板的線性關(guān)系由于Ct值與起始模板的對數(shù)存在線性關(guān)系，可利用標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知樣品進(jìn)行定量測定,，因此,，實時熒光定量PCR是一種采用外標(biāo)準(zhǔn)曲線定量的方法。
外標(biāo)準(zhǔn)曲線的定量方法相比內(nèi)標(biāo)法是一種準(zhǔn)確的,、值得信賴的科學(xué)方法,。利用外標(biāo)準(zhǔn)曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量最準(zhǔn)確，重現(xiàn)性定量方法,，已得到,，廣泛用于基因表達(dá)研究、轉(zhuǎn)基因研究,，藥物療效考核,、病原體檢測等諸多領(lǐng)域。

操作流程
收集基因信息——>設(shè)計引物——>PCR ——>回收目的片段——>與載體連接,取得連接產(chǎn)物 ——> 用感受態(tài)細(xì)胞做轉(zhuǎn)化 ——>接菌——>陽性克隆(酶切法或PCR)——>質(zhì)粒抽提——>質(zhì)粒測序——>測序結(jié)果分析——>克隆信息輸入數(shù)據(jù)庫——>質(zhì)粒實物保存,。

下列相關(guān)產(chǎn)品：
馬皮疽組織胞漿菌PCR檢測試劑盒 Histoplasm farcinimosumPCR

馬秋博病毒PCR檢測試劑盒 Machupo Virus(MACV)RTPCR

瑪爾摩分枝桿菌PCR檢測試劑盒 Mycobacterium malmoenesPCR

PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中,，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl     dNTP mix （2mM）
4 μl     引物1（10pM）
2 μl     引物2（10pM）
2 μl     Taq酶 （2U/μl）
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl      加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,，不加或添加石蠟油,。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上,，執(zhí)行擴增,。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,，循環(huán)30-35次,，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存,。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,，以除去石蠟油,；否則，直接取5-10μl電泳檢測,。

定量PCR方法：
a、競爭法　　產(chǎn)品僅用于科研實驗
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個新內(nèi)切位點的外源競爭性模板,。在同一反應(yīng)管中,，待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增（其中一個引物為熒光標(biāo)記）。擴增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,，競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個片段,，而待測模板不被酶切，可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開,，分別測定熒光強度,，根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù)。
b,、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標(biāo)和引物,，內(nèi)標(biāo)用基因工程方法合成。上游引物用熒光標(biāo)記,，下游引物不標(biāo)記,。在模板擴增的同時，內(nèi)標(biāo)也被擴增,。在PCR產(chǎn)物中,，由于內(nèi)標(biāo)與靶模板的長度不同，二者的擴增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來,，分別測定其熒光強度,，以內(nèi)標(biāo)為對照定量待檢測模板。
c,、PCR－ELISA法
利用di高辛等標(biāo)記引物,，擴增產(chǎn)物被固相板上特異的探針?biāo)Y(jié)合，再加入抗di高辛酶標(biāo)抗體－辣根過氧化物酶結(jié)合物，最終酶使底物顯色,。常規(guī)的PCR－ELISA法只是定性實驗,，若加入內(nèi)標(biāo)，作出標(biāo)準(zhǔn)曲線,，也可實現(xiàn)定量檢測目的,。

操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL,；空白孔不加,。
4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL,，用封板膜封住反應(yīng)孔,，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,，吸水紙上拍干,，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min,，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機洗板）,。
6.每孔加入底物A、B各50μL,，37℃避光孵育15min,。
7.每孔加入終止液50μL,，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值,。

下列是公司正在銷售的產(chǎn)品：
大鼠5'-AMP活化蛋白激酶α-2催化亞基(PRKAA2)ELISA試劑盒 ，英文名： PRKAA2 ELISA Kit

Mouse maix metalloproteinase inhibitor 1 (TIMP-1) ELISA Kit 小鼠基質(zhì)金屬抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒

MouseBladdeumoraigen,BTAELISAKit 小鼠膀胱腫瘤抗原(BTA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumaeplicationproteinA,RPA-70ELISAKit人復(fù)制蛋白A規(guī)格：48T/96T

通用型豬副豬嗜血桿菌(HPS)試劑盒20次

ELISAKitBDNF大鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子規(guī)格：48T/96T

小鼠羧甲基賴酸(CML)ELISA試劑盒 ，英文名： CML ELISA Kit

豚鼠肝細(xì)胞生長因子(HGF)ELISA檢測試劑盒guineapighepatocytegrowthfactor,HGFELISAKit 96T/48T

牛1免疫試劑盒 Bovine Coisone ELISA Kit

英文名稱HumanOsteocalcinELISAKit人骨橋素(Osteocalcin)規(guī)格：96T/48T

動物細(xì)胞/組織胞漿超氧化物歧化酶(Cu/ZnSOD)分離試劑盒50次

Ratsolubleclusterofdiffereiation14,sCD14ELISA試劑盒大鼠可溶性CD14(sCD14)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
基孔肯雅病毒PCR檢測試劑盒Anti-TRIM32/FITC 熒光素標(biāo)記TRIM32抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Substance P Receptor (Neurokinin receptor1;Tachykinin receptor1) P物質(zhì)受體(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

淋巴細(xì)胞生成素-1抗體 Anti-TSLP 0.1ml

Phospho-SRF (Ser77) 英文名稱： 0酸化血清應(yīng)答因子抗體 0.1ml

EIG121 英文名稱： 雌激素誘導(dǎo)基因121蛋白抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-IRAK1 (Thr209) 0酸化白介素-1受體相關(guān)激酶1抗體 規(guī)格 0.1ml

Substance P Receptor (Neurokinin receptor1;Tachykinin receptor1) P物質(zhì)受體(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg